在不同猪群体中检测OVGP1基因的多态性分布

输卵管特异性糖蛋白(Oviduct-specific glycoprotein,OVGP1)基因,主要在输卵管中表达。OVGP1基因定位于猪4q22-23,并发现存在可控制排卵率的QTL。OVGP1基因是由输卵管上皮细胞合成和分泌,其合成受卵巢类固醇激素的调控,还可以与移动的输卵管中的卵子或受精卵相结合。总之,OVGP1基因在繁殖过程中起着重要作用。

铁死亡在HIV-1 gp120 V3环致小胶质细胞炎症中的作用机制研究

目的:探讨人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)gp120 V3环致CHME-5小胶质细胞炎症反应与铁死亡的关系,并观察p53和铁死亡对该炎症反应的影响及可能机制。方法:体外培养人源CHME-5小胶质细胞,设立空白组、随机肽段组、HIV-1 gp120 V3环组、HIV-1 gp120 V3环+ferrostatin-1(Fer-1;铁死亡抑制剂)组和HIV-1 gp120 V3环+pifithrin-α(p53抑制剂)组。分别采用HIV-1 gp120 V3环(终浓度2 mg/L)和随机肽段(终浓度2 mg/L)处理CHME-5细胞24 h;Fer-1(终浓度20μmol/L)和pifithrin-α(终浓度10μmol/L)预处理CHME-5细胞2 h,HIV-1 gp120 V3环(终浓度2 mg/L)再处理24 h。ELISA法检测各组细胞上清液中炎症因子水平;Western blot法检测铁死亡相关蛋白[转铁蛋白受体1(transferrin receptor-1,TFR-1)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)]及p53的蛋白表达;酶标仪法检测细胞内亚铁离子(Fe2+)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性。结果:(1)ELISA结果显示,与对照组相比,gp120 V3环组炎症因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平显著升高(P<0.01);与gp120 V3环组相比,gp120 V3环+Fer-1组和gp120 V3环+pifithrin-α组炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著下降(P<0.01);(2)Western blot结果显示,与对照组相比,gp120 V3环组蛋白p53显著上调(P<0.01),铁死亡相关蛋白TFR-1显著上调(P<0.01),SLC7A11和GPX4显著下调(P<0.01);与gp120 V3环组相比,gp120 V3环+pifithrin-α组铁死亡相关蛋白TFR-1显著下降(P<0.05),SLC7A11和GPX4蛋白显著升高(P<0.05);(3)与对照组相比,gp120 V3环组Fe2+含量显著增加(P<0.01),GSH-Px活性显著降低(P<0.01);与gp120 V3环组相比,gp120 V3环+Fer-1组和gp120 V3环+pifithrin-α组Fe2+含量显著下降(P<0.05),GSH-Px活性显著升高(P<0.01)。结论:HIV-1 gp120 V3环致CHME-5小胶质细胞炎症中存在铁死亡,且抑制铁死亡能减轻炎症。HIV-1 gp120 V3环致CHME-5小胶质细胞炎症与p53蛋白调控铁死亡有关,抑制p53可减轻铁死亡和炎症反应。

血清外泌体中GP1BA的表达水平与动脉粥样硬化的相关性分析

目的探讨血清外泌体中糖蛋白Ib血小板亚基α(GP1BA)的表达水平与动脉粥样硬化的相关性。方法选取福州市第二医院2022年1月—2023年1月收治的30例心电图提示ST-T改变及冠状动脉造影显示有AS斑块的患者为动脉粥样硬化组;30名健康志愿者为对照组。实时荧光定量(RT-qPCR)法和蛋白质印迹(WB)检测受试人员血清外泌体中GP1BA的表达量,ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)、高敏心肌肌钙蛋白(hs-cTnT)、血管性血友病因子(vWF)含量。采用Pearson相关系数分析血清外泌体中GP1BA的表达水平与TNF-α、IL-1β、IFN-γ、hs-cTnT、vWF的相关性。结果动脉粥样硬化组血清外泌体中GP1BA的表达水平高于对照组,血清中TNF-α、IL-1β、IFN-γ、hs-cTnT、vWF含量升高(均P<0.05)。相关性分析发现GP1BA的表达水平与TNF-α、IL-1β、IFN-γ、hs-cTnT、vWF含量均呈较强正相关关系(均P<0.05)。结论血清外泌体中GP1BA的表达水平与AS存在相关性,并可作为AS的潜在标志物。

