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磷脂酶Dα1在TuMV激活叶绿素降解相关基因表达中的功能分析
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作者 林佳宇 张世杰 +3 位作者 徐传涛 杜林林 孙炳剑 孙航军 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期783-790,共8页
【目的】研究磷脂酶Dα1(phospholipase Dα1)及其产物磷脂酸(phosphatidic acid,PA)在芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)促进植物叶绿素降解相关基因表达过程中的作用。【方法】通过UV-2800紫外分光光度计检测TuMV对本氏烟叶绿... 【目的】研究磷脂酶Dα1(phospholipase Dα1)及其产物磷脂酸(phosphatidic acid,PA)在芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)促进植物叶绿素降解相关基因表达过程中的作用。【方法】通过UV-2800紫外分光光度计检测TuMV对本氏烟叶绿素含量的影响。利用Real-time qPCR检测TuMV侵染或瞬时表达6K2蛋白对本氏烟叶绿素降解相关基因NbNYE1(Nicotiana benthamiana NON-YELLOWING1)、NbNYE2(Nicotiana benthamiana NON-YELLOWING2)和NbPAO(Nicotiana benthamiana pheide a oxygense)mRNA相对表达水平的影响。敲除NbPLDα1(Nicotiana benthamiana phospholipase D alpha 1)或正丁醇降低磷脂酶D产生的磷脂酸含量,检测对TuMV诱导的NbNYE1、NbNYE2和NbPAO mRNA相对表达水平的影响。体外喷施磷脂酸对NbNYE1、NbNYE2和NbPAO mRNA相对表达水平的影响。【结果】TuMV侵染导致野生型本氏烟叶片叶绿素含量下降48%。TuMV侵染的野生型本氏烟中NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量分别为健康野生型本氏烟的7.61、15.80和5.19倍。TuMV侵染的NbPLDα1敲除突变体本氏烟中NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量分别为健康野生型本氏烟的2.35、7.83和1.29倍。正丁醇处理后,TuMV侵染的野生型本氏烟NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量与健康野生型本氏烟无明显差异。喷施磷脂酸的叶片中NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量分别为清水处理野生型本氏烟的12.39、3.64和8.26倍。此外,瞬时表达6K2蛋白叶片中NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量分别为瞬时表达GFP野生型本氏烟的5.64、4.67和3.45倍。【结论】TuMV促进叶绿素降解相关基因表达依赖磷脂酶Dα1及其产物磷脂酸,病毒编码的6K2蛋白是促进叶绿素降解相关基因的关键致病因子。 展开更多
关键词 芜菁花叶病毒 本氏烟 叶绿素降解 6K2蛋白 磷脂酸 磷脂酶d
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不动杆菌磷脂酶D基因的表达、生物信息学及底物选择性分析
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作者 吴思怡 吴林秀 +5 位作者 王凡 卢梦瑶 童欣 李敏 付新宇 胡荣康 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第13期132-139,共8页
微生物来源磷脂酶D(Phospholipase D,PLD)因其较高的催化活性和广泛的底物选择谱而成为磷脂合成应用中的热点。本研究以Acinetobacter sp.DUT-2来源的PLD(ADPLD)为研究对象,首先通过生物信息学分析蛋白序列特征,然后构建重组质粒并在大... 微生物来源磷脂酶D(Phospholipase D,PLD)因其较高的催化活性和广泛的底物选择谱而成为磷脂合成应用中的热点。本研究以Acinetobacter sp.DUT-2来源的PLD(ADPLD)为研究对象,首先通过生物信息学分析蛋白序列特征,然后构建重组质粒并在大肠杆菌中实现异源表达,进一步纯化酶蛋白并分析ADPLD对不同酰基链长磷脂酰胆碱(PC)的底物选择性,最后通过分子对接和分子模拟探究ADPLD的底物识别机制。通过对ADPLD和其他微生物来源的PLD多序列比对和进化树分析表明,ADPLD与链霉菌来源PLD序列相似度低于30%,且只有一个保守的HKD基序,这表明ADPLD的催化机制可能与传统认知中需要两个HKD基序完成PLD催化过程的反应机制有所不同。ADPLD主要以可溶性蛋白形式表达,仅通过Ni^(2+)亲和层析在50 mmol/L的低浓度咪唑下便能纯化出较为均一的蛋白,以大豆PC为底物时的比活性约为4.09 U/mg。ADPLD对中和短链PC(C6~C14)的活性相对较高,其中ADPLD对8:0/8:0-PC的比活性高于其它酰基链长的PC底物,为13.2 U/mg。当PC的酰基链长从C14增加至C16时,ADPLD对PC的活性明显降低。分子模拟和分子对接结果显示ADPLD的氨基酸残基Thr205、Pro209、Phe293、Ala324、Lys329和Phe453能够分别与PC形成疏水相互作用。Arg383和Gly326能够与PC形成氢键,其中Arg383(N)、Gly326(N)与PC(P)之间的距离<3Å。这些结果表明,ADPLD能够与磷脂分子形成一个稳定的酶与底物的中间体。研究结果为ADPLD的分子改造和进一步工业应用奠定了基础。 展开更多
