GPAM增强剂在生活用纸中的应用实践

竹浆作为木浆的替代品已在生活用纸生产中得到广泛应用,但其成纸强度低于木浆。为保证成纸强度,稳定生产运行,本文从实验室小试及生产应用两方面对增强剂GPAM应用进行分析评价。结果表明,GPAM不仅可提升成纸的干抗张强度,还能提升成纸的湿抗张强度、降低湿强剂的用量。

lncRNA SNHG16在结直肠癌组织和细胞中表达及其调控结肠癌细胞中GPAM表达的机制

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)SNHG16在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织和细胞中的表达及其通过海绵吸附miR-128-3p调控结肠癌细胞线粒体甘油3磷酸酰基转移酶基因(mitochondrial glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAM)表达的分子机制。方法:收集2014年1月至2017年1月甘肃省人民医院肛肠科手术切除的60例CRC患者的癌及癌旁组织标本,以及结直肠癌细胞系SW480、SW620、HCT116、Caco-2、DLD-1、HT29和结肠上皮细胞CCD841,用q PCR法检测CRC组织和细胞系中SNHG16的表达,分析SNHG16表达与CRC患者临床病例特征的关系。分别用miR-128-3p模拟物、miR-128-3p抑制剂、SNHG16敲降载体转染SW480细胞后,用qPCR法检测细胞中miR-128-3p及SNHG16 mRNA的表达,用Western blotting法检测GPAM蛋白的表达,用CCK-8法、克隆形成实验及细胞凋亡实验、Transwell小室法检测细胞的增殖、凋亡及侵袭。用双荧光素酶报告基因法和RNA免疫共沉淀实验验证SNHG16和miR-128-3p mRNA靶向结合。构建小鼠SW480细胞移植瘤模型,观察敲降SNHG16对移植瘤生长的影响。结果:CRC组织及细胞系中SNHG16高表达(均P<0.01),其表达水平与CRC淋巴结转移、Duke’s分期及患者生存期相关(均P<0.01)。敲降SNHG16可显著抑制SW480细胞的增殖及侵袭能力,并诱导细胞凋亡(均P<0.01);敲降SNHG16后小鼠移植瘤瘤体显著小于对照组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测及RNA免疫沉淀反应结果显示,miR-128-3p与SNHG16相互作用,且在CRC患者中miR-128-3p与SNHG16负相关(P<0.01)。SNHG16通过内源性竞争海绵吸附miR-128-3p影响其下游靶基因GPAM的表达。结论:SNHG16在CRC细胞中可通过海绵吸附miR-128-3p调控GPAM表达,SNHG16及miR-128-3p可作为CRC诊断及治疗的潜在靶点。

中国西门塔尔牛GPAM基因外显子多态性及对经济性状和脂肪酸组成的影响

线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶(mitochondrial glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAM)基因的主要作用是通过催化三酰基甘油和磷脂生物合成过程,从而促进动物机体甘油三酯(TAG)的生成,并通过中心和外周调节作用,对哺乳动物脂肪沉积,能量消耗,胴体质量以及整体的代谢进行调控。为揭示GPAM基因外显子多态性与西门塔尔牛胴体组成和肉质性状的相关性,本研究采用DNA池测序及PCR-RFLP的方法检测了131头34月龄中国西门塔牛群体该基因外显子中SNP位点的多态性,并与西门塔尔牛胴体组成、肉质性状及脂肪酸组成进行了关联分析。结果表明,在GPAM基因外显子区第20外显子2 823bp处检测到1个突变位点C>T,该SNP与中国西门塔牛的胴体组成性状(毛质量、胴体质量、净肉率、后部排酸后酸度、胴体长、胴体深、胴体胸深、牛鞭质量、头质量、前蹄质量、心脏质量)显著相关(P<0.05),与脂肪酸组成性状(花生酸、二十碳一烯酸)显著相关(P<0.05),但对肌间脂肪沉积无影响。本研究结果可为中国西门塔尔牛分子选育、进一步提高肉用性能提供依据。

