GLP-1（7-36）对高糖状态下人脐静脉内皮细胞活性的影响及其机制的初步研究

目的：研究GLP-1（7-36）对高糖培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）活性的影响及相关机制.方法：正糖（5mmol/l）和高糖（33mmol/l）环境下培养的HUVECs分别加入不同浓度的GLP-1（7-36）（0nmol/l,0.3nmol/l,3nmol/l,30nmol/l）并干预不同时间（24h,48h,72h）后行MTT检测细胞活力.选择某个合适的GLP-1（7-36）干预浓度和时间后继续行一氧化氮（NO）浓度检测.结果：①高糖培养48h、72h分别较正糖培养48h、72h细胞活力下降（p〈0.05）,②高糖培养环境下经3 nmol/l、30nmol/l浓度 GLP-1（7-36）分别干预48h、72h后较高糖对照组细胞活力显著增加（p〈0.01）,而正常糖培养环境下分别加入不同浓度GLP-1（7-36）干预不同时间后均与正糖对照组细胞活力无差异,③高糖培养48h较正糖培养下细胞培养上清液中NO的量下降,高糖组加入3nmol/l的GLP-1（7-36）后NO的量增加,正糖组中加入3nmol/l的GLP-1（7-36）后NO产量不变.结论：GLP-1（7-36）可以改善高糖引起的HUVECs活力的下降,且该保护作用与NO相关.

胰高糖素样肽-1(7-36)NH_2引起的胰岛β细胞内游离钙变化

目的探讨胰高糖素样肽（ＧＬＰ）－１（７－３６）ＮＨ_２促胰岛素分泌的机制。方法以 Ｆｌｕｏ－３为探针，用粘附式细胞仪研究 ＧＬＰ－ １（７－ ３６）ＮＨ_２对培养的新生大鼠胰岛β细胞内游离 Ｃａ^（２＋）浓度的作用。结果在 ２．８ ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖时，ＧＬＰ－ １（７－ ３６）ＮＨ_２不能使胰岛 β细胞内游离 Ｃａ^（２＋）升高，而优降糖使β细胞内游离 Ｃａ^（２＋）升高明显。在 １６．７ ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖时，ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２使胰岛β细胞内Ｃａ^（２＋）升高明显，ＥＧＴＡ和硝苯吡啶能完全阻滞ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２引起的Ｃａ^（２＋）升高。结论ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２具有葡萄糖浓度依赖的促胰岛素释放作用，细胞外Ｃａ^（２＋）通过电压依赖性钙通道内流对其引起的β细胞内游离Ｃａ^（２＋）升高起重要作用。

胰高糖素样肽-1(7-36)NH_2引起胰岛β细胞cAMP的变化

目的 探讨GLP -1(7-36 )NH2 促胰岛素分泌的细胞内机制。方法 用放免法检测GLP -1(7-36 )NH2 在不同葡萄糖浓度下对培养的新生大鼠胰岛 β细胞的胰岛素分泌量和cAMP含量的变化。 结果 在 2 .8mmol/L葡萄糖时 ,GLP -1(7-36 )NH2 使 β细胞胰岛素分泌和cAMP含量无明显增加 ;优降糖能使胰岛素分泌增加 ,而cAMP含量无明显变化。在 5 .6 ,11.2和 16 .7mmol/L葡萄糖时 ,GLP -1(7-36 )NH2 使胰岛素分泌和cAMP含量均明显增加。在 16 .7mmol/L葡萄糖时 ,加入EGTA或硝苯吡啶后 ,GLP -1(7-36 )NH2 不能引起胰岛素分泌 ,但仍使cAMP含量增加。结论 GLP -1(7-36 )NH2 具有葡萄糖浓度依赖的刺激cAMP生成的作用 。

