GNB4和Riplet基因甲基化检测在原发性肝癌诊断中的价值研究

目的 探讨GNB4和Riplet基因甲基化单独和联合检测在原发性肝癌诊断中的诊断效能和临床价值。方法 选取313例患者,原发性肝癌患者78例,其他消化系统肿瘤患者41例,非消化系统肿瘤患者17例,肝癌术后20例,肝良性疾病患者157例。采用甲基化荧光定量PCR(qMSP)法检测所有患者血浆中GNB4和Riplet基因甲基化水平,直接化学发光法检测血清甲胎蛋白(AFP)水平。结果 AFP检测诊断灵敏度和特异度为51.3%、94.3%;GNB4基因甲基化检测诊断灵敏度和特异度为83.3%、99.4%;Riplet基因甲基化检测诊断灵敏度和特异度为73.1%、99.4%。GNB4和Riplet基因甲基化联合检测诊断的灵敏度和特异度为92.3%、98.7%;AFP、GNB4和Riplet基因甲基化3项指标联合检测诊断的灵敏度和特异度为92.3%、98.7%,纳入年龄和性别后的联合诊断的灵敏度和特异度为93.6%、97.5%。结论 对于原发性肝癌的诊断,AFP灵敏度和特异度存在局限性,而GNB4和Riplet基因甲基化水平较高,两者联合检测的灵敏度和特异度均高于AFP的诊断效能。AFP、GNB4和Riplet基因甲基化联合检测诊断的灵敏度和特异度显著高于AFP、GNB4和Riplet基因甲基化单独检测。

gNB网络深度覆盖建设方式的形成和发展

国内移动通信网络覆盖经过几代通信人的规划建设,目前已经形成了室内覆盖各种类型的基站设备,包括“宏基站”、“微基站+DACS”、“皮基站”和“飞基站”等方式,而移动网络终极流量需求导向,已经充分证实了深度覆盖最终流量需求点基本分为两类,一是间歇式集聚性综合体,例如大型会展中心,大型文体综合场馆。另一类则是持续高需求高密度人流综合区,如A类商业综合体,大型交通枢纽,大型综合性医疗中心等。对于第一类集聚性场景,网络覆盖优化的手段较为多样,多为常规覆盖加应急保障通信的方式。文章将对第二类场景深度覆盖的形成及覆盖形式的多样性和现实性展开分析,探讨5G PRRU独立布点方式的广泛性和适用性及为现网深度覆盖带来的深远影响。

ADD-1基因和GNB3基因多态性与原发性高血压的相关性研究

目的调查ADD-1基因和GNB3基因多态性与深圳地区原发性高血压的关系。方法用病例对照研究。高血压组97例,非高血压组87例。用MS-PCR和PCR-RFLP方法分别检测ADD-1基因G460T基因型及GNB3基因T825C基因型。结果①高血压组和非高血压组ADD-1基因型分别为GG0.237/0.241、GT0.505/0.460、TT0.258/0.299,差异无统计学意义(P=0.787);G等位基因频率为0.490/0.471,差异无统计学意义(P=0.724);②高血压组和非高血压组GNB3基因型分别为TT0.258/0.161、TC0.484/0.529、CC0.258/0.310,差异无统计学意义(P=0.265);T等位基因频率为0.5/0.425,差异无统计学意义(P=0.151);③联合基因分析高血压组TT+CC联合基因型者显著少于非高血压组(P=0.043)。结论在深圳地区人群中,未发现ADD-1基因多态及GNB3基因多态与高血压相关,但两基因可能存在协同作用。

GNB3基因C825T多态性与心血管疾病

CNB3基因C825T多态位点的发现已有五年历程,它在不同种族中的分布不同。由于C蛋白在信号转导过程中起“分子开关”作用,介导许多血管活性及增殖有关的细胞内效应,所以该位点的多态性与心血管疾病的关系受到广泛关注。目前已确定该位点与白种人高血压、肥胖显著相关。在亚洲人群的研究资料较少,目前缺乏它与高血压、肥胖相关的证据。它与左室肥厚、冠心病发生的关联性尚存争议。

