-
题名GIP受体激动剂类药物筛选模型的构建
- 1
-
-
作者
周海燕
吴艳阳
刘东波
谢红旗
-
机构
湖南农业大学园艺园林学院
国家中医药管理局亚健康干预技术实验室
湖南农业大学食品科学技术学院
-
出处
《激光生物学报》
CAS
2017年第6期534-539,共6页
-
基金
国际科技合作与交流专项(2013DFG32060)
-
文摘
目的:GIP受体激动剂类药物筛选模型的构建。方法:GIP受体激动剂能刺激胰岛素分泌,可作为治疗Ⅱ型糖尿病的潜在药物,因此,GIP受体激动剂的筛选模型十分重要。本研究采用PCR的方法扩增GIPR基因,将扩增产物酶切回收后与表达载体pCMV6-AC-GFP连接,构建pCMV6-AC-GIPR-GFP重组质粒,转化大肠杆菌DH5α经菌落扩增、质粒提取及序列测序重组质粒;利用脂质体lipofectamine2000转染重组质粒到RIN-m5F细胞中,通过抗生素G418筛选,挑单克隆得到稳定的RIN-m5F/GIPR-GFP细胞株。结果:结果表明PCR扩增获得长度为1 319 bp的GIPR基因,克隆至pCMV6-AC-GFP真核表达载体,经菌落PCR酶切鉴定及序列分析后,证实质粒pCMV6-AC-GIPR-GFP构建成功;通过荧光显微镜观察到细胞内荧光分布均匀,表明重组质粒成功转到RINm5F细胞中。该细胞株经阳性对照(D-Ala^2)GIP处理后,与对照组对比,具有荧光斑点聚集。结论:因此,GIP受体激动剂筛选模型RIN-m5F/GIPR-GFP成功构建,可用于筛选新的GIP受体激动剂,为糖尿病药物开发提供新的筛选模型。
-
关键词
GIP受体激动剂
药物筛选模型
GFP
RIN-m5F
质粒转染
-
Keywords
gipr agonist
drug screening model
GFP
RIN-m5F
plasmid transfection
-
分类号
Q785
[生物学—分子生物学]
Q631
[生物学—生物物理学]
-