关键词 不动杆菌 磷脂酶d 酶学性质 蛋白表达 磷脂
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Mechanisms mediating the effects of alcohol and HIV anti-retroviral agents on mTORC1,mTORC2 and protein synthesis in myocytes 被引量:2
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作者 Ly Q Hong-Brown Abid A Kazi Charles H Lang 《World Journal of Biological Chemistry》 CAS 2012年第6期110-120,共11页
Alcoholism and acquired immune deficiency syndrome are associated with severe muscle wasting.This impairment in nitrogen balance arises from increased protein degradation and a decreased rate of protein synthesis.The ... Alcoholism and acquired immune deficiency syndrome are associated with severe muscle wasting.This impairment in nitrogen balance arises from increased protein degradation and a decreased rate of protein synthesis.The regulation of protein synthesis is a complex process involving alterations in the phosphorylation state and protein-protein interaction of various components of the translation machinery and mammalian target of rapamycin(mTOR) complexes.This review describes mechanisms that regulate protein synthesis in cultured C2C12 myocytes following exposure to either alcohol or human immunodeficiency virus antiretroviral drugs.Particular attention is given to the upstream regulators of mTOR complexes and the downstream targets which play an important role in translation.Gaining a better understanding of these molecular mechanisms could have important implications for preventing changes in lean body mass in patients with catabolic conditions or illnesses. 展开更多
关键词 AMP-activated protein kinase/tuberous sclerosis complex 2/Ras homolog enriched in brain Rag GTPASES phospholipase d MITOGEN-ACTIVATEd protein KINASE Translation initiation Elongation
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急性脑梗死患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2、超敏C反应蛋白及D-二聚体水平 被引量:19
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作者 张清平 邹长进 +3 位作者 彭焦武 张敏 张贤鹏 冯永钦 《微循环学杂志》 2013年第1期31-32,35,I0001,I0002,共5页
目的:检测分析急性脑梗死患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及D-二聚体(D-Dimer)水平变化及临床意义。方法:急性脑梗死患者105例(急性脑梗死组),同期体检健康人群100例(健康对照组)。平行检测两组血清Lp-PLA2... 目的:检测分析急性脑梗死患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及D-二聚体(D-Dimer)水平变化及临床意义。方法:急性脑梗死患者105例(急性脑梗死组),同期体检健康人群100例(健康对照组)。平行检测两组血清Lp-PLA2、hs-CRP及D-Dimer含量,比较不同组及不同程度脑梗患者上述指标水平的差异。结果:急性梗死组血清Lp-PLA2、hs-CRP及D-Dimer含量明显高于健康对照组(P<0.01),且各指标水平变化呈显著正相关(r分别为0.323,0.599,0.283,P均<0.01)。重度梗死组血清Lp-PLA2、hs-CRP及D-Dimer水平明显高于轻度和中度梗死组(P<0.05)。血清Lp-PLA2、hs-CRP及D-Dimer含量与急性脑梗死患者病情严重程度均呈高度正相关(r分别为0.721,0.623,0.718,P均<0.01)。结论:检测急性脑梗死患者血清Lp-PLA2、hs-CRP及D-Dimer水平,对临床诊断有一定参考价值。 展开更多
