高尔基体堆叠蛋白GRASP55结构折叠变化研究

哺乳动物细胞中,高尔基体是由数个扁平囊泡堆叠形成的高度有极性的细胞器,其堆叠主要通过GRASP55和GRASP65蛋白的寡聚化来介导.GRASP55由N端两个串联的PDZ结构域和C端脯氨酸丰富结构域组成.前期工作中发现PDZ结构域末尾存在一段内部配体序列在GRASP55寡聚过程中有重要作用.为进一步验证该内部配体的作用,实验中以不含内部配体的截短型GRASP55为研究对象进行结构学研究,发现GRASP55中存在包含此内部配体的3处在构象上易变的区域,通过这些区域在折叠上的变化而影响GRASP55的寡聚化,进而影响高尔基体的堆叠.

高尔基体堆形成的分子机制

高尔基体堆(golgi stack)的形成对高尔基体行使功能起着至关重要的作用。体外的无细胞实验系统已经鉴定了很多在高尔基堆形成中起作用的蛋白,并总结了它们起作用的模式。NSF和p97能分别介导有丝分裂后的扁平囊(cisterna)重生。依赖于NSF的扁平囊重生必需“栓链(tether)”giantin- p115-GM130的作用,该“栓链”也在随后的扁平囊堆叠中起作用。扁平囊的堆叠主要依赖GRASP65和GRASP55的相互作用。哺乳动物细胞中,高尔基堆层通过侧向连接形成高尔基带(golgi ribbon)。GM130和GRASP65对高尔基带(golgi ribbon)形成是必需的。