GLP-1(7-36)NH_2的促胰岛素分泌作用和胞内cAMP浓度改变与胰岛素mRNA表达

目的 :观察GLP 1( 7 3 6)NH2 的促胰岛素分泌作用 ,并进一步探讨GLP 1( 7 3 6)NH2 促进胰岛素分泌的机制。方法 :放射免疫分析和细胞原位杂交的方法。结果 :随着GLP 1( 7 3 6)NH2 浓度的增加 ,胰岛素分泌逐渐增加 ;8 Br cAMP增加了胰岛素分泌 ,GLP 1( 7 3 6)NH2 则增加了胞内第二信使cAMP的浓度 ;GLP 1( 7 3 6)NH2 可增加胰岛素mRNA的表达。结论 :GLP 1( 7 3 6)NH2 可促进胰岛素分泌 ,在一定范围内呈剂量依赖性 ,其机制与GLP 1( 7 3 6)NH2

胰高糖素样肽GLP-1(7-36)NH_2对体外培养的新生大鼠胰岛细胞作用的研究

目的与方法探讨ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２对培养的新生大鼠胰岛细胞胰岛素和胶高糖素释放的影响，并以Ｆｌｕｏ－３为探针，用５７０型粘附式细胞仪研究ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２对β细胞内Ｃａ２＋的作用。结果在含１１．２ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖的ＫＲＢＢ液中孵育１ｈ，ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２在１０~－１１－１０~－８ｍｏｌ／Ｌ使胰岛细胞胰岛素分泌增加和胰高糖素分泌减少；在１０~－９ｍｏｌ／Ｌ时，促胰岛素释放作用最大。在含２.８ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖时，ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２使胰岛素分泌无明显增加，但在含葡萄糖５６、１１．２和１６.７ｍｍｏｌ／Ｌ时，胰岛素分泌明显增加：在含葡萄糖１６．７ｍｍｏｌ／Ｌ时，ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２使胰岛β细胞内Ｃａ~２＋升高明显。结论ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２具有葡萄糖浓度依赖的促胰岛素释放作用和抑制胰高糖素分泌作用。

胰高糖素样肽-1(7-36)NH_2引起的胰岛β细胞内游离钙变化

目的探讨胰高糖素样肽（ＧＬＰ）－１（７－３６）ＮＨ_２促胰岛素分泌的机制。方法以 Ｆｌｕｏ－３为探针，用粘附式细胞仪研究 ＧＬＰ－ １（７－ ３６）ＮＨ_２对培养的新生大鼠胰岛β细胞内游离 Ｃａ^（２＋）浓度的作用。结果在 ２．８ ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖时，ＧＬＰ－ １（７－ ３６）ＮＨ_２不能使胰岛 β细胞内游离 Ｃａ^（２＋）升高，而优降糖使β细胞内游离 Ｃａ^（２＋）升高明显。在 １６．７ ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖时，ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２使胰岛β细胞内Ｃａ^（２＋）升高明显，ＥＧＴＡ和硝苯吡啶能完全阻滞ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２引起的Ｃａ^（２＋）升高。结论ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２具有葡萄糖浓度依赖的促胰岛素释放作用，细胞外Ｃａ^（２＋）通过电压依赖性钙通道内流对其引起的β细胞内游离Ｃａ^（２＋）升高起重要作用。

胰高糖素样肽-1(7-36)NH_2引起胰岛β细胞cAMP的变化

目的 探讨GLP -1(7-36 )NH2 促胰岛素分泌的细胞内机制。方法 用放免法检测GLP -1(7-36 )NH2 在不同葡萄糖浓度下对培养的新生大鼠胰岛 β细胞的胰岛素分泌量和cAMP含量的变化。 结果 在 2 .8mmol/L葡萄糖时 ,GLP -1(7-36 )NH2 使 β细胞胰岛素分泌和cAMP含量无明显增加 ;优降糖能使胰岛素分泌增加 ,而cAMP含量无明显变化。在 5 .6 ,11.2和 16 .7mmol/L葡萄糖时 ,GLP -1(7-36 )NH2 使胰岛素分泌和cAMP含量均明显增加。在 16 .7mmol/L葡萄糖时 ,加入EGTA或硝苯吡啶后 ,GLP -1(7-36 )NH2 不能引起胰岛素分泌 ,但仍使cAMP含量增加。结论 GLP -1(7-36 )NH2 具有葡萄糖浓度依赖的刺激cAMP生成的作用 。