关键词 急性脑梗死 脂蛋白相关磷脂酶A2 超敏C反应蛋白 d-二聚体
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人血清中糖基磷脂酰肌醇-特异性磷脂酶D活性的测定 被引量:2
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作者 余明琨 龚隽 +3 位作者 高玲 黄莉莉 王瑞林 姚启智 《基础医学与临床》 CSCD 1996年第6期458-462,共5页
我们用含糖基磷酯酰肌醇疏水膜锚结构(GPI-anchor)的碱性磷酸酶(ALP)作为底物,建立了稳定可靠的测定血清中GPI专一的磷酯酶D(GPI-PLD)活性的条件,活性用ALP由疏水性到亲水性的转化率(%)表示。经... 我们用含糖基磷酯酰肌醇疏水膜锚结构(GPI-anchor)的碱性磷酸酶(ALP)作为底物,建立了稳定可靠的测定血清中GPI专一的磷酯酶D(GPI-PLD)活性的条件,活性用ALP由疏水性到亲水性的转化率(%)表示。经测定,健康人群的活性水平在转化率为20~60%之间者占95%以上,低于20%者仅占0.9%。在普查了多种疾病患者血清的酶活性的基础上,统计了几种疾病患者血清的酶活,其中肾衰、肠癌、肝癌、肝硬化以及甲型和乙型肝炎病人血清的酶活有所下降,活性低于20%者较正常人高15至40倍,而急性肝炎恢复期的病人,酶活水平恢复正常。另外发现,高血脂患者的酶活性则明显高于对照值。造成血清中GPI-PLD活性水平改变的原因尚不清楚,但可能不是由单一器官功能不全所致。 展开更多
关键词 磷脂酶d 糖基磷脂酰肌醇
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蛋白质工程改造磷脂酶D提高磷脂酰丝氨酸产量 被引量:2
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作者 冯小娜 齐娜 +3 位作者 宋伟 刘佳 刘立明 吴静 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第17期98-103,108,共7页
为了进一步提高磷脂酰丝氨酸(PS)产量,将来源于Streptomyces katrae的野生型磷脂酶D(SkPLD)于E.coli BL21(DE3)中进行异源表达,获得菌株E.coli BL21(DE3)/pET28a-SkPLD,以磷脂酰胆碱(PC)和L-serine为底物,发现限制PS产量进一步提高的限... 为了进一步提高磷脂酰丝氨酸(PS)产量,将来源于Streptomyces katrae的野生型磷脂酶D(SkPLD)于E.coli BL21(DE3)中进行异源表达,获得菌株E.coli BL21(DE3)/pET28a-SkPLD,以磷脂酰胆碱(PC)和L-serine为底物,发现限制PS产量进一步提高的限制因素是转磷脂酰反应转化率低(<35%)而水解反应转化率过高(>30%)。在对SKPLD结构进行详尽分析的基础上,通过蛋白质工程改造策略扩大底物催化通道,降低位阻效应;同时提高His462与L-serine的亲和力,降低水解反应。结果表明,获得4个有益单突变体(Y405A、Q407G、D370P、K478P),对其进行组合突变,获得四突变体SkPLDY405A/Q407G/D370P/K478P,转化率、PS产量、kcat/Km分别为55.6%、42.3 g·L-1、1.53 (mmol/L)-1s-1,比野生型分别提高了59.8%、59.6%、93.7%。PS产量进一步提高的原因在于四突变体催化腔体积扩大到718.6■3,且His462 N原子与L-serine O原子的催化距离(d1)缩短0.6■,与H2O O原子的距离(d2)增加0.8■。在3 L规模转化体系中,PS产量为50.4 g·L-1、转化率达到66.3%,时空产率为12.6 g/L/h。本研究利用蛋白质工程改造获得了转磷脂酰活性提高的突变体,为提高磷脂酶D的工业生产奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 蛋白质工程 磷脂酶d 磷脂酰丝氨酸 催化通道 催化距离 定点突变
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Lp-PLA2、D-二聚体和hs-CRP与冠心病患者冠状动脉病变程度的相关性 被引量:20
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作者 李凌 孟媛媛 《检验医学与临床》 CAS 2021年第4期476-478,共3页
