Smo和Gli1蛋白在眼睑基底细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Smo和Gli1蛋白在眼睑基底细胞癌(EBCC)组织中的表达及临床意义。方法选取焦作市人民医院眼科收治的眼睑基底细胞癌患者40例为研究对象,采用免疫组织化学方法检测EBCC患者癌组织及癌旁组织细胞内Smo和Gli1蛋白的表达。设计资料调查表,详细统计所选患者的基本资料,分析不同病理特征EBCC患者组织中Smo和Gli1蛋白的表达情况,并分析组织中Smo和Gli1蛋白表达不同的眼睑基底细胞癌患者预后情况。结果EBCC组织中Smo蛋白阳性表达率显著高于癌周正常黏膜组织(P<0.05);EBCC组织中Gli1蛋白阳性表达率显著高于癌周正常黏膜组织(P<0.05)。不同的性别、年龄、BMI、发病部位患者的癌组织中Smo与Gli1蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同肿瘤分化程度患者癌组织中Smo与Gli1蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。经Log-rank检验,Smo和Gli1蛋白阴性表达患者1年内复发率均明显低于阳性患者(P<0.05)。经Kendall’s tau-b相关分析结果发现,组织中Smo蛋白表达与Gli1蛋白表达呈正相关(γ=0.350,P=0.010)。结论Smo和Gli1蛋白在EBCC组织中的阳性表达率更高,可以作为EBCC早期诊断的标志物。Smo和Gli1蛋白的表达水平与分化程度有关,且与EBCC预后有密切关系,可以在临床上为眼睑基底细胞癌的发展与预后评估提供参考。

Gli1蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与血管生成的关系

目的研究Hedgehog/Gli1信号通路中Gli1蛋白在人乳腺癌组织中的表达,初步探讨Gli1与乳腺癌血管生成的关系。方法采用免疫组织化学SP法测定79例乳腺癌标本、68例癌旁组织及42例乳腺纤维腺瘤组织中Gli1蛋白的表达;同时用CD34单克隆抗体标记乳腺癌组织中新生血管,计算肿瘤MVD并分析Gli1蛋白的表达与MVD的关系。结果乳腺癌组织中Gli1阳性率显著高于乳腺纤维腺瘤和癌旁正常组织;Gli1在Ⅲ期乳腺癌中的阳性表达率要高于Ⅰ～Ⅱ期乳腺癌(P<0.05)。Gli1在有腋窝淋巴结转移组中的阳性表达率高于无淋巴结转移组(P<0.05);相关性分析显示乳腺癌组织中Gli1与MVD表达呈正相关(r=0.325,P<0.05)。结论 Gli1蛋白在乳腺癌中活化,并参与了乳腺癌的发生发展,促进新生血管的生成是其可能的机制之一。

Hedgehog信号通路相关蛋白Gli1在乳腺癌中的表达及其意义

目的探讨Hedgehog信号通路转录因子Gli1在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色检测Hedgehog信号通路相关蛋白Gli1在102例乳腺浸润性导管癌及30例癌旁正常组织中的表达,并分析其表达与临床病理特征的关系。结果 Gli1蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为75.5%(77/102),高于癌旁正常组织的26.7%(8/30),两者差异有统计学意义(P<0.05)。Gli1蛋白的表达与腋窝淋巴结转移、雌激素受体(ER)表达有关(P<0.05),而与患者的年龄、绝经状况、肿瘤直径、病理分期、组织学分级、孕激素受体(PR)及人表皮生长因子受体-2(HER-2)表达状况均无关(P>0.05)。结论 Hedgehog信号通路相关蛋白Gli1在乳腺癌组织中存在高表达,其一定程度上对ER表达起到负向调节作用。

