GPC-1、miRNA-9及Caspase-3在肺腺癌中的表达及与病情和预后生存的相关性

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白多糖-1(GPC-1)、微小RNA-9(miRNA-9)及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)在肺腺癌中的表达及与病情、预后生存的相关性。方法 2015年8月至2017年8月本院收治的肺腺癌患者的临床资料进行整理、分析(76份肺腺癌组织标本及76份癌旁正常组织标本),采用免疫组化染色法对比肺腺癌组织及癌旁正常组织中GPC-1、miRNA-9及Caspase-3表达情况。结果肺腺癌组织中GPC-1阳性表达率、Caspase-3阴性表达率、miRNA-9高表达率明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。GPC-1、miRNA-9及Caspase-3表达情况与肺腺癌患者年龄、性别、分化程度、肿瘤直径、血管侵犯无关(P>0.05);与TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。76例肺腺癌患者3年生存率为35.53%(49/76),GPC-1阳性表达、miRNA高表达、Caspase-3阴性表达的肺腺癌患者死亡率更高(P<0.05)。生存分析显示GPC-1(表达阴性)、miRNA-9(低表达)、Caspase-3(阳性表达)者生存期较长,Keplan-meier生存曲线明显不同(P<0.05)。临床分期(Ⅲ~Ⅵ期)、有淋巴结转移、GPC-1表达(阳性)、miRNA(高表达)及Caspase-3表达(阴性)为影响肺腺癌患者预后生存的独立危险因素(P<0.05)。结论GPC-1、miRNA、Caspase-3异常表达与肺腺癌患者病情进展密切相关,且不利于患者预后。

血清外泌体Glypican-1在乳腺癌中的表达水平及临床应用价值

目的探讨乳腺癌血清外泌体Glypican-1(GPC-1)的表达水平及其临床应用价值。方法选择河北医科大学第四医院确诊的乳腺癌48例和乳腺良性占位18例,同期健康体检者17名作为健康对照组;采用聚乙二醇8000沉淀法提取血清外泌体,使用透射电镜和蛋白印迹对外泌体形态和分子表型进行鉴定;Western blot检测各组血清外泌体GPC-1表达水平;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价血清外泌体GPC-1对乳腺癌的诊断效能;以最佳截断值0.961将乳腺癌组分为GPC-1阳性组和GPC-1阴性组,分析其与临床特征的关系;采用Wilcoxon秩和检验分析乳腺癌组治疗前后血清外泌体GPC-1表达变化;以病理诊断为金标准,采用Kappa一致性检验评价血清外泌体GPC-1、血清肿瘤标志物、超声、钼靶射线四种诊断方法对乳腺癌的诊断价值。结果乳腺癌组血清外泌体GPC-1表达水平[1.065(0.501)]高于乳腺良性占位组[0.652(0.117)]和健康对照组[0.625(0.139)],差异有统计学意义(H=32.051,P<0.05);ROC曲线下面积为0.900(95%CI:0.833~0.967),最佳截断值0.961,能够有效筛查乳腺癌患者;乳腺癌组中GPC-1阳性在不同TNM分期、淋巴结浸润和Ki-67高表达组间差异有统计学意义(P均<0.05);乳腺癌组治疗前血清外泌体GPC-1表达水平[1.065(0.501)]高于治疗20 d后血清外泌体GPC-1表达水平[0.844(0.195)],差异有统计学意义(Z=856.0,P=0.006);血清外泌体GPC-1检测方法的Kappa值为0.485>0.4,与病理检查比较一致性中等,且优于其他三种检测方法。结论乳腺癌组血清外泌体GPC-1表达上调,且与多个不良临床特征相关,并在治疗后显著下降,具备作为乳腺癌诊断和治疗效果评价指标的潜力。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3和肝细胞石蜡抗原对原发性肝癌的诊断价值研究

目的评价磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)和肝细胞石蜡抗原(Hep Par-1)对原发性肝癌(HCC)的诊断价值。方法选择2012年1月-2016年12月在延安市延安大学附属医院就诊的肝癌患者73例,测量病理组织的GPC-3和Hep Par-1的表达含量,同时对HCC进行病理学分级,评价两组标记物对HCC诊断和分化程度的判断价值。结果 73例患者中28例HCC(38.36%),5例ICC(6.85%),转移性肝癌40例(54.79%),包括消化系统来源29例(39.73%),非消化系统6例(8.22%),不明来源5例(6.85%)。29例Hep Par-1(+)患者中25例为HCC,4例为非HCC,Hep Par-1阳性率组间比较差异有统计学意义(P <0.05);24例GPC-3(+)患者中19例为HCC病例,5例非HCC,GPC-3阳性率组间比较差异有统计学意义(P <0.05),Hep Par-1的敏感度和特异度分别为91.50%和89.21%,GPC-3为78.32%和94.07%;25例HCC病例中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级分别为10、12、6例,无Ⅳ级病例,Ⅰ级病例中Hep Par-1、GPC-3阳性率分别为90.00%和60.00%(χ~2=2.400,P=0.121),Ⅱ级为83.33%和75.00%(χ~2=0.253,P=0.615),Ⅲ级为100%和66.67%(χ~2=2.400,P=0.121)。结论 GPC-3是诊断HCC的敏感指标,但敏感度不如Hep Par-1,两者联合应用有助于提高HCC确诊率。