目的分析脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、D-二聚体及超敏C反应蛋白(hs-CRP)与冠心病患者冠状动脉病变程度间的相关性。方法将该院2019年1月至2020年2月收治的178例冠心病患者纳入观察组,采用Gensini积分对其冠状动脉病变程度进行评估后,... 目的分析脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、D-二聚体及超敏C反应蛋白(hs-CRP)与冠心病患者冠状动脉病变程度间的相关性。方法将该院2019年1月至2020年2月收治的178例冠心病患者纳入观察组,采用Gensini积分对其冠状动脉病变程度进行评估后,依据评估结果分成轻度组、中度组及重度组,另选取同期90例健康体检者纳入对照组,比较对照组、观察组,以及观察组中不同冠状动脉病变程度患者的Lp-PLA2、D-二聚体及hs-CRP水平,分析上述指标与冠心病冠状动脉病变程度的相关性。结果观察组Lp-PLA2、D-二聚体、hs-CRP水平与Gensini积分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Lp-PLA2、D-二聚体、hs-CRP水平在轻度组、中度组、重度组中依次升高,两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组中Lp-PLA2、D-二聚体、hs-CRP与Gensini积分呈正相关(r=0.641、0.610、0.658,P<0.05)。结论Lp-PLA2、D-二聚体、hs-CRP与冠心病患者冠状动脉病变程度间呈正相关,能为临床诊断和评估患者病情提供重要依据。 展开更多
关键词 冠心病 冠状动脉病变程度 d-二聚体 超敏C反应蛋白 脂蛋白相关磷脂酶A2
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G_(12)亚型G蛋白对M_3乙酰胆碱受体介导的磷脂酶D调控
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作者 韩黎 吴桂芝 +1 位作者 吴旭琴 孟玉芬 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2006年第4期265-267,共3页
目的:阐明何种Gα亚型蛋白偶联M3乙酰胆碱受体(M3mAChR)并介导PLD的激活。方法:将带有Gαq、Gα12及Gα13基因的质粒转染入HEK293细胞,在细胞内过度表达,用免疫杂交检测相应的表达蛋白,并测定胞内M3mAChR介导的PLD及PLC活性。结果:Gα12... 目的:阐明何种Gα亚型蛋白偶联M3乙酰胆碱受体(M3mAChR)并介导PLD的激活。方法:将带有Gαq、Gα12及Gα13基因的质粒转染入HEK293细胞,在细胞内过度表达,用免疫杂交检测相应的表达蛋白,并测定胞内M3mAChR介导的PLD及PLC活性。结果:Gα12、Gα13亚型野生型及功能增强型蛋白的过度表达,导致胞内M3mAChR介导的PLD活性明显升高(P<0.001);而过度表达Gα12、Gα13功能缺陷型蛋白,则使胞内M3mAChR介导的PLD活性明显降低(P<0.001);但Gαq野生型及功能增强型蛋白的过度表达仅影响胞内PLC活性,对M3mAChR介导的PLD激活没有影响。结论:M3mAChR介导的胞内PLD激活极有可能是Gα12、Gα13而不是Gαq亚型G蛋白。 展开更多
关键词 受体 胆碱能 磷脂酶d GTP结合蛋白质α亚单位 G12-G13
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高敏C反应蛋白、脂蛋白相关磷脂酶A2、D-二聚体在冠心病诊断中的应用价值 被引量:3
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作者 陈立民 李晓燕 《中国疗养医学》 2020年第7期684-686,共3页
目的探讨高敏C反应蛋白(hs-CRP)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、D-二聚体(D-D)在冠心病诊断中的应用价值。方法选择2018年3月至2019年3月某院治疗的冠心病患者62例作为研究对象,选择同期健康者34例作为对照组。记录两组hs-CRP、Lp-PLA2... 目的探讨高敏C反应蛋白(hs-CRP)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、D-二聚体(D-D)在冠心病诊断中的应用价值。方法选择2018年3月至2019年3月某院治疗的冠心病患者62例作为研究对象,选择同期健康者34例作为对照组。记录两组hs-CRP、Lp-PLA2及D-D水平,分析各项指标诊断的准确度、灵敏度及特异度。结果观察组hs-CRP、Lp-PLA2及D-D分别为(20.98±3.12)mg/L、(300.91±44.57)mmol/L、(312.75±46.96)μg/L,均高于对照组的(2.10±0.85)mg/L、(221.14±16.63)mmol/L、(109.87±34.32)μg/L,差异有统计学意义(P<0.05);hs-CRP检测准确度、灵敏度、特异度及曲线下面积分别为93.75%、95.16%、91.18%、0.932,Lp-PLA2为90.63%、91.94%、88.24%、0.894,D-D为87.50%、88.71%、85.29%、0.864。结论冠状动脉病变与hs-CRP、Lp-PLA2及D-D相关,该指标在冠心病诊断中具有较高应用价值。 展开更多
关键词 冠心病 高敏C反应蛋白 脂蛋白相关磷脂酶A2 d-二聚体 诊断
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血液Lp-PLA_2、hs-CRP与D-二聚体检验在急性冠状动脉综合征患者中的应用研究
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作者 任峰 《中国医药指南》 2015年第22期42-44,共3页
