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陆地棉转GR79与GAT基因对草甘膦抗性的鉴定及其遗传规律分析 被引量:1
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作者 赵龙飞 赵亮 +1 位作者 狄佳春 陈旭升 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期531-536,共6页
本研究采用特异引物对陆地棉种质系GGK-2的抗草甘膦基因进行PCR鉴定,结果显示:GGK-2不仅扩增出488bp的GR79基因的特征条带,同时还扩增出379bp的GAT基因特征条带。而后采用草甘膦对陆地棉与陆地棉杂交F2分离群体进行浸种抗性鉴定,结果显... 本研究采用特异引物对陆地棉种质系GGK-2的抗草甘膦基因进行PCR鉴定,结果显示:GGK-2不仅扩增出488bp的GR79基因的特征条带,同时还扩增出379bp的GAT基因特征条带。而后采用草甘膦对陆地棉与陆地棉杂交F2分离群体进行浸种抗性鉴定,结果显示GGK-2对草甘膦表现出良好抗性,其抗草甘膦性状分离符合抗性株∶非抗性株=3∶1的质量性状分离规律,显示抗草甘膦性状是受孟德尔单显性基因控制的质量性状。同时,利用陆地棉与陆地棉杂交F2群体对抗性基因GR79和GAT的分离进行PCR检测,显示目的基因GR79和GAT导入棉花后,以共有的方式在棉花杂交后代稳定地遗传传递,共有比率高达97.9%。而后,采用海岛棉与陆地棉杂交F2群体作为定位群体,利用SSR分子标记对外源基因进行遗传定位,结果显示GR79和GAT2个基因均被定位于棉花第20号染色体上,并表现为连锁遗传,其遗传距离为3.3cM。在GR79基因位点一侧有7个SSR分子标记,与其最近的标记为相距7.1cM的NAU2579;在GAT基因位点一侧也有7个SSR分子标记,与其最近的标记是相距3.9cM的NAU3137。本研究为品系GGK-2在抗除草剂棉花育种中的应用提供了理论依据。 展开更多
关键词 GGK-2 抗草甘膦基因 gr79 GAT 遗传规律
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In maize,co-expression of GAT and GR79-EPSPS provides high glyphosate resistance,along with low glyphosate residues 被引量:2
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作者 Shengyan Li Pengcheng Li +5 位作者 Xiangyin Li Ning Wen Yinxiao Wang Wei Lu Min Lin Zhihong Lang 《aBIOTECH》 EI CAS CSCD 2023年第4期277-290,共14页
Herbicide tolerance has been the dominant trait introduced during the global commercialization of genetically modified(GM)crops.Herbicide-tolerant crops,especially glyphosate-resistant crops,offer great advantages for... Herbicide tolerance has been the dominant trait introduced during the global commercialization of genetically modified(GM)crops.Herbicide-tolerant crops,especially glyphosate-resistant crops,offer great advantages for weed management;however,despite these benefits,glyphosate-resistant maize(Zea mays L.)has not yet been commercially deployed in China.To develop a new bio-breeding resource for glyphosate-resistant maize,we introduced a codon-optimized glyphosate N-acetyltransferase gene,gat,and the enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase gene,gr79-epsps,into the maize variety B104.We selected a genetically stable high glyphosate resistance(GR)transgenic event,designated GG2,from the transgenic maize population through screening with high doses of glyphosate.A molecular analysis demonstrated that single copy of gat and gr79-epsps were integrated into the maize genome,and these two genes were stably transcribed and translated.Field trials showed that the transgenic event GG2 could tolerate 9000 g acid equivalent(a.e.)glyphosate per ha with no effect on phenotype or yield.A gas chromatography-mass spectrometry(GC–MS)analysis revealed that,shortly after