Hedgehog/Gli1通路在雷奈酸锶促进骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的作用

目的：探讨Hedgehog/Gli1信号通路在雷奈酸锶（strontium ranelate,Sr）促进骨髓间充质干细胞（BMSCs）向成骨细胞分化中的作用。方法：体外分离培养大鼠BMSCs,诱导其成骨分化,根据实验目的加入不同浓度的Sr、Hedgehog受体拮抗剂cyclopamine（Cy）及Gli1小干扰RNA（Gli1-siRNA）。用Western blotting法检测Gli1及Runx2的表达,酶标法检测碱性磷酸酶（ALP）活性,茜素红染色法检测钙结节水平。结果：应用不同浓度的Sr（0.1-5 mmol/L）处理BMSCs细胞7 d后,细胞内Gli1蛋白表达增高,Sr的浓度为3 mmol/L时,Gli1表达达到高峰;使用Cy与Sr共处理BMSCs 7 d,能拮抗Sr对Gli1蛋白表达的上调作用;应用Gli1-siRNA转染细胞后,能下调Gli1蛋白的表达,并抑制Sr对Gli1下游Runx2蛋白表达的上调作用,还可拮抗Sr对ALP活性及钙化结节形成的促进作用。结论：Hedgehog/Gli1通路参与了Sr促进骨髓间充质干细胞向成骨分化的过程。

MTSS1和Gli1蛋白在子宫内膜腺癌组织中的表达及意义

目的探讨MTSS1和Gli1蛋白在子宫内膜腺癌组织中的表达及临床意义。方法选取2010年5月—2015年7月我院妇产科收治的36例子宫内膜腺癌患者的病变内膜组织作为研究组,同时选取36例因子宫平滑肌瘤行全子宫切除术的患者的子宫内膜组织作为对照组,采用免疫组化法检测2组研究样本中MTSS1和Gli1蛋白的阳性表达情况。结果研究组患者的病变组织中MTSS1蛋白阳性表达率明显低于对照组患者子宫内膜组织(P<0.05);Gli1蛋白阳性表达率明显高于对照组患者子宫内膜组织(P<0.05)。结论 MTSS1蛋白在子宫内膜腺癌组织中低表达,Gli1蛋白在子宫内膜腺癌组织中高表达,两种蛋白可能与子宫内膜癌的发生、发展存在密切关系,有可能成为子宫内膜腺癌诊断及病情监测的辅助参考指标。

CGRP减轻高氧诱导的早产鼠肺泡Ⅱ型细胞损伤及对Gli1表达的影响

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对高氧致早产鼠肺泡Ⅱ型细胞(AECⅡ)损伤的保护作用及对Sonichedgehog(Shh)通路Gli1蛋白表达的影响和意义。方法分离纯化早产鼠AECⅡ,分为空气、空气+CGRP、空气+CGRP+CGRP拮抗剂(CGRP8-37)、高氧(95%O2)、高氧+CGRP及高氧+CGRP+CGRP8-37组。培养24 h后观察AECⅡ形态,流式细胞术检测凋亡率,荧光分子探针法检测细胞内活性氧(ROS),分光光度法检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD);RT-qPCR检测表面活性蛋白C(SPC)mRNA,Western blot检测Gli1蛋白表达。结果95%O2诱导24 h后,AECⅡ凋亡率比空气对照增加3.6倍,ROS水平增加1.5倍,MDA增加65%,SOD降低近一半,SPC mRNA和Gli1蛋白表达显著降低(均P<0.05);CGRP干预后可显著减轻上述变化(P<0.05)。结论CGRP可减轻高氧诱导的AECⅡ损伤,其机制可能与Shh信号通路的激活有关。