胰升糖素样肽GLP－1（7－36）NH_2对血糖和血糖调节激素的影响

采用ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２外周灌流及脑室注射到禁食大鼠的方法，观察ＧＬＰ－１（７－６）ＮＨ２对大鼠血糖及血糖调节激素的影响。结果表明：静脉输入ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２使糖耐量曲线明显低平，血糖浓度恢复实验前水平比对照组提前。一次性推注葡萄糖后，外周输入ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２使Ｃ肽特别是胰岛素浓度明显增高，而不影响胰升糖素的水平。脑室注射ＧＬＰ－１（７３６）ＮＨ２对血糖无明显影响。本实验表明ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２在一次性推注葡萄糖后是通过刺激胰岛β细胞的分泌来调节血糖水平的。ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２可能在糖尿病的致病机理中起重要作用。本研究为研制ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２高活性类似物奠定了基础。

GLP-1（7-36）对高糖状态下人脐静脉内皮细胞活性的影响及其机制的初步研究

目的：研究GLP-1（7-36）对高糖培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）活性的影响及相关机制.方法：正糖（5mmol/l）和高糖（33mmol/l）环境下培养的HUVECs分别加入不同浓度的GLP-1（7-36）（0nmol/l,0.3nmol/l,3nmol/l,30nmol/l）并干预不同时间（24h,48h,72h）后行MTT检测细胞活力.选择某个合适的GLP-1（7-36）干预浓度和时间后继续行一氧化氮（NO）浓度检测.结果：①高糖培养48h、72h分别较正糖培养48h、72h细胞活力下降（p〈0.05）,②高糖培养环境下经3 nmol/l、30nmol/l浓度 GLP-1（7-36）分别干预48h、72h后较高糖对照组细胞活力显著增加（p〈0.01）,而正常糖培养环境下分别加入不同浓度GLP-1（7-36）干预不同时间后均与正糖对照组细胞活力无差异,③高糖培养48h较正糖培养下细胞培养上清液中NO的量下降,高糖组加入3nmol/l的GLP-1（7-36）后NO的量增加,正糖组中加入3nmol/l的GLP-1（7-36）后NO产量不变.结论：GLP-1（7-36）可以改善高糖引起的HUVECs活力的下降,且该保护作用与NO相关.

CGRP对GLP-1和胰岛素分泌的影响

目的 :进一步探讨类胰高血糖素肽 1(GLP 1)的分泌机制和生理意义。方法 :应用三种不同浓度的降钙素基因相关肽 (CGRP)进行实验 ,通过放射免疫分析方法检测CGRP对GLP 1和胰岛素分泌的影响。结果 :无论外源性葡萄糖是否存在 ,低浓度组和中浓度组CGRP于各实验时间对GLP 1、胰岛素分泌均无影响 ,P >0 .0 5;而高浓度组CGRP均刺激GLP 1、胰岛素的分泌 ,并随CGRP处理时间的延长 ,GLP 1(7～ 3 6)酰胺、胰岛素血浆水平呈逐渐增加趋势 ,并以 90min水平最高 ,与对照组相比差异存在显著性 ,P <0 .0 1。结论 :CGRP对胰岛素刺激可能是全部或部分通过GLP 1途径发挥作用 ;低、中浓度的CGRP不能影响GLP 1和胰岛素分泌 ,高浓度的CGRP能刺激GLP

脑室给予胰升糖素样肽GLP－1（7－36）对大鼠血糖及血糖调节激素的影响

采用给禁食大鼠脑室灌注溶于不同溶剂中的ＧＬＰ－１（７－３６）的方法，观察ＧＬＰ－１在中枢对大鼠血糖及血糖调节激素浓度的影响。结果表明：脑室灌注溶于生理盐水的ＧＬＰ－１与单纯灌注生理盐水相比，血糖无明显变化，但１小时后，血中胰岛素、胰升糖素浓度均明显降低；脑室灌注溶于３０％葡萄糖的ＧＬＰ－１与单纯灌注３０％葡萄糖相比，血糖明显升高，在３０’、４５’、６０’有显著性差异，血中胰岛素浓度明显低于对照组，胰升糖素浓度无变化。这些实验说明ＧＬＰ－１参与了中枢神经系统对胰岛分泌激素功能的调节。