GNB3 C825T等位基因多态性与原发性IgA肾病相关性研究

目的:研究G蛋白β3亚基(GNB3)C825T等位基因多态性与原发性IgA肾病(IgAN)的发生与病情进展。方法:病例组为216例原发性IgAN患者,对照组为200例健康志愿者。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测各组GNB3 825位点基因型。病例组分为高血压组与非高血压组;同时按基因型的不同将病例组分为TT组、CT组与CC组。结果:(1)病例组与对照组TT、CT、CC基因型频率分别为21.76%、54.63%、23.61%与18.00%、47.00%、35.00%,两组TT、TC、TT+TC基因型与CC基因型分布频率存在统计学差异(P<0.05);病例组T等位基因分布频率高于对照组(49.07%vs 41.50%,P<0.05)。(2)216例IgAN中,高血压组与非高血压组TT、CT、CC基因型频率分别为32.88%、49.31%、17.81%与16.09%、57.34%、26.57%(P<0.05)。高血压组T等位基因频率较非高血压组明显增加(57.53%vs 44.76%,P<0.05)。(3)病例组不同基因型携带者病理分级轻重无统计学差异(P>0.05)。(4)病例组中不同基因型携带者在性别、年龄、体重指数、尿蛋白排泄量(>1 g/d)、血肌酐水平、血胆固醇水平及三酰甘油水平无统计学差异(P>0.05),而高尿酸血症的发生存在统计学差异(P<0.05),TT组高尿酸血症患者较CT组及CC组高。结论:(1)病例组TT基因型和T等位基因频率较对照组明显增加,结果显示GNB3 825T等位基因可能与IgA肾病的发病有关,提示该基因可能与IgA肾病的遗传易感性相关。(2)GNB3 825T等位基因能影响IgA肾病患者高血压、高尿酸血症的发生。GNB3C825T等位基因多态性与IgA肾病发病及病情进展的相关机制有待进一步研究。

GNB3基因C825T多态性与中国人群出血性脑卒中发病无关

目的 探讨 G蛋白 β3亚基 ( GNB3)基因 C82 5 T多态性与中国人群出血性脑卒中之间的关系。方法 利用 PCR和分子杂交技术对该位点在中国人群出血性脑卒中患者 ( 2 0 2人 )中的分布进行检测和分析 ,并与无脑血管病变的人群 ( 190人 )进行比较。结果 C82 5 T多态性位点在两组人群中的分布均符合 Hardy- Weinberg遗传平衡定律。CC、CT、TT3种基因型在病例组中分布频率分别为 2 7.2 3%、4 3.0 7%和 2 9.70 % ,对照组中分别为 2 8.95 %、4 8.4 2 %和 2 2 .6 3% ;两组人群 82 5 T等位基因频率分别为 5 1.2 4 %和 4 6 .84 % ,分布均无统计学明显差异 ( P>0 .0 5 )。结论 GNB3基因 C82 5

LIM结构域蛋白FHL1C与GNB2不存在相互作用

目的通过哺乳动物双杂交及免疫共沉淀技术验证经质谱技术获得的LIM结构域蛋白FHL1C相互作用候选分子GNB2与FHL1C之间是否存在相互作用,从而丰富FHL1C调控Notch信号通路的机制。方法分别构建融合质粒p CMVGAL4-DBD-FHL1C和p CMV-VP16-GNB2,并将其共转染He La细胞,通过哺乳动物双杂交实验验证两者在细胞内是否具有相互作用;构建带Flag标签的GNB2融合蛋白的重组载体p CMV-Flag-GNB2,酶切鉴定正确后,与带myc标签的FHL1C融合蛋白的重组真核表达载体p CMV-myc-FHL1C共转染He La细胞,利用免疫共沉淀技术检测GNB2与FHL1C之间是否存在生理上的相互作用。结果哺乳动物双杂交实验和免疫共沉淀实验均显示:FHL1C与GNB2之间不存在生理上的相互作用。结论成功构建了实验所需的GNB2的融合蛋白真核表达重组载体,利用哺乳动物双杂交实验及免疫共沉淀技术证实FHL1C与GNB2之间不存在相互作用。