VDR和GLi1在前列腺癌细胞PC-3中的表达及其相关性

目的初步探讨慢病毒携带sh RNA-VDR载体干扰前列腺癌PC-3细胞中VDR基因对GLi1的影响。方法依照PC-3细胞的培养条件培养细胞;采用荧光定量PCR法和免疫细胞化学SP法检测PC-3细胞中VDR、GLi1两个基因表达情况;对PC-3细胞病毒侵染进行效率评价;运用RT-PCR法检测PC-3细胞VDR基因干扰效果及Gli1转录水平改变情况。结果细胞培养:拍照记录细胞状态:PC-3细胞生长状态良好,以4 d为1周期进行传代;荧光定量PCR法和免疫细胞化学SP法显示VDR、GLi1均在PC-3细胞中表达;慢病毒侵染效率显示为按照1∶10的比例向PC-3细胞加入LV3-NC慢病毒时,细胞侵染效率最好,约为95%左右;RT-PCR显示:VDR-sh RNA慢病毒成功干扰VDR表达,在VDR-sh RNA慢病毒转染72 h后与对照组相比实验组VDR基因转录水平下降85%(P<0.05),同时实验组GLi1基因转录水平与对照组相比上升9%(P<0.05);而当转染96 h后实验组VDR基因转录水平与对照组相比下降99%(沉默),同时实验组GLi1基因转录水平与对照组相比上升248%(P<0.05)。结论所培养的PC-3细胞状态较好;VDR和GLi1基因在PC-3细胞中均表达;慢病毒按照1∶10的比例侵染PC-3效率最高;当VDR被干扰后GLi1表达增高,因而在前列腺癌细胞中维生素D可抑制Hh信号通路可致GLi1表达下调。

Hedgehog信号通路中下游转录因子GLI1在鼻咽癌中的表达

目的检测hedgehog信号通路下游转录因子GLI1在鼻咽癌组织中的表达活性及其临床病理意义。方法50例鼻咽癌组织标本,免疫组织化学染色法检测GLI1的表达活性水平,并与26例鼻咽慢性炎症组织标本检测结果进行比较,分析其表达差异的临床病理意义。结果鼻咽癌组织GLI1表达水平较鼻咽慢性炎症组织显著升高(P<0.05),其活性水平与颈淋巴结转移显著相关(P<0.05),并显示随瘤细胞浸润程度加剧而活性升高趋势,但无显著性意义(P>0.05)。结论鼻咽癌细胞Hedgehog信号通路下游转录因子GLI1显示异常活化,可能在鼻咽癌的进展过程中起重要作用,有希望成为鼻咽癌诊断及治疗的分子靶点。

Gli1蛋白在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨Gli1在乳腺癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化S-P方法测定64例乳腺癌组织以及52例癌旁正常乳腺组织、42例乳腺纤维腺瘤组织中Gli1蛋白的表达情况。结果 Gli1蛋白在癌旁乳腺组织及纤维腺瘤组织中不表达或弱表达,在乳腺癌组织中的明显表达,差异有统计学意义（P〈0.05）;Gli1蛋白在乳腺癌患者腋窝淋巴结有无转移中的表达差异有统计学意义（P〈0.05）,在Ⅲ期乳腺癌中的阳性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期乳腺癌（P〈0.05）。结论 Gli1蛋白与乳腺癌组织的发生发展有一定的关系。

Shh/Gli1信号通路在异氟醚后处理减轻大鼠脑缺血-再灌注损伤中的作用

目的评价Shh/Gli1信号通路在异氟醚后处理减轻大鼠脑缺血-再灌注损伤中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠44只,6~8周龄,体重220~280 g,采用随机数字表法将其分为四组:假手术组(S组)、缺血-再灌注组(IR组)、缺血-再灌注+异氟醚后处理组(ISO组)和环巴胺+缺血-再灌注+异氟醚后处理组(CYC组),每组11只。采用线栓法栓塞大脑中动脉90 min、再灌注24 h制备脑缺血-再灌注损伤模型。ISO组大鼠在再灌注即刻吸入1.5%异氟醚。CYC组大鼠在缺血前30 min腹腔注射Shh/Gli1信号通路特异性抑制剂环巴胺10 mg/kg。再灌注24 h后,所有大鼠进行神经行为学评分,采用TTC法测定脑梗死体积,HE染色和尼氏染色观察病理学改变,TUNEL染色观察海马CA1区细胞凋亡,免疫荧光和Western blot法测定Shh和Gli1蛋白含量。结果与S组比较,IR组、ISO组和CYC组大鼠神经行为学评分明显升高,脑梗死体积明显增大,坏死和凋亡细胞明显增多,组织病理学损伤严重,Shh和Gli1蛋白含量明显增加(P<0.05)。与IR组比较,ISO组神经行为学评分和脑梗死体积明显降低,坏死和凋亡明显减少,组织病理学损伤明显减轻,Shh和Gli1蛋白含量明显增加(P<0.05)。与ISO组比较,CYC组神经行为学评分明显升高,脑梗死体积明显增大,坏死和凋亡细胞明显增多,组织病理学损伤明显加重,Shh和Gli1蛋白含量明显减少(P<0.05)。结论 Shh/Gli1信号通路激活参与了异氟醚后处理减轻大鼠脑缺血-再灌注损伤的过程。

