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云南普洱瓢鸡、腾冲雪鸡GRX1、TRX1基因差异性表达 被引量:1
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作者 李美荃 宋聪 +4 位作者 张春勇 安清聪 潘洪斌 陈克嶙 郭荣富 《家畜生态学报》 北大核心 2015年第12期19-23,59,共6页
谷氧还蛋白(GRX1)和硫氧还蛋白(TRX1)在动物机体抗氧化系统中发挥重要作用。试验对地方鸡种八个组织进行实时荧光定量,旨在探索抗氧化基因GRX1、TRX1在不同鸡种、组织间的差异表达。试验测定GRX1、TRX1基因在普洱瓢鸡、腾冲雪鸡和三黄... 谷氧还蛋白(GRX1)和硫氧还蛋白(TRX1)在动物机体抗氧化系统中发挥重要作用。试验对地方鸡种八个组织进行实时荧光定量,旨在探索抗氧化基因GRX1、TRX1在不同鸡种、组织间的差异表达。试验测定GRX1、TRX1基因在普洱瓢鸡、腾冲雪鸡和三黄鸡的十二指肠、回肠、肺脏、心脏、肝脏、肾脏、皮肤、肌肉八个组织中的mRNA表达水平。结果表明,普洱瓢鸡的GRX1、TRX1基因mRNA表达水平极显著高于腾冲雪鸡,腾冲雪鸡的GRX1、TRX1基因mRNA表达水平极显著高于三黄鸡(P<0.01);普洱瓢鸡、腾冲雪鸡各组织中的TRX1、GRX1的表达量极显著高于三黄鸡(P<0.01);TRX1在三个鸡种中的表达量极显著高于GRX1(P<0.01)。结果显示,普洱瓢鸡、腾冲雪鸡与三黄鸡抗氧化基因表达存在明显差异,这可能是影响本地鸡种与培育鸡种抗氧化能力的重要途径之一。 展开更多
关键词 谷氧还蛋白1 硫氧还蛋白1 普洱瓢鸡 腾冲雪鸡 基因表达
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谷氧还蛋白1和硫氧还蛋白1基因在高黎贡山猪不同组织中表达规律及维生素E对其在氧化应激细胞中表达的影响 被引量:9
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作者 安清聪 张春勇 +2 位作者 李美荃 陈克嶙 郭荣富 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1825-1835,共11页
本试验研究云南特有的高黎贡山猪不同组织中谷氧还蛋白1(GRX1)、硫氧还蛋白1(TRX1)基因的表达规律,并探讨维生素E对高黎贡山猪氧化应激细胞中该基因表达的调节作用。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测高黎贡山猪脑垂体、下丘脑、甲... 本试验研究云南特有的高黎贡山猪不同组织中谷氧还蛋白1(GRX1)、硫氧还蛋白1(TRX1)基因的表达规律,并探讨维生素E对高黎贡山猪氧化应激细胞中该基因表达的调节作用。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测高黎贡山猪脑垂体、下丘脑、甲状腺、胸腺、胰腺、生殖腺、十二指肠、空肠、回肠、皮肤、肝脏11种组织中GRX1、TRX1基因表达;以过氧化氢(H2O2)为氧化应激源,建立猪胎儿皮肤成纤维细胞(PFSF)氧化应激模型,研究维生素E对G RX1、TRX1基因表达的调节作用。结果表明:1)G RX1、TRX1基因在高黎贡山猪被检11种组织中均有表达,基因表达谱为肝脏中GRX1、TRX1基因表达量最高,其次为皮肤、空肠,而胰腺和内分泌腺各组织中的表达量不高。母猪胸腺、生殖腺、回肠、肝脏中GRX1基因表达量显著高于公猪(P<0.05),胰腺中GRX1基因表达量极显著高于公猪(P<0.01);母猪垂体、胸腺、胰腺、生殖腺和肝脏中TRX1基因表达量显著高于公猪(P<0.05)。2)细胞培养结果表明,受到H2O2刺激时,氧化应激细胞中TRX1基因产生过表达(P<0.05),维生素E对GRX1、TRX1基因表达具有明显的调节作用,其适宜浓度为40μg/mL。综上所述,高黎贡山猪GRX1、TRX1基因的表达存在明显的性别和组织特异性;诱导猪体内GRX1、TRX1基因的表达可能是缓解机体氧化应激的一种重要方式;添加适宜浓度的维生素E可以提高氧化应激细胞中GRX1、TRX1基因表达,增强机体的抗氧化能力。 展开更多
关键词 grx1 TRX1 基因表达 高黎贡山猪 氧化应激 维生素E
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重组人谷氧还蛋白1在大肠杆菌中表达条件的优化、纯化及活性检测 被引量:1
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作者 刘莹莹 邹朝霞 +2 位作者 周宏博 吴莉芳 房绍红 《生命科学研究》 CAS CSCD 2006年第3期228-232,共5页