胰升糖素样肽GLP－1（7－36）NH_2对血糖和血糖调节激素的影响

采用ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２外周灌流及脑室注射到禁食大鼠的方法，观察ＧＬＰ－１（７－６）ＮＨ２对大鼠血糖及血糖调节激素的影响。结果表明：静脉输入ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２使糖耐量曲线明显低平，血糖浓度恢复实验前水平比对照组提前。一次性推注葡萄糖后，外周输入ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２使Ｃ肽特别是胰岛素浓度明显增高，而不影响胰升糖素的水平。脑室注射ＧＬＰ－１（７３６）ＮＨ２对血糖无明显影响。本实验表明ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２在一次性推注葡萄糖后是通过刺激胰岛β细胞的分泌来调节血糖水平的。ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２可能在糖尿病的致病机理中起重要作用。本研究为研制ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２高活性类似物奠定了基础。

脑室给予胰升糖素样肽GLP－1（7－36）对大鼠血糖及血糖调节激素的影响

采用给禁食大鼠脑室灌注溶于不同溶剂中的ＧＬＰ－１（７－３６）的方法，观察ＧＬＰ－１在中枢对大鼠血糖及血糖调节激素浓度的影响。结果表明：脑室灌注溶于生理盐水的ＧＬＰ－１与单纯灌注生理盐水相比，血糖无明显变化，但１小时后，血中胰岛素、胰升糖素浓度均明显降低；脑室灌注溶于３０％葡萄糖的ＧＬＰ－１与单纯灌注３０％葡萄糖相比，血糖明显升高，在３０’、４５’、６０’有显著性差异，血中胰岛素浓度明显低于对照组，胰升糖素浓度无变化。这些实验说明ＧＬＰ－１参与了中枢神经系统对胰岛分泌激素功能的调节。

CGRP对GLP-1和胰岛素分泌的影响

目的 :进一步探讨类胰高血糖素肽 1(GLP 1)的分泌机制和生理意义。方法 :应用三种不同浓度的降钙素基因相关肽 (CGRP)进行实验 ,通过放射免疫分析方法检测CGRP对GLP 1和胰岛素分泌的影响。结果 :无论外源性葡萄糖是否存在 ,低浓度组和中浓度组CGRP于各实验时间对GLP 1、胰岛素分泌均无影响 ,P >0 .0 5;而高浓度组CGRP均刺激GLP 1、胰岛素的分泌 ,并随CGRP处理时间的延长 ,GLP 1(7～ 3 6)酰胺、胰岛素血浆水平呈逐渐增加趋势 ,并以 90min水平最高 ,与对照组相比差异存在显著性 ,P <0 .0 1。结论 :CGRP对胰岛素刺激可能是全部或部分通过GLP 1途径发挥作用 ;低、中浓度的CGRP不能影响GLP 1和胰岛素分泌 ,高浓度的CGRP能刺激GLP

胰高血糖素样肽1(GLP-1)对心血管疾病治疗的研究进展

胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)是肠道L细胞分泌的一种由30个氨基酸组成的多肽,具有促进胰岛素分泌,抑制胰高血糖素分泌和刺激胰岛β细胞增殖等生物学作用。GLP-1在体内主要以GLP-1(7-36a)的形式存在。GLP-1(7-36a)的半衰期很短(1～2 min),可被二肽基肽酶4(diaminopeptidyl peptidase-4,DPP4)迅速降解为GLP-1(9-36a),因此GLP-1(9-36a)是GLP-1在循环中的主要存在形式。GLP-1不仅具有调控血糖和能量代谢的作用,还有保护心肌细胞、改善心脏功能和舒张血管等作用,直接或间接发挥心血管保护效应。心血管疾病是2型糖尿病的常见并发症和首要死因。目前基于GLP-1的2型糖尿病药物研发主要有两个方向:可以抵抗DPP4降解的GLP-1受体(GLP-1R)激动剂和DPP4抑制剂。虽然,这两种方法均可延长内源性GLP-1的作用,但显然未兼顾GLP-1(9-36a)对心脏的保护效应。本文通过总结GLP-1(7-36a)及GLP-1(9-36a)在心血管效应方面的异同及其生理学研究进展,探讨GLP-1应用于心血管疾病治疗的新策略。