Gli1对人肝癌细胞中Twist1蛋白表达及细胞迁移的影响

目的探讨Hedgehog信号通路关键蛋白Gli1对人肝癌细胞中Twist1蛋白表达和细胞迁移的影响。方法应用蛋白免疫印迹技术在Huh7、Hep G2、PLC、SMMC-7721、Bel-7404五种人肝癌细胞中筛选Gli1高表达细胞系,根据Gen Bank数据库设计并合成3条Gli1-siRNA经质粒转染到已筛选出Gli1高表达的人肝癌细胞中,分别为p GCsi-U6-GLi1siRNA-1(siRNA-1组)、p GCsi-U6-GLi1siRNA-2(siRNA-2组)、p GCsi-U6-GLi1siRNA-3(siRNA-3组),而空白对照组(N组)不转染任何序列,阴性对照组转染阴性对照序列(NC组)。转染48 h后分别使用实时荧光定量PCR和Western blotting法检测各组Gli1mRNA和蛋白表达,筛选出最佳siRNA序列。对筛选出的最佳siRNA序列组的细胞,采用细胞划痕实验观察其迁移能力,用Western blotting检测该组细胞中Twist1、E-Cadherin蛋白表达。结果Western blotting检测结果提示,与另外4种人肝癌细胞比较,Bel-7404细胞株中Gli1表达量增加(P均<0.05);与其他组比较,siRNA-2组中的Gli1表达量最低(P均<0.05);与N组比较,siRNA-2组中的Twist1蛋白表达下调,E-cadherin表达上调,N-Cadherin和Vimentin表达下调,迁移能力下降(P均<0.05)。结论 Gli1可上调肝癌Bel-7404细胞中Twist1蛋白表达,促进人上皮-间质细胞转化及迁移。

Sonic hedgehog-Gli1 pathway in colorectal adenocarcinomas

AIM: To determine the role of Sonic hedgehog (Shh) pathway in colorectal adenocarcinomas through analysis of the expression of Shh pathway-related molecules, Shh, Ptch1, hedgehog-interacting protein (Hip), Gli1, Gli3 and PDGFRα. METHODS: Expression of Shh in 25 colorectal adeno- carcinomas was detected by RT-PCR, in situ hybridization and immunohistochemistry. Expression of Ptch1 was observed by in situ hybridization and immunohistochemistry. Expression of Hip, Gli1, Gli3 and PDGFRα was analyzed by in situ hybridization. RESULTS: Expression of cytokeratin AE1/AE3 was observed in the cytoplasm of colorectal crypts. Members of the Hh signaling pathway were expressed in colorectal epithelium. Shh was expressed in cytoplasm of dysplastic epithelial cells, while expression of Ptch1, Hip and Gli1 were mainly detected in the malignant crypts of adenocarcinomas. In contrast, PDGFRα was expressed highly in aberrant crypts and moderately in the stroma. Expression of Gli3 could not be detected in colorectal adenocarcinomas. CONCLUSION: These data suggest that Shh-Ptch1-Gli1 signaling pathway may play a role in the progression of colorectal tumor.

