RNA干扰GPR14对自发性高血压大鼠血压和心血管重构的影响

目的观察RNA干扰技术下调尾加压素Ⅱ(UⅡ)特异性受体G蛋白偶联受体14(GPR14)对自发性高血压大鼠(SHR)血压和心血管重构的影响。方法 SHR或Wistar-Kyoto(WKY)大鼠均随机分为两组:裸病毒(Ad)对照组和Ad-GPR14-shRNA治疗组,分别尾静脉注射对照Ad和表达GPR14基因特异短发夹RNA(shRNA)的重组腺病毒载体Ad-GPR14-shRNA。注射前1周和注射后0、1、2、3、4周检测心脏、胸主动脉GPR14表达情况和尾动脉压变化情况。检测注射后2周心脏、胸主动脉和肠系膜上动脉组织病理学。结果 Ad-GPR14-shRNA注射后1周即显著降低WKY大鼠和SHR心脏、胸主动脉GPR14表达和尾动脉压,该效果可持续至第4周,2周时最明显,并且SHR大鼠降低更显著;Ad-GPR14-shRNA治疗2周时SHR组左心重/体质量显著下降、心肌细胞横断面积显著减少、心肌纤维化显著减弱、主动脉和肠系膜上动脉中膜厚度/官腔内径比值显著下降。结论 RNA干扰能有效降低心肌和血管GPR14表达,降低SHR血压并改善心血管重构,靶向GPR14的RNA干扰有望成为高血压病基因治疗的有效方法。

尾加压素受体GPR14在大鼠心血管系统及脑内的表达

目的 :观察尾加压素 (U )受体 GPR14在 SD大鼠心血管系统及脑内的表达。 方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)检测 GPR14。 结果 :在心血管系统中 ,大鼠颈总动脉、胸主动脉、左心房及左心室均表达 GPR14m RNA,其中心室表达丰度最高 ;在中枢神经系统中 ,大鼠小脑、大脑皮质、下丘脑及海马均表达 GPR14m RNA,其中小脑表达丰度较高。结论 :U 受体 GPR14在大鼠心血管系统及脑组织中都有表达 ,提示 U 在心血管及中枢神经活动中发挥重要作用。

尾加压素Ⅱ及其受体GPR14在2型糖尿病大鼠胰腺组织中的表达

目的观察2型糖尿病(T2DM)大鼠胰腺中尾加压素Ⅱ(UⅡ)及GPR14的表达,探讨UⅡ及GPR14与T2DM大鼠糖脂及胰岛素代谢水平的相关性。方法将28只SD大鼠随机分为NC组和DM组,每组14只,分别予普通和高脂饲料喂养。8周末,DM组按25 mg/kg腹腔注射链脲佐菌素溶液造模,NC组注射同体积无菌柠檬酸钠溶液作对照,10周末行OGTT筛选成模大鼠。第4、8、14周末分别取血检测UⅡ、糖脂及胰岛素相关指标。14周末处死所有大鼠,胰腺组织用HE染色并在光镜下观察病理改变,用免疫组化SP及实时荧光定量RT-PCR法检测UⅡ及GPR14在胰腺的表达,ELISA法检测血清UⅡ水平。结果 8周末DM组UⅡ、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、TG、TC均高于同周NC组(均P<0.001),HDL-C、胰岛素敏感指数均低于同周NC组(均P<0.05),但14周末FINS与8周末相比已下降。14周末,2组UⅡ及GPR14在胰腺表达比较,DM组明显增高(P<0.001)。Pearson相关分析示,UⅡ及GPR14含量与FPG、TG和TC呈正相关(均P<0.05),与ISI和HDL-C呈负相关(均P<0.05)。结论 T2DM大鼠胰腺组织高表达UⅡ及GPR14,提示其可能与T2DM发病相关。

尾加压素Ⅱ与GPR14 mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的研究子痫前期患者胎盘组织尾加压素Ⅱ(UⅡ)及G蛋白偶联受体14(GPR14)mRNA的表达变化及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR方法对25例子痫前期(子痫前期组,其中轻度15例,重度10例))患者和20例正常足月孕妇(正常妊娠组)和胎盘组织中UⅡ和GPR14 mRNA表达水平进行检测。结果胎盘组织UⅡmRNA表达水平在轻度子痫前期组,重度子痫前期组均明显高于正常妊娠组,差异有统计学意义(P均<0.05)。重度子痫前期组孕妇胎盘GPR14mRNA表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论子痫前期患者胎盘UⅡ及其受体基因表达升高,可能在子痫前期胎盘缺血缺氧动脉粥样硬化的发生中发挥重要作用。