目的探讨急性冠状动脉综合征患者血液脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及D-二聚体的相关性。方法选取2013年1月至2015年1月肥城矿业中心医院收治的260例急性冠状动脉综合征患者作为观察组,选择同期体检健康者260例... 目的探讨急性冠状动脉综合征患者血液脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及D-二聚体的相关性。方法选取2013年1月至2015年1月肥城矿业中心医院收治的260例急性冠状动脉综合征患者作为观察组,选择同期体检健康者260例作为对照组,检测两组患者的血清Lp-PLA2、hs-CRP、D-二聚体水平及各项生化指标水平,观察组患者行冠状动脉造影检查,明确冠状动脉病变血管数量,采用Spearman相关性分析检验各项指标之间的关系。结果观察组的Lp-PLA2、hs-CRP、D-二聚体水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(均P<0.05);观察组的Lp-PLA2与低密度脂蛋白(LDL)及冠状动脉病变支数呈正相关(r=0.873、0.735,均P<0.05);D-二聚体与hs-CRP及心功能等级呈正相关(r=0.674、0.772,均P<0.05);hs-CRP与心肌损伤标志物肌钙蛋白(TnⅠ)、肌红蛋白(Myo)、肌酸激酶MB(CK-MB)呈正相关(r=0.782、0.694、0.705,均P<0.05)。结论 Lp-PLA2、hs-CRP均是炎性标志物,但在急性冠状动脉综合征的发病机制中的作用不同,Lp-PLA2主要与脂类代谢,尤其是LDL代谢相关,可作为冠状动脉病变程度的预测指标;hsCRP与D-二聚体及心肌损伤指标关系密切,表明炎症与血栓形成及心肌损伤关系密切;D-二聚体与心功能等级密切相关,心功能不全可能是D-二聚体水平升高的重要诱因。 展开更多
关键词 急性冠状动脉综合征 脂蛋白相关磷脂酶A2 超敏C反应蛋白 d-二聚体
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冠心病患者血液脂蛋白相关磷脂酶A_(2)与超敏C反应蛋白及D-二聚体的相关性研究
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作者 蒋亮亮 林联勇 +1 位作者 顾芳 张杨杨 《当代医学》 2022年第22期97-99,共3页
目的探讨冠心病患者血液脂蛋白相关磷脂酶A_(2)(Lp-PLA_(2))与超敏C反应蛋白(hs-CRP)及D-二聚体的相关性。方法选取2018年1—12月收治的120例冠心病患者(研究组)与同期120名健康体检者作为研究对象(对照组)。测定患者血清Lp-PLA_(2),hs-... 目的探讨冠心病患者血液脂蛋白相关磷脂酶A_(2)(Lp-PLA_(2))与超敏C反应蛋白(hs-CRP)及D-二聚体的相关性。方法选取2018年1—12月收治的120例冠心病患者(研究组)与同期120名健康体检者作为研究对象(对照组)。测定患者血清Lp-PLA_(2),hs-CRP、D-二聚体、心肌损伤标志物肌钙蛋白(TnI)、肌红蛋白(Myo)、血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酸激酶MB(CK-MB)水平,比较两组上述检测指标水平,分析研究组各项指标相关性,比较不同心功能级别患者与Lp-PLA_(2)、hs-CRP、D-二聚体水平。结果研究组Lp-PLA_(2)、hs-CRP、D-二聚体、TnI、Myo、LDL-C、CK-MB水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,Lp-PIA_(2)与LDL-C、hs-CRP、D-二聚体呈正相关(P<0.05)。D-二聚体与心功能级别、hs-CRP呈正相关(P<0.05)。hs-CRP与TnI、Myo、CK-MB呈正相关(P<0.05)。Lp-PLA_(2)、hs-CRP、D-二聚体随着患者心功能等级增加,水平呈递增趋势(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,研究组Lp-PLA_(2)、hs-CRP、D-二聚体与心功能等级呈正相关(P<0.05)。结论D-二聚体与hs-CRP及心肌损伤标志物密切相关,表明炎症与血栓和心肌损伤存在相关性。心功能级别低的患者更易出现Lp-PLA_(2)、hs-CRP、D-二聚体水平升高。对于冠心病患者,Lp-PLA_(2)、hs-CRP、D-二聚体检测是诊断冠心病的重要参考指标。 展开更多
关键词 冠心病 超敏C反应蛋白 脂蛋白相关磷脂酶A_(2) d-二聚体
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维生素D与儿童和青少年2型糖尿病发病分子机制研究进展 被引量:1
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作者 朱亭 顾威 刘长伟 《中国临床研究》 CAS 2024年第7期1013-1017,共5页
2型糖尿病(T2DM)在全球的发病率不断上升。随着儿童肥胖率的增加,T2DM的发病率在儿童当中也呈现出上升的趋势。与成年患者相比,儿童T2DM患者血糖控制持久性更差,且更容易出现并发症。近年来,研究发现成人患者中维生素D缺乏与T2DM发病密... 2型糖尿病(T2DM)在全球的发病率不断上升。随着儿童肥胖率的增加,T2DM的发病率在儿童当中也呈现出上升的趋势。与成年患者相比,儿童T2DM患者血糖控制持久性更差,且更容易出现并发症。近年来,研究发现成人患者中维生素D缺乏与T2DM发病密切相关,在儿童与青少年群体中的研究报道也越来越多。机制方面,维生素D具有提高胰岛素敏感性和调节胰岛素分泌的作用,维生素D调节胰岛的敏感性可能与肾素—血管紧张素—醛固酮系统(RAAS)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)及氧化应激系统等通路有关,也可通过调节蛋白激酶A(PKA)、L型电压依赖性钙通道(L-type VDCC)、磷脂酶C(PLC)、ATP敏感性钾通道(K ATP)等信号分子刺激胰岛素的分泌。本文旨在阐述维生素D缺乏与儿童和青少年T2DM发病关系及相关分子机制,为儿童和青少年T2DM的预防和治疗提供参考。 展开更多