牛GPAM基因分子克隆及编码区E1-76-C>T定点突变前后生物信息学对比分析

线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶基因(Mitochondrial glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAM)的主要作用是通过催化三酰基甘油和磷脂生物合成过程,从而促进动物机体甘油三酯的生成,并通过中心和外周调节作用,对哺乳动物脂肪沉积、能量消耗、胴体重以及整体的代谢进行调控。设计特定引物对牛GPAM基因编码区进行PCR扩增并进行了克隆及测序,并假定牛GPAM基因编码序列发生E1-76-C>T点突变,通过生物信息学的方法,对牛GPAM基因突变前后编码产物的理化性质、结构与功能进行了对比分析,通过生物信息学对比分析得出,牛GPAM基因单碱基的改变可以影响到氨基酸的编码,在一级结构、二级结构和三级结构方面存在显著差异。

GPAM基因过表达载体的构建及其在奶牛乳腺上皮细胞中的表达

线粒体3-磷酸甘油酰基转移酶(GPAM,glycerol-3-phosphate acyltransferase)是一种具有编码蛋白质功能的基因,位于牛的26号染色体上。GPAM酶参与催化三酰基甘油和磷脂生物合成反应的第一步,继而对甘油三酯的量进行调控,是生物体内一个必不可少的酶。试验以中国荷斯坦牛RNA反转录成cDNA,继而PCR扩增出GPAM片段,并连入pBI-CMV3载体,构建了pBI-CMV3-GPAM真核表达载体,并验证了其在奶牛乳腺上皮细胞中的表达情况。结果表明:成功构建了牛GPAM真核表达载体,并在体外奶牛乳腺上皮细胞中高效表达。

乙二醛改性支链状阳离子聚丙烯酰胺的合成及其对纸张增强性能的研究

以N-羟甲基双丙烯酰胺(NMA)为交联性单体、2-巯基乙醇为链转移剂,以过硫酸铵和亚硫酸氢钠(mAPS∶mNaHSO3=1∶2)组成氧化还原引发体系引发丙烯酰胺(AM)、阳离子单体甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵(DMC),进行水溶液自由基共聚合反应,制备了支链状阳离子聚丙烯酰胺(CPAM)。然后用乙二醛对合成的CPAM进行改性,制备了乙二醛改性的阳离子聚丙烯酰胺树脂(GPAM)。结果表明:当丙烯酰胺用量为55%、NMA用量为8%、2-巯基乙醇用量为1.0%、DMC用量为5.5%、引发剂用量为0.5%(wt)、乙二醛用量为30%(wt)、改性温度为60℃、改性时间为140min时,产物的增强效果较好。当用量为0.3%时,纸张的干抗张指数提高了24.6%,湿抗张指数提高了381%。并用红外光谱(FT-IR)和核磁共振氢谱(1H-NMR)对产物的结构进行了表征。

乙二醛接枝网状聚丙烯酰胺的合成及其在纸张增强中的作用

首先采用水溶液聚合法合成中间体网状阳离子聚丙烯酰胺(CPAM),然后与乙二醛单体进行接枝共聚制备纸张增强剂乙二醛-聚丙烯酰胺树脂(GPAM),并讨论接枝共聚反应的pH值以及m(乙二醛)/m(CPAM)等因素对GPAM树脂的特性黏度及增强效果的影响。接枝共聚的最佳条件为:pH=7.0～8.0、m(乙二醛)/m(CPAM)=0.3。合成的GPAM用于抄纸实验,讨论其应用条件对增强效果的影响。结果表明,当聚合物用量0.3%、浆料pH值7.0～8.5、助剂作用时间5min时,纸张的干抗张指数提高了24.6%,湿抗张强度达到15.7%。并用红外光谱(FT-IR)对产物的结构进行了表征。