GNB3基因C825T多态性与中国高血压患者服用坎地沙坦酯或坎地沙坦酯/氢氯噻嗪复方制剂降压疗效的相关性研究

目的探讨GNB3 C825T基因多态性与坎地沙坦酯及复方坎地沙坦酯(坎地沙坦酯+氢氯噻嗪)降压疗效的相关性。方法62名原发性高血压患者随机分组,分别给予坎地沙坦酯片及坎地沙坦酯+氢氯噻嗪片治疗8周,定期随访取得血压下降数据。采用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)方法检测GNB3基因型。利用协方差分析各基因型与两药物降压疗效的关系。结果服用坎地沙坦酯/氢氯噻嗪复方的病人血压下降值明显高于单独服用坎地沙坦酯的病人血压下降值(P<0.05)。GNB3 825T等位基因在入选的高血压病人中频率为45.16%。与多数国人报道结果一致。协方差分析结果显示服用两种药后收缩压和舒张压的下降幅度在GNB3 C825T各基因型高血压患者间比较均无统计学差异(P>0.05)。结论GNB3 C825T基因多态性可能与坎地沙坦酯及坎地沙坦酯+氢氯噻嗪降压疗效不相关。

采用EN 14569-2004 LAL/GNB微生物筛选法鉴别辐照食品的研究

翻译了欧洲标准"EN 14569-2004 Foodstuffs-Microbiological screening for irradiated food using LAL/GNB procedures"。该方法已成功通过实验室验证,通常适用于新鲜的整禽或胸脯、腿、翅膀等器官以及去皮或未去皮的冷冻或冰冻畜体的鉴别。该方法还可以提供待辐照样品微生物学质量的情况,但只能说明样品可能经过电离辐射。

探讨GNB3基因C825T多态性与缺血性脑卒中的关系

目的探讨缺血性脑卒中患者GNB3基因C825T多态性与疾病发生的相关性。方法收集我院治疗的缺血性脑卒中患者100例为脑卒中组,再收集100名健康人作为正常组,抽取所有研究对象的外周血,对基因型进行统计分析。结果脑卒中组基因型分布频率CC型31.03%,正常组基因型分布频率CC型34.53%,两组差异无统计学意义(P>0.05)。缺血性脑卒中的等位基因C825的出现率为55.2%,正常组等位基因C825的出现率为56.1%。缺血性脑卒中的等位基因825T的出现率为44.6%,正常组等位基因825T的出现率为42.9%,两组等位基因出现差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论 GNB3基因C825T多态性与缺血性脑卒中的发生与进展的相关性不大,但是不排除由于研究对象较少等影响研究结果。

G蛋白β3亚基基因(GNB3)C825T多态性影响硝苯地平控释片15d降压幅度

目的 研究GNB3基因C82 5T多态性和硝苯地平控释片降压效果的相关性。方法 收集了 5 5 4个原发性高血压患者给予硝苯地平控释片治疗 ,通过问卷调查和随访取得其流行病学的临床资料 ,用PCR RFLP法测定其GNB3基因的基因型。用线性回归和Logistic回归分析了该基因型对疗效的影响。结果 82 5T等位基因在我们研究的高血压群体中的频率为 4 8 4 %。稍高于Siffert等报道的正常血压的中国人的T等位子频率 (42 % )。T等位子的携带者在硝苯地平控释片治疗 15d后 ,其收缩压下降幅度较CC纯合子小3 3mmHg。经多元线性回归分析两组间差别有显著性 (P<0 0 5 )。取收缩压下降值的分布曲线的上下 2 0 %分别作为疗效好与差组 ,经多元Logistic回归分析表明T等位子的携带者比CC基因型人群取得较好的收缩压治疗效果的可能性要小 ,OR值为 0 33,P =0 0 2。结论 GNB3基因C82