胰高血糖素样肽1(GLP-1)对心血管疾病治疗的研究进展

胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)是肠道L细胞分泌的一种由30个氨基酸组成的多肽,具有促进胰岛素分泌,抑制胰高血糖素分泌和刺激胰岛β细胞增殖等生物学作用。GLP-1在体内主要以GLP-1(7-36a)的形式存在。GLP-1(7-36a)的半衰期很短(1～2 min),可被二肽基肽酶4(diaminopeptidyl peptidase-4,DPP4)迅速降解为GLP-1(9-36a),因此GLP-1(9-36a)是GLP-1在循环中的主要存在形式。GLP-1不仅具有调控血糖和能量代谢的作用,还有保护心肌细胞、改善心脏功能和舒张血管等作用,直接或间接发挥心血管保护效应。心血管疾病是2型糖尿病的常见并发症和首要死因。目前基于GLP-1的2型糖尿病药物研发主要有两个方向:可以抵抗DPP4降解的GLP-1受体(GLP-1R)激动剂和DPP4抑制剂。虽然,这两种方法均可延长内源性GLP-1的作用,但显然未兼顾GLP-1(9-36a)对心脏的保护效应。本文通过总结GLP-1(7-36a)及GLP-1(9-36a)在心血管效应方面的异同及其生理学研究进展,探讨GLP-1应用于心血管疾病治疗的新策略。

注射用重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)与二甲双胍合用治疗2型糖尿病的临床研究

目的探讨注射用重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)〔rhGLP-1(7-36)〕与二甲双胍合用治疗2型糖尿病(T2DM)的临床效果。方法采取随机、双盲、安慰剂对照的试验设计,36例T2DM患者在应用二甲双胍治疗的基础上随机分入用药组与安慰剂组,分别给予皮下注射rhGLP-1(7-36)(0.2 mg)及安慰剂(甘露醇,2.5 mg)治疗12周;观察基线及12周后用药组与安慰剂组的糖化血红蛋白(HbA1C)、空腹血糖(FPG)及胰岛素水平(FINS)、餐后2 h静脉血糖(2 h PG)及胰岛素水平(2 h INS)、血脂、血压、体质量指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素分泌指数(HOMA-IS)等指标的变化,同时记录低血糖事件及不良反应的发生情况。结果在应用二甲双胍治疗的基础上,用药组的T2DM患者在给予rhGLP-1(7-36)治疗12周后,HbA1C、FPG、2 h PG值以及体质量、BMI均比基线时有所降低,其差异具有统计学意义(P<0.05),低血糖发生率为2.8%。结论 rhGLP-1(7-36)联合二甲双胍治疗T2DM有效并且低血糖发生率低,可成为治疗新的选择。

重组人胰高血糖素类多肽1(7-36)在2型糖尿病患者中的药动学研究

目的:研究重组胰高血糖素类多肽1(7-36)[rhGLP-1(7-36)]在2型糖尿病患者单次和多次给药的药动学特征。方法:将轻型2型糖尿病患者16例,随机分为0.1、0.2mg剂量组,每组8例,试验前1天给予同体积生理盐水,第1～5天每日3餐前5min腹部皮下注射rhGLP-1(7-36)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别测定给药前1天及给药第1、5天各时间点(给药前0min及给药后5、10、20、30、40、50、60、70、90、120min)rhGLP-1(7-36)的血药浓度以及第2～4天谷峰浓度。应用DAS2.1.1软件计算药动学参数,SPSS13.0软件进行统计分析。结果:两组首次给药药动学参数分别为:tmax(22.5±11.65)、(17.50±7.07)min,t1/2z(15.78±6.82)、(12.12±5.52)min,cmax(142.69±96.64)、(407.29±287.48)ng/L,AUC0-120min(3783.64±2177.03)、(9034.88±4262.92)ng.min/L,MRT0-120min(30.69±6.32)、(26.44±6.02)min;2组末次给药药动学参数分别为:tmax(26.25±7.44)、(16.25±5.18)min,t1/2z(20.72±13.44)、(12.97±6.46)min,cmax(118.05±38.39)、(361.11±217.81)ng/L,AUC0-120min(3321.91±993.47)、(9514.97±5077.89)ng.min/L,MRT0-120min(30.34±4.81)、(24.29±4.52)min;多次给药的蓄积指数分别为(0.96±0.32)、(0.88±0.43)。两组间首次给药的药动学参数AUC0-120min、AUC0-∞、cmax比较差异有统计学意义,在0.1～0.2mg剂量范围内呈剂量依赖性;两组间末次给药各药动学参数比较,差异均无统计学意义;两组内首末次给药的药动学参数比较差异均无统计学意义。结论:2型糖尿病患者腹部皮下单剂量注射rhGLP-1(7-36)后,在0.1～0.2mg剂量范围内符合线性药动学过程;多次给药不会引起药动学参数的改变,体内无蓄积。