西北农林科技大学揭示蛋白激发子GP1pro靶向水通道蛋白Nb PIP2;4激活植物免疫机制

2023年6月,西北农林科技大学植物保护学院天然产物农药创制与应用团队冯俊涛教授课题组在《Plant,Cell&Environment》上发表题为“Protein elicitor GP1pro targets aquaporin Nb PIP2;4 to activate plant immunity”的文章,探究了来自于链霉菌的蛋白激发子GP1pro通过靶向植物水通道蛋白Nb PIP2.

基于TDC-GP1高精度定时器的新型超声波热能表

目的为了提高热能表的计量精度及降低功率损耗,使热能表适用于更广泛的热量计量.方法从热量测量的基本原理出发,结合供暖系统的技术指标,根据时差法的测量原理,研制了一种新型的超声波热能表.结果实验数据表明该超声波热能表获得了良好的测量结果,其温度误差小于0.04℃、测量误差小于±1.2%,热量表的平均工作电流不超过36μA,休眠时电流小于6.5μA,平均功耗小于0.13 mW.结论基于TDC-GP1的超声波热能表解决了传统热表计量精度较低和功率损耗大的缺点.

基于FPGA和TDC-GP1的TDOA测距系统设计

针对高精度短距离测量的需要,以现场可编程门阵列(FPGA)为控制核心,采用高精度时间数字转换芯片TDC-GP1和433 MHz超再生射频发射、接收模块,设计了一种高精度的到达时间差(TDOA)测距系统。该测距系统由发射节点与接收节点组成,其中发射节点由FPGA控制433 MHz超再生射频信号与超声波信号的同步实时发射;接收节点将接收的射频信号与超声波信号,经过TDC-GP1进行TDOA测量,并由FPGA完成对TDC-GP1的测量参数配置、测量结果读取及串口上传到上位机。该测距系统由Zig Bee无线通信模块对发射和接收模块进行测量过程协调,并对超声波传播速度进行温度补偿。实验结果表明:该测距系统具有精度高、可靠性高等优点,并易扩展为无线定位系统,具有良好的应用价值。

TDC-GP1在超声波流量计中的应用

为了解决传统流量计精度低和功率损耗大的问题,根据时差法的测量原理,采用高精度时间间隔测量芯片TD-GP1作为计量的核心,在计量过程中考虑非线性校正和温度补偿问题,研制了一种新型的超声波流量计。实验数据表明该流量计获得了良好的测量结果,测量误差小于±1.5%,平均功耗小于0.45 mW,具有功耗低、精度高的特点。

采用TDC-GP1的激光测距系统设计

在激光测距系统中,时标是影响测距系统精确度的关键因素。文章利用ACAM的高精度时间间隔测量芯片TDC-GP1、自触发脉冲激光飞行时间测量方法设计了一种结构简单、测量精度高的脉冲激光测距系统。

基于TDC-GP1的高精度激光测距研究

激光测距中,时间间隔的测量精度对测距精度起决定作用。针对时间间隔的测量精度问题提出了一种基于TDC-GP1计数芯片高精度测量方法,把时间间隔直接转化为高精度的数字,并结合软硬件的实现方法,通过DSP芯片控制TDC-GP1进行单通道的时间间隔测量,由内部粗计数器和精延时通道合作完成时间间隔测量,直接将待测时间间隔转换成数字量读出。实验结果表明,该模块测量频率快,单脉冲测量精度可达100 ps以内,线性度良好,可满足不同应用中的测速和精度要求。

