GNAS-AS1靶向miR-2116-3p基因表达调控卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制研究

目的:探讨GNAS-AS1对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:RT-qPCR法检测正常人卵巢上皮细胞HUM-CELL-0088及卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3和A2780细胞中GNAS-AS1和miR-2116-3p表达水平。以SKOV3细胞为研究对象,分别转染GNAS-AS1小干扰RNA、miR-2116-3p模拟物或抑制剂,CCK-8法、Transwell和Western blot法分别检测下调GNAS-AS1、上调miR-2116-3p或下调miR-2116-3p对细胞增殖、迁移和侵袭及CyclinD1、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin、Vimentin和E-Cadherin蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证GNAS-AS1与miR-2116-3p调控关系。结果:与HUM-CELL-0088细胞比较,卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3和A2780中GNAS-AS1表达升高(P<0.05),miR-2116-3p表达降低(P<0.05)。下调GNAS-AS1表达或上调miR-2116-3p表达后,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭细胞数及细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05),E-Cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。GNAS-AS1在SKOV3细胞中负调控miR-2116-3p表达。下调miR-2116-3p表达或同时下调GNAS-AS1和miR-2116-3p表达后,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭细胞数及细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9和N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高(P<0.05),E-Cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:GNAS-AS1在卵巢癌细胞系中表达升高,下调其表达可降低卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其可能通过负调控miR-2116-3p表达发挥作用。

GNAS-AS1靶向miR-204-5p对宫颈癌SiHa细胞活性凋亡和迁移的影响

目的探讨GNAS-AS1靶向miR-204-5p对宫颈癌SiHa细胞活性凋亡和迁移的影响及分子机制。方法选取本院2016年5月至2020年5月期间收治的35例宫颈癌患者癌组织及癌旁组织;宫颈癌细胞SiHa分为si-NC组、si-GNAS-AS1组、si-GNAS-AS1+anti-miR-204-5p组、si-GNAS-AS1+anti-miR-NC组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测GNAS-AS1和miR-204-5p的表达水平;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖抑制率;细胞划痕实验检测细胞划痕愈合率;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验验证GNAS-AS1和miR-204-5p的靶向关系;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达。结果宫颈癌组织中GNAS-AS1表达水平显著升高,miR-204-5p表达水平显著降低(P<0.05)。转染GNAS-AS1干扰表达载体后,miR-204-5p表达水平升高,SiHa细胞增殖抑制率升高,SiHa细胞划痕愈合率降低,SiHa细胞凋亡率升高,SiHa细胞中Bax表达水平升高,Bcl-2表达水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。GNAS-AS1靶向调控miR-204-5p,同时抑制miR-204-5p和GNAS-AS1表达,SiHa细胞增殖抑制率降低,SiHa细胞划痕愈合率升高,SiHa细胞凋亡率降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论干扰GNAS-AS1可通过调控miR-204-5p抑制宫颈癌SiHa细胞增殖和迁移,促进细胞凋亡。