抵抗素结合多肽对3T3-L1脂肪细胞分化、脂代谢及葡萄糖转运体4基因表达的影响

目的观察抵抗素结合多肽(RBP)对3T3-L1脂肪细胞分化、脂代谢及葡萄糖转运体4(GLUT-4)基因表达的影响。方法构建大鼠抵抗素真核表达载体并转染3T3-L1前体脂肪细胞,获得稳定表达抵抗素基因细胞株;采用台盼蓝排斥试验,确定理想的RBP干预浓度,于诱导细胞分化第0天加入培养液;采用油红O染色,观察脂肪细胞分化及脂质积聚情况;采用RT-PCR技术检测脂肪细胞分化标志基因及GluT-4基因表达变化;采用全自动生化仪比色法,检测脂肪细胞内TG和游离脂肪酸FFAs含量的变化。结果(1)RBP浓度10-12mol/L时,脂肪细胞活细胞数比例较高,且细胞形态无明显改变。(2)RBP对正常脂肪细胞分化进程无明显影响,RBP虽未影响抵抗素稳定表达脂肪细胞内脂滴的出现时间,但细胞内脂滴的数目明显减少。(3)RBP对正常脂肪细胞分化标志基因及抵抗素稳定表达细胞分化早期标志基因Pref-1的表达无明显影响,但明显下调抵抗素稳定表达细胞分化中晚期标志基因C/EBPα和FAS的表达水平。(4)RBP对正常脂肪细胞内TG、FFAs含量无影响,但可显著降低抵抗素稳定表达脂肪细胞内的TG、FFAs含量。(5)RBP干预对正常脂肪细胞及抵抗素稳定表达脂肪细胞中GluT-4基因的表达水平均无显著影响。结论RBP对正常3T3-L1脂肪细胞的分化、脂代谢、GluT-4基因表达均无明显影响,但能有效拮抗抵抗素基因,显著促进3T3-L1脂肪细胞分化及脂代谢。

小型猪葡萄糖转运子4外显子4a的基因多态性分析

目的分析我国特有的3个小型猪品系巴马小型猪、中国农大小型猪、五指山小型猪葡萄糖转运子4基因外显子4a的单核苷酸多态性(SNPs)分布特点,为我国小型猪在糖尿病和代谢性疾病研究中提供基础资料。方法以3个品系小型猪基因组DNA为模板,应用特异性引物进行PCR扩增,扩增产物纯化测序,进行BLAST比对分析。结果在小型猪GLUT-4基因外显子4a上有2个SNP位点:SNP1:GCT→GCC(Ala133 Ala),3个品系均发生了变化,均为纯合突变,其突变率为(22/22,100%)。SNP2:GGC→GGT(Gly146 Gly),巴马小型猪突变率为(6/6,100%),均为纯合突变;五指山小型猪突变率为(6/6,100%),均为纯合突变;中国农大小型猪突变率为(10/10,100%),其中包括6例纯合突变(6/10,60%)和4例杂合突变(4/10,40%)。结论SNPs1,在所有测定的小型猪品系中检出,这可能是所测小型猪的共有特征。SNPs2可能是小型猪品系之间的差异。

葡萄糖转运蛋白4基因多态性与诱导性高血脂症小鼠血脂性状的相关性分析

营养基因组学应用基因组学技术阐明与营养相关的单核苷酸多态性（SNPs），并用来研究人体对某些疾病易感性以及对营养素（食物）需求的个体间差异。通过对营养与基因的相互作用的研究，加深对慢性疾病的更深层次认识。进一步研究表明，个体遗传差异使得部分个体对引起高脂血症的某些环境因素（如饮食）更加易感，高脂血症的发生是营养素与基因互作的结果，膳食对血脂相关基因表达的影响，可从基因转录到翻译后的修饰，人们对这些过程中的细节还不清划引。