GNB1基因突变所致全面发育迟缓1例

报告1例GNB1基因突变所致全面发育迟缓患儿的临床表现和遗传学特点。患儿,男,1岁5月龄,临床表现主要为全面发育迟缓,格里菲斯(Griffiths)发育评估提示发育落后。外显子测序技术检测到患儿存在GNB1基因第6号外显子杂合错义变异c.224A>G(p.Gln75Arg),父母该位点均未见异常,提示患儿为新发突变。Sanger测序验证结果与外显子测序结果一致。结合患儿的临床表现和基因检测结果,诊断为常染色体显性智力障碍42型(autosomal dominant mental retardation-42,MRD42)。治疗方法为继续康复训练、特殊教育等综合治疗,提高患儿的智力功能水平、社会生活能力以及生活自理能力。GNB1基因的新发突变为该患儿的遗传学病因,且新型变异c.224A>G(p.Gln75Arg)扩大了GNB1基因的致病突变谱。

GNB1基因突变致神经发育障碍患儿的临床及基因突变分析

目的:应用全外显子测序技术(whole exome sequencing,WES)对患有语言运动发育迟缓及严重智力障碍的患儿及其父母进行分析,探讨基因水平的遗传学病因并明确临床诊断,进一步指导妊娠。方法:提取患儿及其父母外周血DNA,采用外显子捕获结合高通量测序技术进行检测。根据美国医学遗传学与基因组学学会标准对患儿及父母检测出的变异进行致病性判定,结合患儿表型寻找致病基因及位点。利用Sanger测序法对致病位点进行验证。结果:患儿GNB1基因第7号外显子c.346 G>A(p.G116S)位点杂合错义突变为致病位点,患儿父母该位点均为野生型,此变异为患儿的新发突变。Sanger测序验证结果与外显子捕获测序结果一致。患儿为常染色体显性智力低下42型(autosomal dominant mental retardation-42,MRD42)患者。结论:应用全外显子测序技术对语言运动发育迟缓伴严重智力低下的患儿进行诊断,可明确患儿的致病原因,有助于家系的遗传咨询并为再生育提供指导。

GNB3基因C825T多态性与新疆和田地区维吾尔族自然长寿老人的相关性研究

目的探讨GNB3基因C825T多态性与新疆和田地区维吾尔族老人长寿的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态法(PCR-RFLP)和直接测序法检测百岁组(年龄不小于100岁)65例和长寿组(90～99岁)100例老人GNB3基因825位点的基因型,对照组112例(年龄不超过70岁自然死亡人群)作为对照组。结果百岁组和对照组GNB3825C/T的基因型和等位基因频率分布差异均具有统计学意义(P=0.0021,P<0.0001)。其中百岁组CC基因型的频率为60.0%,对照组为36.6%(OR2.60;95%CI1.39～4.89)。结论本研究初步表明,新疆和田地区维吾尔族人GNB3基因C825T多态性与个体寿命密切相关,但同时也应考虑长寿是年龄依赖的多种因素影响的结果。

GNB3基因C825T多态同哈萨克族人群肥胖的关联分析

目的探讨鸟苷酸结合蛋白基因β3亚单位(G-proteinβ3Subunit,GNB3)第10外显子C825T多态同中国哈萨克族人群肥胖的关系。方法应用PCR技术及限制性长度多态(RFLP)技术在277例哈萨克族正常体重者,121例超重者及102例肥胖者中检测GNB3基因C825T多态性。结果GNB3基因C825T多态3种基因型分别为TT、CT及CC。其中CT、TT基因型分布频率在正常体重组、超重组及肥胖组分别为46.9%,54.5%,54.9%,23.4%,16.6%,20.6%,基因型分布在组间无显著性差异(P=0.39)。T等位基因分布在正常体重组、超重组及肥胖组分别为46.9%,43.8%,48.0%,组间也无显著性差异(P=0.63)。将正常体重及超重者按高血压及正常血压分层,发现超重及肥胖的高血压者TT基因型频率(26.2%)较正常体重的高血压者(14.7%)有增高趋势(P=0.061)。结论GNB3基因825T等位基因可能不是中国哈萨克族肥胖的主要遗传易感因子,但TT基因型可能在超重的高血压者中有一定作用,此基因在中国其他人群肥胖合并高血压中的作用有必要进行深入研究。

