GRK6对多发性骨髓瘤MM1R细胞增殖的作用及其作用机制的初步研究

目的:探讨GRK6对多发性骨髓瘤细胞增殖作用的调控及其机制。方法:通过构建干扰人GRK6基因的慢病毒载体GRK6-shRNA,转染筛选获得稳定下调GRK6基因表达的多发性骨髓瘤细胞株MM1R。利用实时定量PCR及Westem blot验证慢病毒载体介导的GRK6基因表达下调的效果。选取GRK6表达下调最显著的细胞株检测GRK6对细胞增殖的影响。结果:构建干扰人GRK6基因的慢病毒载体GRK6-shRNA,转染多发性骨髓瘤MM1R细胞,筛选并获得稳定下调GRK6基因的多发性骨髓瘤细胞株MM1R。CCK-8试验结果显示,实验组细胞增殖活性明显低于对照组(P<0.05)。流式细胞术检测显示:实验组细胞在G0/G1期被阻滞(P<0.05)。Western Blot检测实验组Cyclin D1和CDK4水平相比较对照组明显降低。结论:成功构建了特异性干扰GRK6表达的慢病毒载体,获得可稳定下调GRK6的MM1R细胞株并且发现下调GRK6表达后,MM1R细胞可能通过抑制Cyclin D1和CDK4水平使MM1R细胞阻滞于G0/G1期,并显著地抑制了多发性骨髓瘤MM1R细胞的增殖。

甲状腺乳头状癌组织SMYD2、GRK6表达与临床病理特征、增殖基因和预后的关系分析

目的:探讨甲状腺乳头状癌组织中SET和MYND域蛋白2(SMYD2)、G蛋白偶联受体激酶6(GRK6)表达与临床病理特征、增殖基因和预后的关系。方法:选择2015年1月至2017年12月期间我院收治的83例甲状腺乳头状癌患者,取甲状腺乳头状癌患者手术切除的癌组织及癌旁组织(距肿瘤组织边缘≥5 cm)标本,采用qRT-PCR检测SMYD2、GRK6以及增殖基因[叉头盒蛋白A1(FOXA1)、程序性细胞死亡基因4(PDCD4)、Xklp2靶蛋白(TPX2)]表达。分析SMYD2、GRK6表达与临床病理特征、增殖基因和预后的关系。分析甲状腺乳头状癌患者预后的影响因素。结果:癌组织SMYD2、GRK6、FOXA1、PDCD4、TPX2表达高于癌旁组织(P<0.05)。Pearson相关性分析显示:SMYD2、GRK6表达与FOXA1、PDCD4、TPX2表达呈正相关(P<0.05)。肿瘤直径>1 cm、低中度分化、T3~T4a期、N1a~N1b期患者癌组织中SMYD2、GRK6表达高于肿瘤直径≤1 cm、高度分化、T1~T2期、N0期患者(P<0.05)。SMYD2、GRK6高表达组患者3年无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)生存率低于SMYD2、GRK6低表达组(P<0.05)。Cox比例风险模型分析结果显示N1a~N1b期、SMYD2≥2.95、GRK6≥3.02是甲状腺乳头状癌患者不良预后的危险因素(P<0.05)。结论:甲状腺乳头状癌组织中SMYD2、GRK6表达增高,SMYD2、GRK6过表达与癌细胞增殖、侵袭和术后预后不良有关。