GKN1在子痫前期胎盘中的表达及参与发病的机制研究

研究正常妊娠和子痫前期胎盘组织中GKN1mRNA及蛋白质的表达情况,通过体外细胞学实验探讨GKN1对滋养细胞侵袭、迁移和增殖的影响以及GKN1与JAK-STAT信号通路的关系研究了解其发挥作用的生物学机理,旨在为研究子痫前期的发病机制以及早期诊治提供新思路。方法 收集正常妊娠和子痫前期胎盘组织各30例,检测GKN1的表达;低氧1%环境下培养HTR-8/Svneo细胞在体外模拟子痫前期进行验证;通过小干扰RNA转染处理来敲降GKN1,然后通过MTT实验和EdU实验检测对增殖能力的影响,Transwell实验检测侵袭能力以及划痕实验检测对细胞迁移能力的影响;Westernblot检测敲降GKN1对低氧条件下HTR-8/Svneo细胞中p-JAK2、JAK2、p-STAT3和STAT3的表达变化的影响。结果 与正常妊娠比较,子痫前期胎盘组织GKN1mRNA表达水平和蛋白表达水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组织化学结果显示,子痫前期胎盘组织中GKN1的表达增加。HTR-8/SVneo细胞在低氧条件下培养,GKN1的mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P<0.01)。GKN1敲低导致低氧条件下HTR-8/SVneo细胞的增殖能力增加,迁移和侵袭能力显著加强。GKN1敲低时低氧条件下的HTR-8/Svneo细胞中p-JAK2和p-STAT3蛋白质表达水平增加,JAK-STAT信号通路被激活。结论 子痫前期患者胎盘中GKN1在翻译及转录水平表达增高,GKN1对滋养细胞的增殖、迁移和侵袭有抑制作用,由此推测GKN1可能通过调控JAK-STAT信号通路参与子痫前期的发病。

胃癌中抑癌基因GKN1和p16的表达及意义

目的观察胃动蛋白1(gastrokine-1,GKN1)和p16蛋白在胃癌和正常胃组织中的表达,探讨二者表达与胃癌临床病理特征的关系,为获取胃癌诊断和预后相关的蛋白分子提供实验依据。方法应用免疫组化EliVision Plus法检测78例胃癌和30例正常胃黏膜中GKN1和p16蛋白的阳性率。结果正常胃黏膜组织和胃癌组织中GKN1的阳性率分别为93.3%与15.4%;正常胃黏膜组织和胃癌组织中p16的阳性率分别为96.7%和32.1%,GKN1和p16在胃癌组织中表达下调;GKN1表达与胃癌临床分期、Lauren分类和HP感染有关(P<0.05),p16蛋白表达与胃癌临床分期、分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论 GKN1和p16均为抑癌基因,二者在胃癌中的表达缺失均与胃癌的发生密切相关。

胃动蛋白1在胃癌组织中的表达

目的探讨胃动蛋白1(GKN1)在正常胃黏膜、癌前病变及胃癌组织中表达差异,并分析其与肿瘤部位和病理分型的关系。方法对30例胃癌患者(12例弥漫型和18例肠型),13例萎缩性胃炎患者和15例健康志愿者留取标本,并行幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)检测。癌旁标本取自相应的胃癌患者。采用χ2检验分析H.pylori感染与研究对象临床病理因素之间的关系;分别采用免疫组化法和实时定量PCR法检测GKN1蛋白和GKN1 mRNA的表达,并通过单因素方差分析观察其与组织类型的关系。结果 H.pylori感染率在不同性别、肿瘤部位及病理类型中无统计学差异(P>0.05);与正常对照组和萎缩性胃炎组相比较,胃癌和癌旁组织中GKN1蛋白及mRNA表达水平显著下降(P<0.05 or P<0.01);弥漫型胃癌组织中GKN1 mRNA水平明显低于肠型胃癌组织(P<0.01)。结论 GKN1表达水平的下降可能与胃癌的发生有关,且不同病理分型中GNK1表达水平不一样。