miR-17-5p在胃肠道间质瘤组织中的表达及其对GIST882细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨miR-17-5p在胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)组织中的表达及其对GIST882细胞增殖与凋亡的影响。方法:选取2019年5月至2020年5月广西医科大学第四附属医院胃肠外科手术切除的20例GIST患者的瘤组织及相应的瘤旁组织标本,以及GIST882细胞和人正常肠道上皮细胞HIEC为研究对象。荧光PCR-毛细管电泳测序法检测GIST标本中KIT基因突变情况。分别将miR-17-5p mimic和pc-KIT转染至GIST882细胞中。双荧光素酶报告基因实验验证miR-17-5p与KIT的靶向关系。qPCR和WB法检测GIST组织和细胞中miR-17-5p、KIT mRNA及蛋白的表达,CCK-8法、流式细胞术检测GIST882细胞的增殖、凋亡及细胞周期进程。结果:20例GIST组织中有15例患者发生KIT基因突变。与瘤旁组织比较,GIST组织中miR-17-5p表达水平显著降低、KIT mRNA表达水平显著升高(均P<0.01);与HIEC细胞比较,GIST882细胞中miR-17-5p表达显著降低、KIT m RNA和蛋白表达显著升高(均P<0.01)。过表达miR-17-5p可显著降低GIST882细胞的增殖能力(P<0.01)、提高细胞凋亡率(P<0.05)、sub-G1期和S期细胞比例显著增加(均P<0.05)、而G0/G1期的细胞比例显著减少(P<0.05),同时KIT蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实KIT是miR-17-5p的下游靶基因。同时过表达miR-17-5p和KIT对GIST882细胞的增殖、细胞周期进程和凋亡水平未产生明显影响。结论:过表达miR-17-5p可显著抑制GIST882细胞的增殖并诱导细胞凋亡,同时下调KIT蛋白的表达,miR-17-5p可能是治疗GIST的潜在靶标。