glyphosate application,the glyphosate(PMG)and aminomethylphosphonic acid(AMPA)residues in GG2 leaves decreased by more than 90%compared to their levels in HGK60 transgenic plants,which only harbored the epsps gene.Additionally,PMG and its metabolic residues(AMPA and N-acetyl-PMG)were not detected in the silage or seeds of GG2,even when far more than the recommended agricultural dose of glyphosate was applied.The co-expression of gat and gr79-epsps,therefore,confers GG2 with high GR and a low risk of herbicide residue accumulation,making this germplasm a valuable GR event in herbicide-tolerant maize breeding. 展开更多
关键词 Transgenic maize Glyphosate resistance gr79-epsps gene Gat gene Low residues
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陆地棉抗虫与抗草甘膦基因的分子聚合及经济性状相关分析
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作者 陈旭升 赵亮 狄佳春 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2637-2642,共6页
培育抗棉铃虫兼抗草甘膦的棉花,可以同步提高品种的抗虫与抗除草剂能力,降低植棉的除虫、除草用工成本,提升植棉综合经济效益。本研究利用自育的高产优质陆地棉品系、国产转Bt基因抗虫棉品系以及转GR79+GAT基因的抗草甘膦陆地棉品系为... 培育抗棉铃虫兼抗草甘膦的棉花,可以同步提高品种的抗虫与抗除草剂能力,降低植棉的除虫、除草用工成本,提升植棉综合经济效益。本研究利用自育的高产优质陆地棉品系、国产转Bt基因抗虫棉品系以及转GR79+GAT基因的抗草甘膦陆地棉品系为杂交亲本,配置复交组合。在繁殖的复交分离群体后代,通过在苗床喷洒0.2%草甘膦,去除不抗草甘膦棉苗;并在大田不防治棉铃虫的条件下,筛选抗虫棉株。而后在实验室利用特异引物对抗虫基因与抗草甘膦基因进行分子跟踪检测,将同时具有Bt基因与GR79+GAT基因的单株繁殖成株系,经大田筛选获得9个抗虫兼抗草甘膦的优良品系。然后对育成品系进行产量比较试验,结果显示,其中品系BG-6不但实现了抗虫与抗草甘膦基因的聚合,而且该品系的皮棉产量水平较高、纤维品质表现良好:纤维长度达30.9 cm、比强度30.1 cN tex^(-1)、马克隆值4.9。对产量性状与纤维品质性状相关分析显示,只有衣分与棉纤维整齐度呈极显著负相关(r=-0.838**),其他产量性状与纤维品质性状均不存在显著相关性。文章最后得出结论:在复合杂交组合的分离后代,通过在苗床喷洒草甘膦筛选抗性棉苗,再结合大田不治虫筛选抗虫单株;而后在室内对2种抗性基因进行PCR分子跟踪检测,再在大田对产量性状与品质性状进行系统选育,可实现抗虫与抗草甘膦基因以及高产与优质性状的多元聚合。 展开更多
关键词 陆地棉 BT基因 gr79+GAT基因 产量性状 纤维品质 相关分析
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基于GR79 EPSPS筛选标记的抗虫抗除草剂表达载体构建及抗性鉴定
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作者 杨羊 梁成真 +4 位作者 孟志刚 陈全家 罗淑萍 张锐 郭三堆 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期22-28,共7页
虫害和草害是农业生产中两大主要危害。目前,尽管转基因抗虫和抗除草剂作物相继报道和应用,然而我国抗虫抗除草剂复合性状作物培育仍然明显滞后,而且多依靠传统杂交选育的手段,费事费力、周期长。根据苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringie... 虫害和草害是农业生产中两大主要危害。目前,尽管转基因抗虫和抗除草剂作物相继报道和应用,然而我国抗虫抗除草剂复合性状作物培育仍然明显滞后,而且多依靠传统杂交选育的手段,费事费力、周期长。根据苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt) Cry1Ac蛋白结合结构域和毒性结构域特征,人工合成杀虫基因cry1Ac-2.5。同时,利用抗除草剂基因GR79 EPSPS替换卡那霉素筛选标记,构建基于草甘膦除草剂筛选标记的复合抗虫抗除草剂植物表达载体,并转化烟草。qRT-PCR结果表明转基因烟草cry1Ac-2.5和GR79EPSPS基因转录水平均成功表达,经Bt和GR79试纸条检测表明上述基因在蛋白水平正确翻译。抗性实验表明,转基因烟草愈伤经草甘膦筛选,阳性率达到80%,且转基因烟草耐受100 mg/L草甘膦处理。抗虫实验表明,饲喂cry1Ac-2.5转基因烟草4 d后,棉铃虫幼虫死亡率为90%左右,表明人工基因cry1Ac-2.5具有显著的的抗虫效果。以上结果表明,构建的抗虫抗除草剂植物表达载体(Cry1Ac-2.5+GR79 EPSPS)将抗虫基因和抗除草剂基因有效合并,对于快速培育抗虫抗除草剂作物具有指导意义。 展开更多
关键词 Bt CRY1AC gr79 EPSPS 烟草 抗虫 抗草甘膦
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