广东地区GNB3基因多态性与原发性高血压遗传易感性研究

目的研究GNB3基因多态性与广东地区原发性高血压遗传易感性的关系。方法收集广东地区有代表性的正常人和原发性高血压患者血液样本各50份,共100份。对GNB3(人类G蛋白β3亚单位)基因A(-350)G位点PCR扩增,测序,后进行A(-350)G位点基因分型,再利用统计学分析其与广东地区原发性高血压遗传易感性的关系。结果高血压组和正常血压组的GNB3A(-350)G位点基因型分布分别为:GG:0.956、1.000;GA:0.044、0;AA:0、0.高血压组和正常血压组的GNB3A(-350)G位点等位基因分布分别为:G:0.978、1.000;A:0.022、0。结论在广东人群中,尚未发现GNB3基因多态性与原发性高血压遗传易感性有关。

GNB2L1在宫颈癌中的表达及与患者预后的相关性分析

目的研究鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β多肽2样蛋白1(GNB2L1)在宫颈癌组织中的表达情况与临床病理学特征及预后的相关性。方法收集2010年6月—2013年3月新疆医科大学第一附属医院妇科收治的132例宫颈鳞癌(CSCC)患者、56例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者宫颈组织及32例无宫颈疾病患者正常宫颈(NC)组织,采用免疫组化、qRT-PCR、Western blot方法检测CSCC、CIN、NC组织中GNB2L1和mRNA表达水平,分析与临床病理学特征及预后的相关性。基因测序检测CSCC组织中GNB2L1基因拷贝数的变化。Western blot、qRT-PCR检测GNB2L1在宫颈癌细胞C33a、SiHa及正常宫颈上皮细胞H8中的表达情况。STRING数据库构建基因调控网络;RNA干扰调控技术下调子宫颈癌SiHa和C33a细胞中GNB2L1基因表达后,BODIPY染色检测SiHa、C33a细胞内脂质含量的变化。Kaplan-Meier和logrank试验分析GNB2L1蛋白的表达水平与患者总生存期的相关性。结果与CIN和NC组织相比,CSCC组织中GNB2L1的mRNA与蛋白质表达水平较高,差异具有统计学意义(P<0.01),且GNB2L1过表达与细胞分化程度(P=0.001)、临床分期(P=0.017)、淋巴结转移(P=0.049)密切相关。与GNB2L1低表达患者相比,GNB2L1高表达患者的总生存时间更短(P=0.002)。与NC组织(215100±7276)copies/ng相比,CSCC组织(297200±10815)copies/ng中的GNB2L1 DNA拷贝数显著升高(P=0.009)。qRT-PCR与Western blot结果显示,与H8细胞比较,C33a、SiHa细胞中GNB2L1的mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。下调GNB2L1表达后,BODIPY检测结果显示,与正常对照组和阴性对照组比较,实验组细胞内脂质含量明显减少。结论GNB2L1在宫颈癌组织中高表达可能是CSCC患者独立的预后因素,过表达GNB2L1可能促进肿瘤的进展,有望成为CSCC患者潜在的预后生物标志物。

过表达Gnb2l1基因对体外节律基因mPer1表达的影响

目的:评价过表达Gnb2l1基因对节律基因mPer1表达的影响。方法:用PMA刺激NIH3T3细胞,使节律基因稳定表达后,用脂质体介导方法将质粒pcDNA3.1/Gnb2l1转染至NIH3T3细胞,并以空载体质粒pcDNA3.1/vector为对照。利用RT-PCR技术检测不同时间点Gnb2l1 mPer1在NIH3T3细胞中的表达水平,研究过表达Gnb2l1基因对mPer1基因表达的影响。结果:采用RT-PCR技术显示成功转染,实验组比对照组Gnb2l1表达量明显增高(p<0.05)。并且发现实验组的mPer1表达量比对照组明显增高,但是经过余弦分析发现两组相比mPer1的表达周期无明显改变。结论:成功过表达Gnb2l1基因使节律基因mPer1表达量增加,中值增高(p=0.038)。