关键词 2型糖尿病 维生素d 儿童和青少年 肾素—血管紧张素—醛固酮系统 过氧化物酶体增殖物激活受体 蛋白激酶A L型电压依赖性钙通道 磷脂酶C ATP敏感性钾通道
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血管加压素1a与血管加压素2受体在精氨加压素调节缺氧血管平滑肌细胞蛋白激酶C表达中的作用 被引量:1
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作者 杨光明 徐竞 +3 位作者 李涛 明佳 陈玮 刘良明 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期29-33,共5页
目的观察血管加压素1a(V1a)受体与V2受体拮抗剂对精氨加压素(AVP)调节缺氧血管平滑肌细胞(VSMC)蛋白激酶C(PKC)α,δ和ε亚型表达的影响,以及磷脂酶C(PLC)、磷脂酶D(PLD)和磷脂酶A2(PLA2)活性的变化。方法缺氧培养大鼠肠系膜上动脉VSMC... 目的观察血管加压素1a(V1a)受体与V2受体拮抗剂对精氨加压素(AVP)调节缺氧血管平滑肌细胞(VSMC)蛋白激酶C(PKC)α,δ和ε亚型表达的影响,以及磷脂酶C(PLC)、磷脂酶D(PLD)和磷脂酶A2(PLA2)活性的变化。方法缺氧培养大鼠肠系膜上动脉VSMC,采用Western蛋白印迹法检测PKCα,δ和ε亚型蛋白表达;采用酶偶联荧光分析法测定PLC和PLD的活性,酸碱滴定法检测PLA2的活性。结果缺氧处理1.5h,VSMC胞膜PKC-α和ε亚型蛋白表达量明显升高,AVP进一步升高胞膜PKC-α和ε的表达。V1a受体拮抗剂d(CH2)5[Tyr2(Me)]AVP预处理可明显拮抗AVP诱导的胞膜PKCα和ε亚型蛋白表达升高,同时也明显拮抗AVP诱导的缺氧VSMC中PLC和PLD活性升高。而V2受体拮抗剂d(CH2)[d-Ile2Abu4]AVP对缺氧诱导的胞膜PKC-α和ε表达增加和VSMC中PLC和PLD活性升高无明显作用。结论AVP诱导PKC激活的机制可能与V1a受体介导的PLC/PLD途径有关,而V2受体在这一信号传导途径中可能并不起主要作用。 展开更多
关键词 受体 血管加压素 血管平滑肌细胞 缺氧 精氨 加压素 蛋白激酶C 磷脂酶C 磷脂酶d 磷脂酶A2
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蛋白激酶C研究的最新进展 被引量:12
14
作者 于秉治 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1994年第4期308-312,共5页
作为能使蛋白激酶C(PKC)活化的第二信使甘油二酯(DAG)不仅可由磷脂酰肌醇(PtdIns)水解产生,大量实验表明还可从磷脂酰胆碱(PC)水解而来,其中磷脂酶C(PLC)及磷脂酶D(PLD)参与了这一过程,磷脂酶A... 作为能使蛋白激酶C(PKC)活化的第二信使甘油二酯(DAG)不仅可由磷脂酰肌醇(PtdIns)水解产生,大量实验表明还可从磷脂酰胆碱(PC)水解而来,其中磷脂酶C(PLC)及磷脂酶D(PLD)参与了这一过程,磷脂酶A_2(PLA_2)的作用产物脂肪酸(FA)也能激活PKC.PKC至少有10种亚型,依据其活化方式可分三大类:典型PKC,新PKC和非典型PKC.PKC参与了基因表达的调控. 展开更多
关键词 蛋白激酶C 甘油二酯 磷脂酶
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四种新型因子与冠心病关系的研究进展 被引量:10
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作者 曹刚 张伟霞 《医学与哲学(B)》 2013年第3期47-49,共3页
自冠心病被发现以来,其危险因子就不断地被发现,现已发现了约200多种冠心病的危险因子,既往已知的体内的危险因子有血脂异常、纤维蛋白原、血清同型半胱氨酸、妊娠相关性血浆蛋白A、白介素-6等。近些年来随着研究人员对冠心病的不断深... 自冠心病被发现以来,其危险因子就不断地被发现,现已发现了约200多种冠心病的危险因子,既往已知的体内的危险因子有血脂异常、纤维蛋白原、血清同型半胱氨酸、妊娠相关性血浆蛋白A、白介素-6等。近些年来随着研究人员对冠心病的不断深入研究,又发现了一些新的体内的危险因子,如:血浆超敏C反应蛋白、D-二聚体、血管性血友病因子和脂蛋白相关磷脂酶A2等,临床上通过对这些新的危险因子的检测分析,有助于对冠心病发生发展、诊断、治疗及预后的判断。 展开更多
关键词 冠状动脉粥样硬化性心脏病 血浆超敏C反应蛋白 d-二聚体 血管性血友病因子 脂蛋白相关磷脂酶A2
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磷脂酶D对高糖培养的肾小球系膜细胞骨架的影响 被引量:1
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作者 黄颂敏 张海燕 +2 位作者 徐勇 沙朝晖 唐晓红 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期49-52,共4页