HIV—1gp120基因及其与IFN—α基因共表达产物的构建和 …

目的 研究细胞因子ＩＦＮ－α在机体免疫应答过程中的免疫佐剂效应。方法 以表达中国流行株ＨＩＶ－１ｇｐ１２０基因的核酸疫苗质粒ｐＧＰ及共表达中国流行株ＨＩＶ－１ｇｐ１２０基因与ＩＦＮ－α基因的核酸疫苗质粒ｐＧＰＩＦＮ－α免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠，用流式细胞仪测定１００００个免疫鼠脾淋巴细胞中ＣＤ４＾＋，ＣＤ８＾＋Ｔ细胞数及ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值。结果 ｐＧ－ＰＩＦＮ－α与ｐＧＰ比较。

a-β_2GP1、ACA在早期先兆流产患者妊娠丢失中的临床意义

目的评价a-β2GP1、ACA在早期先兆流产患者妊娠丢失中的临床意义。方法采用前瞻性病例对照研究,对80例8～12周先兆流产患者(研究组)和35例正常孕妇(对照组)的血清a-β2GP1、ACA进行检测,并随访至妊娠结束。研究组根据妊娠结局分为足月分娩组以及妊娠丢失组。结果 80例先兆流产患者中,早期妊娠丢失者46例(57.5%),足月分娩者34例(42.5%)。早期流产者平均孕周为(10.5±1.2)周。a-β2GP1IgM型阳性率在妊娠丢失组(41.3%)较其他两组(14.7%,0%)更多见,差异有显著性意义(P<0.05)。IgG型各组间无明显差异。妊娠丢失组ACAIgM、IgG型阳性率较其它两组高,但差异无显著性差异。结论 a-β2GP1IgM会增加早期先兆流产患者妊娠丢失的风险。

抗心磷脂抗体及抗β2-GP1抗体与妊娠期高血压疾病患者的围生儿结局的相关性研究

目的:通过定量对比妊娠期高血压疾病患者与正常孕妇血清抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody,ACA)及抗β2-GP1抗体水平,并记录围生儿结局,分析ACA、抗β2-GP1抗体滴度值与围生儿结局的相关性。方法:选取150例妊娠期高血压疾病患者作为研究对象,其中轻度93例,重度47例;另选取同时期住院分娩的150例正常孕妇作为正常对照组;对比妊娠期高血压疾病患者与正常孕妇血清ACA及抗β2-GP1抗体滴度值,详细记录围生儿结局,采用线性回归分析,分析血清ACA及抗β2-GP1抗体滴度值与围生儿结局的相关性。结果:重度妊娠期高血压疾病组、轻度妊娠期高血压疾病组和正常对照组血清ACA-IgG、ACA-IgM和抗β2-GP1抗体滴度值比较,差异均有统计学意义(P<0.05),而ACA-IgA滴度值比较差异无统计学意义(P>0.05);重度妊娠期高血压疾病组胎儿生长受限、早产、围生儿死亡、胎盘早剥、死胎的发生率均高于轻度妊娠期高血压疾病组,轻度妊娠期高血压疾病组大于正常对照组,三组不良围生儿结局发生率比较差异有统计学意义(P<0.05);ACA-IgG、ACA-IgM与胎儿生长受限呈正相关(P<0.05),ACA-IgG、ACA-IgM和抗β2-GP1抗体与早产呈正相关(P<0.05),抗β2-GP1抗体与围生儿死亡呈正相关(P<0.05);而ACA-IgG、ACA-IgM和抗β2-GP1抗体两两间存在显著性相关(P<0.05)。结论:ACA及抗β2-GP1抗体与妊娠期高血压疾病患者的围生儿结局具有相关性,对妊娠期高血压疾病患者检测ACA及抗β2-GP1抗体,对于预测不良围生儿结局的发生具有一定依据。

HIV-1 CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定

目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选分泌抗V1/V2重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤,对单克隆抗体的特异性、型别以及效价进行鉴定。结果制备并获得一株稳定分泌抗HIV-1 AE亚型V1/V2结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定腹水效价高达1∶81 000,单克隆抗体类型属于IgG1/κ型。Western blot结果表明该单克隆抗体同样能够识别不同亚型的HIV gp120蛋白。结论成功制备出抗HIV-1 AE重组型gp120蛋白V1/V2结构域的单克隆抗体。

