发酵优化绿针假单胞菌GP72-ND3ΔphzO高产吩嗪-1-羧酸

对绿针假单胞菌GP72-ND3ΔphzO的发酵条件进行优化并在5 L反应器中进行放大培养。在摇瓶水平通过单因素实验、正交实验、最陡爬坡实验和中心组合设计实验,优化得到最佳培养基组成为甘油49.55 g/L、大豆蛋白胨37.34 g/L、KCl 1.5 g/L、MgSO_(4)0.75 g/L、K 2 HPO_(4)0.225 g/L,发酵60 h后吩嗪-1-羧酸(phenazine-1-carboxylic acid,PCA)的最大产量为(6.01±0.17)g/L,是优化前的2.6倍。在1 L反应器中优化发酵pH,当培养过程pH值维持在6.8时,PCA的产量最高,为(7.16±0.04)g/L,是优化前的1.2倍。在最优培养基和pH条件下,对菌株在5 L反应器中进行放大培养,发酵60 h后PCA的最大产量为(6.84±0.53)g/L。研究为提高PCA的生物合成速率和工业化应用提供支持。

假单胞菌GP72 rpeB突变株的构建及其对吩嗪类抗生素合成的调控

【目的】绿针假单胞菌GP72是一株可生产吩嗪类抗生素吩嗪-1-羧酸(PCA)及2-羟基吩嗪(2-OH-PHZ)的生防假单胞菌。Rpe A/Rpe B双元调控系统是其双元调控系统中的一组,本文旨在研究这一系统中的应答调控子(RR)Rpe B对于PCA及2-OH-PHZ的生物合成影响。【方法】通过生物信息学分析获得了rpe A/rpe B双元调控系统的序列,并从GP72中扩增出rpe B基因,通过同源重组技术构建卡那霉素抗性片段插入突变rpe B的突变菌株GP72BN。利用发酵实验、rpe B基因回补实验及荧光定量PCR实验,验证rpe B对于吩嗪类抗生素合成及相关基因表达的调控作用。【结果】在KMB培养基中,rpe B突变株的PCA产量下降为野生型的49.5%,2-OH-PHZ产量下降为野生型的67.3%。rpe B基因的回补可以在一定程度上回复PCA及2-OH-PHZ的产量。荧光定量PCR实验结果表明,rpe B突变株中群体感应系统基因phz I/phz R及吩嗪合成基因簇基因phz E转录水平均显著下调,而PCA转化为2-OH-PHZ的修饰基因phz O转录水平变化不显著。【结论】Rpe B正调控PCA与2-OH-PHZ合成途径的表达。Rpe B很可能是通过调控群体感应基因phz I/phz R和phz基因簇的表达,从而影响PCA的合成,并间接调控其衍生物2-OH-PHZ的合成。

绿针假单胞菌GP72中aurI/aurR系统调控功能

【背景】绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis) GP72是一株可生产吩嗪类抗生素吩嗪-1-羧酸(PCA)和2-羟基吩嗪(2-OH-PHZ)的生防根际促生菌。基因组比对发现GP72菌中存在aurI/aurR双元调控系统。【目的】研究该系统对GP72中吩嗪类物质的调控作用。【方法】将aurI基因在大肠杆菌中异源表达,用紫色杆菌CV026和根癌农杆菌NTL4做显色实验。构建基因敲除菌株和回补菌株,发酵测量突变株的生长曲线与总吩嗪产量。构建转录融合质粒,测定吩嗪合成基因启动子的转录水平。【结果】显色实验显示,aurI能产生多种信号分子,使CV026显紫色、NTL4显蓝色。分别单独敲除aurI和aurR基因,同时敲除aurI/aurR基因,吩嗪产量均会升高,而回补菌株吩嗪产量降为野生型水平。β-半乳糖苷酶活性测定结果显示,突变株的酶活比野生型高。【结论】aurI/aurR负调控GP72的吩嗪合成,通过抑制吩嗪合成启动子的转录而影响吩嗪类物质的产量。

一株拮抗辣椒疫霉的假单胞菌的分离与鉴定

从甜椒根际土壤中分离到一株对辣椒疫霉(Phytophthora capsici)具有强拮抗作用的假单胞属(Pseudomonasspp.)菌株GP72,研究其拮抗性表明,对多种植物病原真菌均有很强的抑制作用。对该菌株进行形态特征、生理生化、Biolog GN、(G+C)mol%含量测定及16S rDNA序列分析,鉴定为绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)。特征为单细胞,极生单个鞭毛,不能利用聚β-羟基丁酸盐,能够较强地利用Biolog系统95种碳源中的45种作为底物生长,较弱利用其中的6种底物,与绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)的相似性达到98%,相似指数为0.72。用热解链方法测得基因组DNA的(G+C)mol%含量为65.1mol%。以16S rDNA序列为基础构建了包括13株邻近种属细菌在内的系统发育树,其中与模式致金色假单胞菌的同源性最近。

手持GPS在河流规划测量中的应用探讨

采用GPS72手持式接收机在皖河流域规划测量中的应用,比较GPS72与全站仪测距之间的精度,概述GPS72在小比例尺地形图中的用途。

GPS72在面积测量中的应用技巧

手持GPS接收机是海南省林业系统目前主要的面积测量工具,在林业规划设计、检查验收中广泛应用。以GPS72为例,简述GPS在面积测量中一些方法,通过对不同方法所测量的面积进行对比,分析影响面积测量精度的因素,总结出提高面积测量精度的方法。

GPS72在林业调查规划中的应用探讨

林业是国民经济的重要组成部分，是促进人口、经济、社会、环境和资源协调发展的基础性产业和社会公益事业。林业调查规划是一项基础性的林业工作，它在森林资源清查、造林绿化、森林资源保护、林业产业发展及森林防火等方面都有着非常重要的作用。GPS72是林业调查规划工作的一项重要设备，它对于我们科学合理、准确高效的做好调查规划发挥了十分重要的作用。它的技术原理，参数及界面的设置，定位导航以及面积测量方面都与林业调查规划密切相关。而本文就是在向大家介绍GPS72的具体使用方法和功能外，还重点介绍了这项技术在林业调查规划中的具体应用。

GPS72在林业调查规划中的应用

简述了GPS 72的基本操作,介绍了该机型的界面设置、参数设置、存储已知坐标等的使用方法,重点强调了该机在林业调查规划和检查验收中定位、导航和面积测量的使用方法和特点。

GPS72—6型过滤机在太西选煤厂的应用

太西选煤厂原过滤机使用效果差 ,脱饼率低 ,影响生产 ;应用GPS72 6型过滤机后 ,过滤效果明显提高 ,维护工作量小 ,工人劳动强度低 。

GPS72在林业调查规划中的应用探讨

GPS全球定位系统最早出现在美国,此技术能够实现三维立体导航和定位功能,能够全天候不间断工作,工作效率高且操作简单,并且其实际应用范围正在不断扩展。林业科技水平不断提高的过程中,GPS等各种高科技的产品与技术在林业工作过程中的应用也越加广泛,林业调查规划中使用GPS的范围也逐渐加大。当下GPS使用在林业基层的使用机型包括GPS72,GPS76等,文中以GPS72为例,介绍了在林业调查规划过程中,GPS的应用功能。