不同病理分型乳腺黏液癌的临床病理特点、Gli1蛋白表达及其相关性

目的:探究不同病理分型乳腺黏液癌的临床病理特点、Gli1蛋白表达及两者的相关性。方法:抽取2018年3月至2022年3月河南省肿瘤医院收治的乳腺黏液癌110例为研究对象,按照病理分型分为单纯型组(58例)与混合型组(52例)。收集两组患者的临床资料,包括肿瘤长径、临床分期、组织学分级、腋窝淋巴转移情况、雌激素受体(ER)表达、孕激素受体(PR)表达、人表皮生长因子受体2(HER2)表达。统计不同病理特征的Gli1蛋白表达情况。结果:混合型组肿瘤长径、临床分期、组织学分级、腋窝淋巴转移情况、ER表达、PR表达、HER2表达情况与单纯型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤长径≥2 cm、临床分期Ⅲ期、组织学分级Ⅲ级、腋窝淋巴转移阳性、ER表达阴性、PR表达阳性、HER2表达阳性患者具有较高的Gli1蛋白表达阳性率(P<0.05)。结论:乳腺黏液癌病理特点与Gli1蛋白表达紧密相关,Gli1蛋白可能是评估乳腺黏液癌诊断及预后有效指标,有可能成为有效药物靶点。

GLI1及Shh在卵巢型子宫内膜异位症恶变过程中的表达及其意义

目的探讨神经胶质瘤相关基因同源蛋白1(GLI1)及超音刺猬蛋白(Shh)在卵巢型子宫内膜异位症(EM)恶变过程中的表达及其临床意义。方法收集2000年4月—2018年4月在青岛大学附属医院及山东省威海市立医院行手术治疗的EM相关性卵巢上皮性癌(EAOC,即卵巢型EM恶变)患者50例(EAOC组),其年龄为(49±7)岁;另收集同期的卵巢异位子宫内膜非典型增生(aEM)患者35例(aEM组),其年龄为(44±9)岁,卵巢型EM患者50例(EM组),其年龄为(37±8)岁。实时荧光定量PCR技术及免疫组化EnVision二步法分别检测3组病变组织中GLI1、Shh mRNA和蛋白的表达,比较其在卵巢型EM恶变过程中的表达差异,分析GLI1与Shh表达的相关性,并分析GLI1及Shh表达与EAOC患者临床病理特征、预后的关系。结果(1)实时荧光定量PCR技术检测显示,EM组、aEM组、EAOC组病变组织中GLI1 mRNA的表达水平分别为1.77±0.40、3.54±0.44、7.80±0.24,Shh mRNA的表达水平分别为0.95±0.21、3.14±0.35、5.41±0.31,EAOC组GLI1、Shh mRNA的表达水平均显著高于EM组、aEM组(P均<0.01),EM组与aEM组分别比较,差异也均有统计学意义(P均<0.01)。免疫组化EnVision二步法检测显示,EM组、aEM组、EAOC组病变组织中,GLI1蛋白的高表达率分别为32%(16/50)、57%(20/35)及66%(33/50),Shh蛋白的高表达率分别为20%(10/50)、49%(17/35)、54%(27/50),3组分别比较,差异均有统计学意义(P均<0.01)。EAOC组织中,GLI1 mRNA与Shh mRNA的表达呈显著正相关(r=0.721,P<0.01),GLI1蛋白与Shh蛋白的表达也呈显著正相关(r=0.608,P=0.001)。(2)GLI1蛋白表达与EAOC患者的血清癌抗原125(CA125)水平、国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移状态、铂敏感性显著有关(P均<0.05);Shh蛋白表达与EAOC患者的FIGO分期、淋巴结转移状态均显著有关(P均<0.05)。logistic回归模型多因素分析显示,FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、血清CA_(125)≥35 kU/L、GLI1蛋白高表达是影响EAOC患者预后的独立因素(P均<0.05)。Kaplan-Meier法生存分析显示,在EAOC患者中,GLI1蛋白高表达、低表达患者的5年总生存率分别为12.1%、35.3%,两者比较,差异有统计学意义(χ^(2)=10.73,P<0.01);Shh蛋白高表达、低表达患者的5年总生存率为11.1%、30.4%,两者比较,差异有统计学意义(χ^(2)=3.96,P=0.047)。结论GLI1及Shh均与卵巢型EM恶变相关,两者在促进卵巢型EM恶变方面可能有一定的作用,GLI1及Shh蛋白高表达提示EAOC患者的预后不良。