哈尔滨地区汉族人群血小板膜糖蛋白GP1b α基因VNTR多态性分布状况

目的旨在研究哈尔滨地区汉族人群血小板膜糖蛋白GP1bα基因VNTR多态性的等位基因及基因型的分布状况。方法选择哈尔滨地区汉族人300例(男142人,女158人),抽提外周血单个核细胞中的DNA,经PCR扩增,判断VNTR的等位基因及基因型。结果实验中观察到3种等位基因:B、C、D,未见A出现。C等位基因出现频率最高(69.5%),其次是D等位基因(29.83%)。基因型只出现5种,CC所占比例最大(49.33%),其次是CD(39.67%)和DD(9.67%)。结论哈尔滨地区汉族人群血小板膜糖蛋白GP1bα基因VNTR多态性分布以等位基因C、D为主,基因型以CC和CD多见。

HIV-1糖蛋白gp120激发人小胶质细胞钙内流效应和ERK磷酸化

目的:探讨HIV-1糖蛋白gp120对人小胶质细胞钙离子内流和ERK磷酸化的作用及其机制。方法:用钙离子探针Fluo-4标记粘附在盖玻片上的人小胶质细胞,运用共聚焦显微镜以荧光强度为指标实时观察各种条件下的细胞内钙离子水平的变化;用gp120处理并用anti-gp120-FITC进行染色,运用共聚焦显微镜术和流式细胞术分析人小胶质细胞与gp120结合情况;用抗磷酸化ERK抗体免疫荧光方法进行染色,运用共聚焦显微镜术和流式细胞术进行ERK磷酸化水平分析。结果:共聚焦显微镜检测结果显示HIV-1糖蛋白gp120能够激发人小胶质细胞钙离子内流效应;共聚焦显微镜和流式细胞仪分析结果显示gp120可以与人小胶质细胞结合;共聚焦显微镜和流式细胞仪分析结果显示gp120刺激可增加人小胶质细胞ERK磷酸化。结论:HIV-1糖蛋白gp120能在人小胶质细胞激发钙离子内流并且增加胞内ERK的磷酸化,从而导致了小胶质细胞的活化,这一效应提示,在HIV-1相关性脑炎中,gp120可能参与了某些发病机制。

抗心磷脂抗体及抗β_2-GP1抗体与妊娠高血压的相关性研究

目的通过定量对比妊娠高血压患者与正常孕妇的母血和脐血血清抗心磷脂抗体(ACA)及抗β_2-GP1抗体水平,分析ACA及抗β2-GP1抗体与血小板数量、凝血功能各项指标的相关性,探讨ACA及抗β_2-GP1抗体与妊娠高血压的相关性。方法选取150例妊娠高血压患者作为研究对象,其中轻度93例、重度57例;另选取同时期住院分娩的150例正常孕妇作为正常对照组;对比妊娠高血压患者与正常孕妇的母血和脐血血清ACA及抗β_2-GP1抗体的滴度值,检测观察组患者产前血小板数量、凝血功能各项指标,与相关抗体进行相关性分析。结果在母血抗体滴度值对比中,重度妊娠高血压组、轻度妊娠高血压组与正常对照组间的血清ACA-IgG、IgM和抗β_2-GP1抗体滴度值差异具有统计学意义(P<0.05),而ACA-IgA滴度值差异无统计学意义(P>0.05);在脐血抗体滴度值对比中,上述三组间的血清ACA及抗β_2-GP1抗体滴度值差异无统计学意义(P>0.05);妊娠高血压患者血清ACA-IgG、IgM与血小板数量呈负相关(P<0.05),而抗β2-GP1抗体无显著性相关(P>0.05);血清ACA-IgG、IgM与凝血功能各项指标均无显著性相关(P>0.05);抗β_2-GP1抗体与APTT、PT、TT呈负相关(P<0.05),与FIB呈正相关(P<0.05)。结论妊娠高血压的发病、发展可能与ACA及抗β_2-GP1抗体具有相关性,孕期检测血清ACA-IgG、IgM和抗β_2-GP1抗体,有利于预测妊娠高血压的发病,判断严重程度。