尾加压素Ⅱ及其受体GPR14在延髓头端腹外侧区对血压和心率的影响

目的 本工作试图观察尾加压素Ⅱ(UⅡ及其受体GPR14是否在重要心血管中枢延髓头端腹外侧区(RVLM)影响心血管活动调节,并了解UⅡ及其受体GPR14在RVLM的改变是否与针刺治疗高血压的作用机制有关。方法 应用中枢微量注射的方法观察UⅡ在RVLM对血压和心率的影响,应用半定量逆转录多聚酶链反应(RT PCR)和免疫组化的方法检测GPR14mRNA和受体蛋白在RVLM的表达,利用足底电击结合噪音引起慢性应激性高血压大鼠模型,用尾套法无创性测量尾动脉收缩压和心率,并用免疫组化的方法检测应激性高血压大鼠和在接受针刺治疗后RVLM内GPR14受体蛋白表达的改变。结果 于RVLM内微量注射UⅡ可量效依赖地升高血压和加快心率,RT PCR和免疫组化都显示RVLM内有UⅡ受体GPR14的分布,针刺“足三里”穴位能降低应激性高血压大鼠的血压,但免疫组化的结果显示RVLM内GPR14免疫阳性反应强度无明显变化。结论 大鼠RVLM内存在UⅡ受体GPR14,UⅡ在RVLM对血压和心率具有调节作用,但针刺治疗应激性高血压的机制可能与RVLM内UⅡ及其受体GPR14的改变无关。

母血和脐静脉血中UrotensinⅡ的水平及其受体GPR14 mRNA在脐静脉的表达与子痫前期的关系

目的研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)在子痫前期孕妇母血和脐静脉血中的水平和UⅡ及其受体GPR14在脐静脉上的表达,探讨UⅡ在子痫前期发病中的作用。方法(1)随机选择子痫前期孕妇30例为子痫前期组(包括轻度20例,重度10例),对照组选择同期正常孕妇15例,用ELLSA法测定母血和脐静脉血血清中UⅡ的浓度。(2)RT-PCR法半定量GPR14在脐静脉上的表达。结果(1)子痫前期组母血中UⅡ水平(5·48±1·61pg/ml)较正常妊娠组(3·28±1·39pg/ml)高(P<0·05),其中重度子痫前期组与正常组比较差异有显著性(P<0·05),而轻度子痫前期组与之相比,差异无显著性。脐静脉血中UⅡ的浓度在子痫前期组(5·65±2·66pg/ml)较正常组(3·11±1·27pg/ml)高(P<0·05),其中重度和轻度组均高于正常对照组,差异均具有显著性(P<0·001,P<0·05)。(2)脐静脉上GPR14mRNA的表达在子痫前期组(0·87±0·31)较正常组(0·50±0·22)高(P<0·05),且重度和轻度组均比正常组高,差异有显著性(P<0·05)。结论在子痫前期的发病机制中,UⅡ可能在全身小血管痉挛收缩和血管粥样硬化方面发挥了重要作用。

G蛋白偶联受体146:治疗高胆固醇血症的新靶点

高胆固醇血症是导致心脑血管疾病的主要风险,目前临床主要使用他汀类药物和前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶Kexin-9型(PCSK9)人源化单克隆抗体进行降血脂治疗。虽然这两种药物彻底改变了胆固醇管理,但并非对所有患者均有效,尤其是有家族性高胆固醇血症(FH)的患者。最近,作为降低胆固醇水平且不依赖于低密度脂蛋白受体(LDLR)的降脂药物靶点,孤儿G蛋白偶联受体146(GPR146)受到了广泛关注。在此,我们综述了GPR146在脂质稳态中的作用,它可能成为治疗高胆固醇血症和动脉粥样硬化性心血管疾病(ASCVD)新的靶蛋白。

尾加压素Ⅱ及其受体在大鼠肾成纤维细胞中的表达及银杏叶的干预作用

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠肾间质成纤维细胞尾加压素Ⅱ(UⅡ)及其受体(GPR14)表达的影响和银杏叶(GBE)的干预作用。方法:体外培养大鼠肾成纤维细胞,以未处理细胞作为正常对照组,以AngⅡ作为刺激因素,分别加入终浓度为0、25、50、100和200g·L-1的GBE,RT-PCR检测各组细胞UⅡ及GPR14 mRNA表达,免疫印迹法检测各组细胞UⅡ及GPR14蛋白含量,ELISA法检测培养上清中Ⅰ型胶原(ColⅠ)含量。结果:AngⅡ组UⅡ、GPR14表达量及培养上清中ColⅠ含量明显高于正常对照组(P<0.01),与AngⅡ刺激组比较,AngⅡ+GBE组UⅡ及GPR14的mRNA表达量下降(P<0.01),蛋白含量减少(P<0.01或P<0.05),培养上清中ColⅠ含量明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论:GBE可抑制AngⅡ诱导的肾间质成纤维细胞UⅡ及受体mRNA表达,降低其蛋白含量,减少细胞外基质ColⅠ分泌。

