EB病毒gp125蛋白的酵母表达及在鼻咽癌检测中的应用

【目的】采用毕赤酵母系统构建表达EB病毒gp125重组蛋白,并探讨其在鼻咽癌血清学诊断中的应用。【方法】以EBV DNA为模版,采用PCR法扩增gp125的编码基因BALF4(2574 bp),与毕赤酵母表达载体pPIC9连接,转化酵母菌GS115,甲醇诱导重组蛋白表达。重组蛋白经SDS-PAGE、免疫印迹法鉴定后,包被聚丙乙烯板,制备ELISA试剂检测鼻咽癌患者和正常人群gp125-IgA抗体。【结果】在毕赤酵母菌中高效地表达了分泌型的gp125重组蛋白,相对分子质量为110 000,免疫印迹证实目的蛋白有免疫原性,gp125蛋白经纯化后作为包被抗原检测鼻咽癌患者和健康对照的敏感度和特异度分别为78.0%和92.0%。【结论】采用毕赤酵母系统高效分泌表达了gp125重组蛋白,初步评估了gp125蛋白在鼻咽癌血清筛选中的诊断价值。

基因重组EB病毒gp125抗原的鼻咽癌免疫荧光血清学诊断方法

目的 尝试用基因工程表达抗原建立鼻咽癌诊断血清学方法。方法 用重组痘苗病毒感染细胞为抗原片 ,用免疫荧光法检测鼻咽癌患者、其他肿瘤患者和正常人血清抗Epstein Barr病毒 (EBV)IgA/gp12 5抗体 ,同时用传统方法检测其IgA/VCA、IgA/EA和IgA/MA抗体 ,将所得结果进行比较。结果 其灵敏度远远高于IgA/EA ,接近于IgA/MA和IgA/VCA ,特异性高于IgA/MA和IgA/VCA ,接近于IgA/EA。结论 建立了一种可用于鼻咽癌的诊断和高发人群普查的灵敏、特异、经济。

免疫酶法检测鼻咽癌病人血清IgA/gp125抗体

建立了用表达Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒壳抗原ｇｐ１２５的重组痘苗病毒感染细胞为抗原，检测ＩｇＡ／ｇｐ１２５抗体的免疫酶法，并检测了鼻咽癌、其它肿瘤病人和正常人的ＩｇＡ／ｇｐ１２５抗体，其灵敏度远远高于ＩｇＡ／ＥＡ，接近于ＩｇＡ／ＭＡ和ＩｇＡ／ＶＣＡ，特异性高于ＩｇＡ／ＭＡ和ＩｇＡ／ＶＣＡ，接近于ＩｇＡ／ＥＡ。

基因重组Epstein-Barr病毒壳抗原gp125的免疫原性

天然的Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒ｇｐ１２５蛋白有极强的免疫原性，是ＥＢＶ初次感染的主要免疫原，也是诊断ＥＢＶ既往感染和新近感染最有价值的抗原。文章在用重组痘苗病毒表达ｇｐ１２５的基础上，研究了表达产物的特异性，并用活的重组痘苗病毒免疫中国本兔，用表达产物免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，研究了其免疫原性和免疫抗体的特异性。结果显示：重组痘苗病毒在感染细胞内特异性地表达ｇｐ１２５，活病毒及表达产物能诱导动物产生较高滴度的特异性抗体。活病毒免疫兔，免疫荧光效价达１３２０；表达产物免疫小鼠，免疫荧光效价达１６４０。

gp125和β-catenin蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义

目的观察EB病毒gp125蛋白、β-catenin蛋白在鼻咽癌(NPC)组织中的表达,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测76例NPC组织、26例慢性鼻咽炎症组织中的表达,并分析gp125蛋白、β-catenin蛋白的表达与NPC的发生、发展、分化程度、临床分期、淋巴结转移等之间的关系。结果 gp125蛋白在NPC组织中的阳性表达率为88.16%,明显高于慢性鼻咽炎症(34.62%)(P<0.05);β-catenin蛋白在NPC组织中的异常表达率为72.37%,明显高于慢性鼻咽炎症(7.70%)(P<0.05);gp125、β-catenin的表达在NPC TNM分期、淋巴结转移组间表达率的差异均有统计学意义(P<0.05);在NPC组织中gp125与β-catenin异常表达呈正相关(P<0.05)。结论 gp125蛋白高表达、β-catenin蛋白异常表达与NPC发生发展密切相关,两者可能共同参与NPC发生发展过程。