激光选区熔化增材制造GP1不锈钢动态拉伸力学响应与层裂破坏

采用选择性激光熔化增材制造技术,制备了GP1不锈钢单轴拉伸板条试样和层裂圆片试样,并对材料微观结构进行了表征。借助Zwick-HTM5020高速拉伸试验机,并结合数字图像相关性全场应变测量技术,开展了增材制造GP1不锈钢材料的轴向拉伸力学性能实验研究,得到了不同应变率下材料的拉伸应力-应变曲线,结果显示:(1)GP1不锈钢流动应力具有比较显著的应变强化效应;(2)通过回收试样的电子背散射衍射表征,发现GP1不锈钢在拉伸变形过程中会发生奥氏体与马氏体之间的相变;(3)GP1不锈钢的屈服应力随着应变率呈幂指数增大,断裂应变在中低应变率下保持不变,但在高应变率下则显著减小。采用一级轻气炮实验装置和激光干涉粒子速度测量技术,开展了增材制造GP1不锈钢的层裂实验,发现GP1不锈钢的层裂强度随着飞片撞击速度增大而减小。单轴拉伸试样断口和层裂试样断口的显微分析结果表明:随着应变率增大,单轴拉伸断裂模式和断裂机理都发生了转变;层裂损伤易成核于激光熔池边界线的交汇处,断口韧窝形貌明显区别于单向拉伸断口。

阻断TLR2结合降低β2GP1-抗β2GP1复合物刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的表达

目的探讨β2糖蛋白1(β2GP1)-抗β2GP1复合物诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)中Toll样受体2(TLR2)的作用。方法用β2GP1-抗β2GP1复合物、TLR2激动剂Pam3CSK4及TLR4激动剂脂多糖(LPS)、TLR2阻断剂抗小鼠TLR2-Ig G(m TLR2-Ig G)及TLR4阻断剂TAK-242对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞进行体外处理。用实时荧光定量PCR检测TNF-αmRNA水平,Western blot法及免疫荧光细胞化学方法检测TNF-α蛋白表达;采用流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞表面TLR2的水平。结果β2GP1-抗β2GP1复合物、Pam3CSK4及LPS均能够显著增加BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-αmRNA及蛋白水平,抗m TLR2-Ig G能够抑制上述刺激物促进细胞TNF-α表达的效应,但弱于TAK-242的抑制效应,抗m TLR2-Ig G与TAK-242联合使用未显示更强的抑制效应。流式细胞术结果显示,β2GP1-抗β2GP1复合物、Pam3CSK4及LPS均能增加小鼠腹腔巨噬细胞TLR2的表达,而抗m TLR2-Ig G、TAK-242以及二者联合使用均未显示对TLR2表达的抑制效应。结论TLR4、TLR2都增强β2GP1-抗β2GP1复合物对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的刺激作用。

SBi4211通过抑制S100B/RAGE表达减轻gp120诱导的中枢神经损伤

目的研究S100B抑制剂SBi4211(heptamidine)在人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)包膜蛋白gp120损伤中枢神经系统的作用。方法通过U251细胞和SH-SY5Y细胞建立非接触式星形胶质细胞-神经元共培养体系,由gp120蛋白处理U251细胞激活神经炎症反应造成神经元损伤,体外水平探讨SBi4211在gp120诱导的中枢神经毒性中的作用;体内实验中,以8月龄gp120转基因小鼠模拟HIV相关神经认知障碍(HAND)模型,实验分为对照组、gp120组以及gp120+SBi4211组(SBi4211处理组)。采用CCK-8、流式细胞术检测神经元活性及凋亡情况,ELISA检测S100B及炎症因子IL-6、TNF-α表达水平,Western blot和免疫组织化学染色分析RAGE、GFAP、NeuN、Syn、MAP-2蛋白表达情况。结果体外实验结果显示SBi4211可以显著抑制gp120刺激后U251细胞S100B、RAGE的表达(P<0.001),降低炎症因子iNOS、IL-6和TNF-α的表达水平(P<0.001),维持神经元相关标记蛋白NeuN、Syn的表达(P<0.001)。体内实验结果显示SBi4211显著降低gp120转基因小鼠S100B、RAGE表达及炎症水平(P<0.05),并且抑制脑内星形胶质细胞活化,保护神经元的完整性(P<0.05)。结论SBi4211可能通过下调S100B/RAGE表达,抑制gp120引发的神经炎症反应,继而阻断gp120的中枢神经毒性作用。