尾加压素Ⅱ及其受体在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏中的表达及意义

目的探讨尾加压素Ⅱ(UrotensinⅡ,UⅡ)及其受体(GPR14)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质中的表达及意义。方法将24只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham组)及模型组(UUO组),采用左侧输尿管结扎术复制UUO模型。术后第14和28天分别处死两组大鼠,取左肾进行HE和Masson染色,并用免疫组化检测肾间质中UⅡ和GPR14的表达,RT-PCR检测UⅡ和GPR14mRNA表达。结果HE和Masson染色显示模型组大鼠肾小管间质增宽,炎细胞浸润,纤维组织增多,随时间进展病变更加明显(P<0.01);免疫组化显示UUO组2w时肾间质UⅡ及GPR14表达明显增多,与Sham组比较差异显著(P<0.01);UUO组4w时UⅡ及GPR14持续高表达(P<0.01)。RT-PCR显示2w后,与Sham组比较,UUO组大鼠肾组织中UⅡmRNA表达明显增加(P<0.01),GPR14表达也有增加趋势,但无显著差异性;4w后UUO组UⅡmRNA表达仍明显高于Sham组(P<0.01),GPR14表达也明显升高(P<0.01)。结论UⅡ及GPR14的蛋白表达和mRNA水平在UUO大鼠肾间质中明显增加,提示UⅡ的表达与肾纤维化有关,可能参与了肾纤维化的过程。

尾加压素Ⅱ与肾脏疾病的研究进展

尾加压素Ⅱ（urotensin Ⅱ，U Ⅱ）是一种具有广泛生物学效应的血管活性肽。它最初是从鱼的脊髓尾垂体中分离出来的生长抑素样环肽1999年Ames等首先发现人体内一种孤立的G蛋白耦联受体GPR14是U Ⅱ的特异性受体（现命名为UT），UⅡ同UT结合后导致细胞内Ca^2＋升高，引起一系列生物学效应，其缩血管效应比内皮素1（ET-1）还强10余倍，是迄今发现的体内最强的缩血管活性肽。体外研究还表明UⅡ具有提高基质表达和调节细胞增生的作用。近年来，UⅡ在肾脏疾病发病学中的作用日益受到研究者的重视。

尾加压素Ⅱ与血管重塑

尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)是继内皮素之后在哺乳动物体内新发现的缩血管活性肽,其特异性受体为GPR14(UT),广泛分布于人类心血管系统,包括血管平滑肌、内皮和血管外膜以及心肌细胞和心肌成纤维细胞等。在某些病理状态下如粥样硬化斑块、新生内膜等表达上调,表明UⅡ在心血管系统疾病的发生发展中发挥着重要作用。现将UⅡ与血管重塑的关系作简要综述。

尾加压素Ⅱ与血管重塑

尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)是继内皮素之后在哺乳动物体内新发现的缩血管活性肽,其特异性受体为GPR14(UT),广泛分布于人类心血管系统,包括血管平滑肌、内皮和血管外膜以及心肌细胞和心肌成纤维细胞等。在某些病理状态下如粥样硬化斑块、新生内膜等表达上调,表明UⅡ在心血管系统疾病的发生发展中发挥着重要作用。现将UⅡ与血管重塑的关系作简要综述。

尾加压素Ⅱ及其受体mRNA在糖尿病大鼠肾脏的表达

尾加压素Ⅱ（urotensinⅡ,UⅡ）是迄今体内最强的缩血管活性肽,其缩血管效应是内皮素1（ET-1）的10倍以上。研究证明人体一种孤立G蛋白耦联受体GPR14是UⅡ的特异性受体,UⅡ与其受体构成UⅡ-UⅡ受体系统,二者特异性结合可产生多种生物学效应。本研究观察UⅡ及其受体GPR14在糖尿病大鼠肾脏的表达规律,探讨它们在糖尿病肾病肾小管损伤发生中的可能作用。