EB病毒gp125蛋白的B细胞表位预测

目的预测EB病毒gp125蛋白的B细胞表位。方法基于EB病毒gp125蛋白的氨基酸序列,采用亲水性参数、可及性参数、极性参数和抗原性指数方案等,辅以对gp125蛋白的二级结构中的柔性区域的分析,预测gp125蛋白的B细胞表位。结果最有可能的B细胞表位位于gp125蛋白N端第403-416、565-574、578-584、618-630和832-843区段及其附近。结论用多参数预测EB病毒gp125蛋白的B细胞表位,为制备具有高灵敏度和高特异性的鼻咽癌诊断试剂及研究抗肿瘤转移靶向治疗的分子免疫学奠定基础。

EB病毒BALF4基因的短肽合成及在鼻咽癌检测中的应用

目的:利用基因工程技术合成EB病毒抗原多肽gp125,并探讨其在鼻咽癌血清学诊断中的应用。方法:利用因特网服务器预测EB病毒gp125蛋白的B细胞抗原表位,同时合成短肽,包被聚丙乙烯板,制备ELISA试剂,检测鼻咽癌患者和正常人群gp125-Ig A抗体,对B细胞抗原表位在鼻咽癌诊断中的价值进行评估。结果:共合成6条短肽,其中2条特异性不高,其他短肽序列鼻咽癌组阳性检出率均高于健康组(P<0.001)。结论 :成功合成EB病毒BALF4基因短肽并筛选出特异性高、免疫原性强的表位,为表达具有更高特异性和灵敏性的gp125蛋白作准备。

GP_（125）酶标记抗体法测定细胞增殖活性

利用与细胞增殖有关的抗原ＧＰ_（１２５）和Ｂ_３抗体结合，形成抗原抗体复合物，再同酶结合形成抗原－抗体－酶复合物。该复合物与ＡＢＴＳ－Ｈ_２Ｏ_２发生颜色反应，在一定波长下可测定细胞增殖。本法亦可测定细胞活化剂效应及抗癌药物的抑瘤效应，是一种测定细胞增殖活动性的非放射性方法。

AFP、GPC3、GP73、CA125联合检验诊断原发性肝癌的临床应用价值分析

目的探讨研究甲胎蛋白(AFP)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)、高尔基蛋白73(GP73)、癌抗原125(CA125)联合检验诊断原发性肝癌的临床应用价值。方法将2019年5月至2020年5月于我院收治的原发性肝癌患者中抽出20例纳入观察组,之后抽取同期同等例数乙肝肝硬化患者20例作对比,纳入对照组,比较两组受检者AFP、GPC3、GP73、CA125变化。结果观察组AFP、GPC3、GP73、CA125水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组四项指标单独检测及联合检测阳性检出率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);原发性肝癌患者癌Ⅲ~Ⅳ期各指标水平均高于Ⅰ~Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05)。结论联合AFP、GPC3、GP73、CA125用于原发性肝癌患者诊断中,应用价值显著,能有效提高其病症诊断准确率的同时有利于评估其癌肿分期,为后续实施有效诊疗手段提供依据,值得推广。

踏板车中的另类——韩国晓星GPS125摩托车

纵观国内的踏板车,无非也就是"A博士"、"大鲨"、"公主"、"凌鹰"、"豪迈"款等,但我一眼见到这辆韩国晓星GPS125时,仿佛发现了新大陆.它有着意大利式的浪漫风格,和比亚乔的黑金刚似乎同出一辙.现在向摩友们粗略介绍一下该车的情况.