葡多酚对细胞间黏附因子表达的影响

目的 探讨葡多酚 (GPC)对氧化损伤引发的细胞间黏附因子 1(ICAM 1)mRNA表达的影响作用。方法 人脐静脉血管内皮细胞株 (ECV3 0 4)在含有不同浓度GPC的培养液中培养 ,用Fenton体系产生的羟自由基 (·OH)造成细胞氧化损伤 ,反转录聚合酶链 (RT PCR)法检测各组细胞ICAM 1表达水平 ,并测定各组细胞内MDA含量。结果 高、中、低3个GPC剂量组的扩增产物电泳条带面积与阳性对照比较抑制度分别为 5 7 7%、5 1 1%、14 1%,中剂量组的MDA含量低于低剂量组。上述差异均有显著意义 (P <0 0 5 )。结论 GPC对氧化损伤引发的ECV3 0 4细胞ICAM 1mRNA表达有明显抑制作用。

生育力正常男性精浆中一些附睾功能性指标相关性的研究

我们对50例生育力正常男性精浆中甘油-3-磷酸胆碱(GPC)、肉毒碱含量及α,1-4糖苷酶活力依次进行测定,结果显示:精浆中 GPC 与肉毒碱含量及α,1-4糖苷酶活力分别为2.32±0.65mmol/L、233.95±85.69μmol/L 及41.17±21.27IU/L,三者均呈显著正相关(P<0.01)。总量及总活力分别为7.35±3.04μmol/总毫升数、741.77±301.52nmol/总毫升数及133.93±88.35mIU/总毫升数(±s)。GPC、肉毒碱及α,1-4糖苷酶与精子在附睾内发育成熟均存在密切的联系,作为附睾重要的功能性指标,精浆中 GPC、肉毒碱含量及α,1-4糖苷酶活力的测定对附睾疾病的诊断与治疗都具有十分重要的意义。

凝胶色谱-光散射联机法测定高聚物的长链支化度

运用凝胶渗透色谱-光散射联用技术(GPC-LALLS)测定聚合物的长链支化度的基本原理是:在将聚合物分子按其流体力学体积顺序分离的同时,通过光散射仪逐滴测定溶液中聚合物的分子量。经过对谱图上逐点进行扩展效应的改正,通过普适标定线,求出支化分子与线型分子回转半径的比值,以计算试样的支化度及其分布。具体方法如下:

磷脂酰肌醇蛋白聚糖1表达对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡及周期的影响

目的探讨沉默磷脂酰肌醇蛋白聚糖(glypican,GPC)1表达对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡及周期的影响。方法从针对GPC1基因的4组含不同shRNA序列的干扰载体中筛选沉默效率最高的一组,将转染该组干扰载体的A549细胞作为GPC1沉默组(shGPC1),另设空白对照组(NC,未转染)及阴性对照组(shNC,转染无意义shRNA序列质粒),采用Real time PCR和Western blot法分别检测转染后各组A549细胞中GPC1 mRNA及蛋白的表达水平,CCK8法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化。结果 shGPC1组A549细胞中GPC1 mRNA及蛋白的表达水平比NC组和shNC组均明显降低(P <0.001)。与NC组及shNC组比较,shGPC1组A549细胞的生长明显受到抑制(P <0.001),细胞抑制率分别可达40.32%和39.82%;细胞凋亡率分别增加9.9%和9.06%(P <0.001);细胞G_(2)/M期比例分别增加16.01%和15.07%(P <0.001)。结论沉默A549细胞中GPC1的表达可抑制细胞增殖,加速细胞凋亡,引起细胞发生G_(2)/M期阻滞。本研究为以GPC1作为参考靶点开发非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)新的靶向药物提供了参考,也为开发放疗联合靶向GPC1治疗NSCLC的新型治疗方案提供了思路。

外泌体在胰腺癌患者诊疗中的作用

外泌体是一类直径约30—150nm的小囊泡，广泛分布于体液中。其内容物丰富，包含蛋白质与核酸等生物活性物质，参与细胞间信号传导和物质转运等过程。外泌体通过促进肿瘤微环境的形成及对吉西他滨的抵抗，影响胰腺癌的发生和发展。血液循环中磷脂酰肌醇蛋白聚糖-1（GPC-1）阳性的外泌体以及外泌体中高表达的miR-10b等均可作为胰腺癌患者早期的无创性诊断方法。同时，外泌体作为一种新型的药物传输系统，可将基因类药物、抗癌药物等传输至肿瘤细胞并发挥作用。本文对外泌体在胰腺癌发生、发展及诊疗中的作用做一综述。