基于蛋白质相互作用网络探讨化痰散结方对三阴性乳腺癌Hedgehog信号通路相关蛋白Gli1的影响

目的:在构建三阴性乳腺癌(TNBC)的蛋白质相互作用网络基础上,探讨化痰散结方对TNBC MDAMB-231细胞增殖抑制作用以及对Hedgehog(Hh)通路转录因子Gli1表达的影响。方法:筛选在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)获得TNBC相关基因;使用STRING进行文本挖掘并构建TNBC蛋白质相互作用网络;将互作数据读入Cytoscape3.4.0,分别应用插件JEPETTO 1.3.1和MCODE1.4.2实现拓扑分析和聚类分析;基于DAVID数据库富集关键通路用于表征簇的生物学重要性。针对关键通路Hh及其转录因子Gli1,采用MTT法检测化痰散结方对MDAMB-231细胞的增殖抑制率,Western blot法检测Gli1蛋白的表达情况。结果:构建了由1 537个节点(蛋白质)和23 681个边(相互作用)组成的蛋白质相互作用网络,分析得出关键通路H h信号传导通路和基因G l i1。实验结果表明化痰散结方能抑制MDA-MB-231细胞的增殖并能降低Gli1蛋白的表达。结论:TNBC蛋白质相互作用网络是一个受多信号通路传导、多基因调控的复杂过程,其中H h通路及其下游转录基因G l i1很可能是关键节点,而化痰散结方对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用机制之一是降低Hh通路中Gli1的表达。

脊髓mTOR/S6K1/Gli1信号通路在小鼠慢性吗啡耐受中的作用

目的评价脊髓哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)/Gli1信号通路在小鼠慢性吗啡耐受中的作用。方法健康雄性昆明小鼠,8~10周龄,体重23~25 g。实验Ⅰ取小鼠50只,采用随机数字表法分为2组:生理盐水组(S组,n=10)和吗啡组(M组,n=40)。M组和S组分别皮下注射吗啡和生理盐水10 mg/kg,2次/d,连续7 d。于给药前1 d和每天最后1次给药后30 min测定热痛阈,计算最大镇痛效应百分比(MPE)。M组于给药后1、3、5和7 d热痛阈测定结束后、S组于最后1次热痛阈测定结束后随机处死10只小鼠,取脊髓组织。实验Ⅱ取小鼠40只,采用随机数字表法分为4组(n=10):KU-0063794+吗啡组(KU+M组)、二甲基亚砜(DMSO)+吗啡组(DM+M组)、吗啡+KU-0063794组(M+KU组)和吗啡+二甲基亚砜组(M+DM组)。4组皮下注射吗啡10 mg/kg,2次/d,连续7 d。于第1~3天每天吗啡注射前30 min时,KU+M组腹腔注射mTOR特异性抑制剂KU-0063794200μl(1μg/μl),DM+M组腹腔注射10%DMSO 200μl,2次/d;于第5~7天每天吗啡注射前30 min时,M+KU组腹腔注射KU-0063794200μl(1μg/μl),M+DM组腹腔注射10%DMSO 200μl,2次/d。于吗啡注射前1 d和每天最后1次给药后30 min测定热痛阈,计算MPE。最后1次热痛阈测定结束后处死大鼠,取脊髓组织。采用Western blot法检测脊髓mTOR、p-mTOR、S6K1、p-S6K1和Gli1的表达水平。结果实验Ⅰ与S组比较,M组给药后各时点MPE升高,给药后第3、5和7天时脊髓p-mTOR、p-S6K1和Gli1表达下调(P<0.05),mTOR和S6K1表达差异无统计学意义(P>0.05)。实验Ⅱ与DM+M组比较,KU+M组注射吗啡后第3~7天时MPE降低,脊髓p-mTOR、p-S6K1和Gli1表达下调(P<0.05),mTOR和S6K1表达差异无统计学意义(P>0.05);与M+DM组比较,M+KU组注射吗啡后第6和7天时MPE升高,脊髓p-mTOR、p-S6K1和Gli1表达下调(P<0.05),mTOR和S6K1表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论脊髓mTOR/S6K1/Gli1信号通路参与了小鼠慢性吗啡耐受的形成和维持。