目的研究高糖环境下肾小球系膜细胞(GMC)内磷脂酶D(PLD)的活性改变及其对细胞骨架的影响。方法对高糖(30 mmol/L)刺激48 h的大鼠GMC,用酶联比色法测定磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D(PC-PLD)活性,底物磷酸化法检测蛋白激酶C(PKC)的活性,用免... 目的研究高糖环境下肾小球系膜细胞(GMC)内磷脂酶D(PLD)的活性改变及其对细胞骨架的影响。方法对高糖(30 mmol/L)刺激48 h的大鼠GMC,用酶联比色法测定磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D(PC-PLD)活性,底物磷酸化法检测蛋白激酶C(PKC)的活性,用免疫荧光标记和共聚焦显微镜显示并测量F-actin的表达。结果高糖刺激48 h后,GMC内PC-PLD和PKC活性明显增高,而F-actin荧光表达减少,排列紊乱。给予PC-PLD抑制剂后,高糖培养的GMC PKC活性明显下降,F-actin的荧光表达和排列都得到显著改善。结论 高糖时PLD活性增高可以通过PKC途径影响GMC骨架的组装状态,改变系膜细胞收缩功能。 展开更多
关键词 磷脂酶d 细胞骨架 蛋白激酶C 系膜细胞 肾疾病 肾小球
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基于GRIN2A/PLCB1/PRKCG信号通路探讨白芍总苷减轻马钱子水提物神经损伤的作用机制
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作者 李思宇 杨坤 +5 位作者 宋常月 陈沛萍 张昕卓 戚明珠 苏晓慧 孔祥英 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第23期56-63,共8页
目的:研究白芍总苷(TGP)对马钱子水提物(SA)所致小鼠神经损伤的作用及机制。方法:将32只雄性KM小鼠随机分为正常组、SA组(19.5 mg·kg^(-1))、TGP组(225 mg·kg^(-1))、SA+TGP组(SA 19.5 mg·kg^(-1)+TGP 225 mg·kg^(-... 目的:研究白芍总苷(TGP)对马钱子水提物(SA)所致小鼠神经损伤的作用及机制。方法:将32只雄性KM小鼠随机分为正常组、SA组(19.5 mg·kg^(-1))、TGP组(225 mg·kg^(-1))、SA+TGP组(SA 19.5 mg·kg^(-1)+TGP 225 mg·kg^(-1))。采用旷场实验、平衡木实验观察小鼠行为学变化。尼氏染色观察大脑皮层区尼氏小体的病理变化。通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠脑组织中丙二醛(MDA)、谷氨酸(Glu)和血清中5-羟色胺(5-HT)的含量。运用转录组学测序检测小鼠脑组织的基因表达谱,共同差异表达基因进行基因本体(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测相关靶点mRNA表达水平。结果:与正常组比较,SA组小鼠旷场实验中边上路程和平均速度明显增加,平衡木行走时间明显增加;小鼠皮质神经元轴突消失;脑组织中Glu和MDA含量明显升高(P<0.05,P<0.01),血清中5-HT水平也明显升高(P<0.05)。与SA组比较,SA+TGP组小鼠旷场实验中边上路程和平均速度及平衡木行走时间明显降低(P<0.05,P<0.01);皮质神经元轴突清晰可见;血清5-HT、Glu和MDA含量降低(P<0.05,P<0.01)。转录组结果发现TGP可调控N-甲基-D-天氡氨酸离子能谷氨酸受体2A(GRIN2A)/磷脂酰肌醇特异性磷酯酶Cβ1(PLCB1)/蛋白激酶C-γ(PRKCG)信号通路。与正常组比较,SA可显著降低小鼠脑中GRIN2A、PLCB1、PRKCG mRJA表达(P<0.01),而配伍TGP后,GRIN2A和PRKCG mRNA水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:SA可引起小鼠脑内明显的神经毒性,TGP显著减轻SA所诱导的神经损伤,其机制可能与GRIN2A/PLCB1/PRKCG信号通路有关。 展开更多
关键词 马钱子水提物 白芍总苷 神经毒性 配伍减毒 N-甲基-d-天氡氨酸离子能谷氨酸受体2A(GRIN2A)/磷脂酰肌醇特异性磷酯酶Cβ1(PLCB1)/蛋白激酶C-γ(PRKCG)信号通路
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超敏C反应蛋白,脂蛋白相关磷脂酶A2及D-二聚体与冠心病患者相关性研究的临床意义 被引量:28
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作者 冯庆芝 《国际免疫学杂志》 CAS 2017年第2期156-160,共5页
