GPR35受体香豆素类激动剂三维定量构效关系研究

本实验采用比较分子力场分析法(Co MFA)和比较分子相似性指数分析法(Co MSIA)建立GPR35受体香豆素类激动活性的三维定量构效关系(3D-QSAR)模型,以确定该类激动剂的分子结构与其生物活性之间的定量关系。在预测半数有效浓度(EC_(50))的Co MFA模型中,训练集抽一法(LOO)交叉验证系数q^2=0.559,非交叉验证系数r^2=0.887,标准偏差SE=0.382;在Co MSIA模型中,训练集抽一法交叉验证系数q^2=0.627,非交叉验证系数r^2=0.915,标准偏差SE=0.365。在预测半数抑制浓度(IC_(50))的Co MFA模型中,训练集抽一法交叉验证系数q^2=0.600,非交叉验证系数r^2=0.903,标准偏差SE=0.375;在Co MSIA模型中,训练集抽一法交叉验证系数q^2=0.566,非交叉验证系数r^2=0.914,标准偏差SE=0.378。EC_(50)和IC_(50)的两个3D-QSAR模型预测结果同实验数据基本一致,说明模型的预测能力较好。本实验根据模型预测结果,对配体分子的结构进行分析,为获得具有更高活性的配体分子提供理论依据。

GPR35调节乳腺癌细胞能量代谢促进肿瘤细胞增殖的研究

目的 探讨GPR35促进乳腺癌细胞增殖的分子机制,为临床以GPR35为靶点的乳腺癌生物治疗提供新的理论依据。方法 培养乳腺癌细胞MDA-MB-231和T47D,随机分为对照组和GPR35组,采用基因转染的方式构建过表达GPR35细胞模型,并按照分组选择性应用mTOR抑制剂雷帕霉素(Rapamycin,Rapa),对mTOR的磷酸化水平进行抑制,随后分别对各组细胞的生物学行为进行检测。通过MTT法和流式细胞术检测GPR35对细胞增殖和周期的影响;Western blot法检测GPR35、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、TRAP1的蛋白表达;q PCR法检测GPR35 mRNA的表达;ATP试剂盒检测ATP含量;乳酸试剂盒检测乳酸的含量。结果 使用基因转染的方式将GPR35转染入乳腺癌细胞MDA-MB-231和T47D中,荧光显微镜下观察转染效率,Western blot和q PCR法检测GPR35,证实两种细胞内GPR35组的GPR35蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.01);转染GPR35后能促进乳腺癌细胞MDA-MB-231和T47D的增殖(P<0.05);GPR35可促进细胞周期S期的上升(P<0.05,P<0.01);GPR35组的p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、TRAP1的蛋白表达均上升(P<0.05,P<0.01),PI3K、Akt、mTOR的蛋白表达无明显变化(P>0.05);雷帕霉素组的p-mTOR和TRAP1表达下降(P<0.01);GPR35组的ATP含量和乳酸含量均上升(P<0.01),而雷帕霉素组的ATP含量上升(P<0.001)和乳酸含量下降(P<0.01)。结论 GPR35通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路,上调TRAP1表达,导致线粒体功能受损,能量代谢以无氧糖酵解为主,促进乳腺癌细胞增殖。

GPR35与乳腺癌发生发展关系的研究进展

G蛋白偶联受体从被发现至今受到了人们的广泛关注。G蛋白偶联受体35(GPR35)是临床上新发现的一种G蛋白偶联受体。近年来,越来越多的研究结果证实以GPR35作为治疗靶点的疗法可在各类疾病的治疗中发挥重要的作用。在本文中,笔者主要是对GPR35的结构、信号通路、生理功能及其与乳腺癌发生发展关系等方面的研究进展进行综述。