Hedgehog信号通路阻断对人胃癌细胞SGC-7901侵袭和血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨Hedgehog(Hh)信号通路阻断对人胃癌细胞SGC-7901侵袭的影响及其可能的机制。方法免疫荧光检测Hh信号通路分子Shh和Gli1蛋白在SGC-7901细胞中的表达;用不同浓度(2.5、5、10μmol/L)的Hh信号通路特异性阻断剂环靶明作用SGC-7901细胞48 h后,Transwell小室试验检测SGC-7901细胞的侵袭能力,半定量RT-PCR检测SGC-7901细胞中Shh、Gli1和血管内皮生长因子(VEGF)基因mRNA的表达。结果 Shh和Gli1蛋白在SGC-7901细胞中高表达;环靶明能显著抑制SGC-7901细胞的侵袭,且呈剂量依赖性;Hh信号通路阻断后,SGC-7901细胞中Shh基因mRNA的表达水平无明显改变,Gli1和VEGF基因mRNA的表达水平显著下降。结论 Hh信号通路分子在SGC-7901细胞中高表达,阻断Hh信号通路可以抑制SGC-7901细胞的侵袭,可能是通过抑制Gli1下调VEGF起作用。

Sonic Hedgehog在非小细胞肺癌中的表达及其与患者生存周期的关系

目的 观察非小细胞肺癌患者Sonic Hedgehog（Shh）信号通路相关蛋白的表达,探讨在肺癌发展过程中的作用.方法 选择本院2013年1月至6月非小细胞肺癌手术患者46例,取切除肺癌组织为观察组,取癌旁组织39例,以非非小细胞肺癌患者28例肺部组织为对照组.采用免疫组织化学方法观察Shh和Gli2蛋白表达.结果 观察组Shh和Gli1蛋白阳性率分别为73.91％（34/46）和67.40％（31/46）,均高于癌旁组织和对照组（P＜0.05）,Ⅳ、Ⅲ期患者Shh和Gli1蛋白阳性率分别为80.95％（17/21）、71.43％ （15/21）和91.67％（11/12）、83.33％（10/12）,均高于Ⅰ期和Ⅱ期患者（P＜0.05）.结论 Shh信号通路可能通过激活Shh蛋白和Gli蛋白表达促进非小细胞肺癌组织异常增殖及细胞癌变.

不同能量CO_2点阵激光对博来霉素诱导的小鼠增生性瘢痕的作用及Hedgehog信号通路的影响

目的:探讨不同能量CO_2点阵激光对博莱霉素诱导的小鼠增生性瘢痕模型的作用及其对瘢痕组织中Hedgehog信号通路的影响。方法:于雄性C57BL/6J小鼠背部皮肤注射博来霉素(1 mg/d,4周)制作增生性瘢痕模型,另取4只小鼠背部注射PBS缓冲液作为对照。造模成功之后,随机将小鼠分为瘢痕对照组(模型组),10 mj激光治疗组(10 mj组)和20 mj激光治疗组(20 mj组),每组6只小鼠。10 mj组小鼠给予10 mj激光治疗(共3次,每次间隔2周);20 mj组小鼠给予20 mj激光治疗(共3次,每次间隔2周)。治疗结束后,处死小鼠,取瘢痕全层标本进行病理组织学染色观察(HE、Masson染色)以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、GLi1免疫荧光观察。结果:①我们成功复制出小鼠增生性瘢痕模型;②20 mj CO_2点阵激光治疗可有效修复瘢痕组织,经治疗后皮肤瘢痕程度显著减轻,同时可降低真皮层厚度和减轻瘢痕组织的纤维化程度;③免疫荧光染色结果提示,CO_2点阵激光可显著减少小鼠皮肤增生性瘢痕中α-SMA、GLi1表达。结论:于小鼠的背部皮肤注射博莱霉素可建立增生性瘢痕模型。CO_2点阵激光为治疗增生性瘢一种有效的治疗方式,其作用可能与其对Hedgehog信号通路的抑制有关。