目的探讨冠心病患者的脂蛋白相关磷脂酶A2(1ipoprotein associated phospholipaseA2,Lp—PLA2)、超敏C反应蛋白(hypersensitive C reactive protein,hs-CRP)和D-二聚体的相关性情况,从而为临床提供更多的参考价值。方法选择2014... 目的探讨冠心病患者的脂蛋白相关磷脂酶A2(1ipoprotein associated phospholipaseA2,Lp—PLA2)、超敏C反应蛋白(hypersensitive C reactive protein,hs-CRP)和D-二聚体的相关性情况,从而为临床提供更多的参考价值。方法选择2014年1月至2016年1月期间在菏泽市立医院急诊就诊的150例冠心病患者作为观察组,并取同时期的130例健康志愿者作为对照组,对人组者的血清Lp—PLA2、hs-CRP以及D-二聚体进行检测。同时对其低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、肌钙蛋白(Cardian troponin I,TNI)、肌红蛋白(myoglobin,Myo)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK—MB)进行检测。结果观察组患者的Lp—PLA2、hs—CRP以及D-二聚体水平分别是(43.62±13.23)g/L、5.09mg/L、173.0mg/L,明显高于对照组志愿者的(21.49±7.63)g/L、2.61mg/L、68.0mg/L,差异有统计学意义(P〈0.05)。观察组的Lp—PLA2与LDL密切相关,并和冠脉病变的支数相关;D-二聚体和hs—CRP相关,同时和心功能等级相关。结论Lp-PLA2主要和LDL等脂类代谢以及冠脉病变的程度密切相关,hs—CRP则是和D-二聚体水平以及心肌损伤标志物有密切关联,说明了炎症和血栓、心肌损伤有关。心功能降低容易导致D-二聚体水平升高从而诱发血栓。因此,对于冠心病患者,可以通过Lp—PLA2、hs—CRP以及D-二聚体水平指标来预测其预后情况。 展开更多
关键词 冠心病 脂蛋白相关磷脂酶 超敏C反应蛋白 d-二聚体
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糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D与2型糖尿病
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作者 吴美芬 武革 《国际内分泌代谢杂志》 2006年第5期351-353,共3页
糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)是目前在体内发现的唯一能水解糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白的磷脂酶,可调节锚定蛋白的表达和生理功能。近年研究发现胰岛β细胞可合成与分泌GPI-PLD,GPI-PLD不仅具有模拟胰岛素的作用,而且可... 糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)是目前在体内发现的唯一能水解糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白的磷脂酶,可调节锚定蛋白的表达和生理功能。近年研究发现胰岛β细胞可合成与分泌GPI-PLD,GPI-PLD不仅具有模拟胰岛素的作用,而且可在体外抑制淀粉样蛋白原纤维的形成,改善糖尿病症状;此外,GPI-PLD分泌受胰岛素分泌的影响,在胰岛素抵抗状态下,GPI-PLD分泌也相应地会在增加后最终减少。这些研究结果均提示GPI-PLD与2型糖尿病的发病可能有着密切关联。 展开更多
关键词 糖基化磷脂酰肌醇 锚定蛋白 磷脂酶d 2型糖尿病
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眼镜蛇伤患者血清分泌型磷脂酶A2变化及价值探讨 被引量:3
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作者 吴小林 宾文凯 +2 位作者 李威 蒋华晓 周文浩 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1015-1018,共4页
目的探讨血清分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipaseA2,sPLA2)与眼镜蛇伤患者病情严重程度的关系及意义。方法选取2015年1月至2015年12月期间南华大学附属南华医院急诊科按纳入标准和排除标准收治的眼镜蛇咬伤患者52例。按就诊时... 目的探讨血清分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipaseA2,sPLA2)与眼镜蛇伤患者病情严重程度的关系及意义。方法选取2015年1月至2015年12月期间南华大学附属南华医院急诊科按纳入标准和排除标准收治的眼镜蛇咬伤患者52例。按就诊时病情程度分为:轻型组及重危型组。按患肢的肿胀程度分为:轻度肿胀组及中重度肿胀组。按就诊时间差异分为A、B两组:就诊时间〈8h组与就诊时间≥8h组。健康成人志愿者20人为对照组。对不同分组进行血清sPLA2、C反应蛋白(CRP)、D二聚体(DD)、乳酸(LAC)及外周血白细胞计数(WBC)水平的测定和比较。计量资料采用成组t检验和秩和检验分析。结果轻型组、重危型组血清sPLA2水平与对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05);轻型组及重危型组sPLA2水平比较,差异有统计学意义(P〈0.01)。轻度肿胀组及中重度肿胀组之间血清sPLA2水平进行比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。眼镜蛇伤后患者就诊时间A组、B组血清sPLA2水平与对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.05o患者sPLA2水平与LAC、DD、WBC水平正相关,其相关系数,分别为0.3142、0.2752、0.6534。结论血清sPLA2水平越高,则提示患者中毒症状越重,血清sPLA2对眼镜蛇伤病情的评估有一定的临床价值。 展开更多
关键词 分泌型磷脂酶A2 眼镜蛇咬伤 乳酸 d二聚体 C反应蛋白
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