为进一步研究谷氧还蛋白1(Grx1)的生物学功能及作用机制,将已构建的pRSETA-Grx1融合蛋白表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达,并优化表达条件,用SDS-PAGE和凝胶影像分析.结果表明,当菌体密度OD600为1.0时开始诱导,加入终浓度0.5mmol/... 为进一步研究谷氧还蛋白1(Grx1)的生物学功能及作用机制,将已构建的pRSETA-Grx1融合蛋白表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达,并优化表达条件,用SDS-PAGE和凝胶影像分析.结果表明,当菌体密度OD600为1.0时开始诱导,加入终浓度0.5mmol/LIPTG,37℃,110±5r/min振荡培养5h,重组蛋白为可溶性,表达量达30%以上.用Ni-NTA树脂亲和层析纯化重组蛋白,获得蛋白质纯度达90%以上;W estern印迹结果表明,该蛋白具有免疫活性;MTT结果显示,终浓度为10mg/LGrx1重组蛋白具有保护细胞抵御500μmol/LH2O2作用(P<0.01). 展开更多
关键词 pRSETA—grx1 表达条件优化 纯化
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线粒体ROS改变参与石蒜碱诱导的HepG2细胞凋亡 被引量:1
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作者 抗晶晶 刘晓宁 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期91-96,共6页
探究石蒜碱诱导HepG2细胞凋亡的分子机理. CCK-8实验检测细胞增殖情况;流式细胞术检测加或不加SS31情况下,石蒜碱对HepG2细胞凋亡比例的影响;用核酸染料Hoechst 33342评估凋亡细胞细胞核的形态变化;用Western blot分析技术检测PARP片段... 探究石蒜碱诱导HepG2细胞凋亡的分子机理. CCK-8实验检测细胞增殖情况;流式细胞术检测加或不加SS31情况下,石蒜碱对HepG2细胞凋亡比例的影响;用核酸染料Hoechst 33342评估凋亡细胞细胞核的形态变化;用Western blot分析技术检测PARP片段的表达情况.成功构建靶向线粒体的Mito-Grx1-roGFP2转基因稳定株肝癌细胞系HepG2. SS31作为线粒体ROS的定向清除剂,能够改善石蒜碱引起的HepG2细胞形态学损伤及细胞核内PARP切割,抑制石蒜碱诱导的细胞凋亡,降低反映线粒体ROS含量的405 nm/488 nm荧光比值.研究结果提示,线粒体内ROS水平的改变是石蒜碱诱导HepG2细胞凋亡的机制之一.石蒜碱有望成为治疗肝癌的潜力药物,值得更深入的研究. 展开更多
关键词 石蒜碱 人类肝癌HepG2细胞 细胞凋亡 mito-grx1-roGFP2 线粒体ROS SS31
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hpRNA的制备新方法及其在RNAi载体中的应用
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作者 刘晓宁 《安徽农业科学》 CAS 2016年第4期175-177,244,共4页
[目的]验证制备新方法所获得的稳定hpRNA是否可用于RNAi载体的构建并达到基因表达干扰的效果。[方法]利用制备新方法(2μL DNA与8μL H_2O混匀,95℃5 min,37℃15 min)制备hpRNA,后采用REGS方法构建Zm MDAR RNAi载体,通过Grx1-ro GFP2和... [目的]验证制备新方法所获得的稳定hpRNA是否可用于RNAi载体的构建并达到基因表达干扰的效果。[方法]利用制备新方法(2μL DNA与8μL H_2O混匀,95℃5 min,37℃15 min)制备hpRNA,后采用REGS方法构建Zm MDAR RNAi载体,通过Grx1-ro GFP2和荧光实时定量PCR检测基因表达干扰的效果。[结果]利用制备新方法制备50 nt hpRNA。Zm MDAR基因的表达量变化和Grxl-ro GFP2探针的荧光比值变化表明hpRNA介导的干扰载体引起了原生质体氧化还原状态的变化。[结论]通过制备新方法所制备的hpRNA为RNAi载体所介导的干扰作用奠定基础。 展开更多
关键词 发夹RNA REGS ZmMDAR RNAI grx1-roGFP2
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谷氧还蛋白1和硫氧还蛋白1基因在云南乌金猪不同组织中的表达特点及L-组氨酸对其在氧化应激细胞中表达的影响 被引量:8
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作者 张春勇 陈克嶙 +1 位作者 黄金昌 郭荣富 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2415-2423,共13页
本试验旨在研究抗氧化基因谷氧还蛋白1(GRX1)、硫氧还蛋白1(TRX1)在云南乌金猪脑垂体、下丘脑、甲状腺、胸腺、胰腺、生殖腺、肝脏、皮肤、十二指肠、空肠、回肠11种组织中的差异表达,探讨L-组氨酸对乌金猪氧化应激细胞中GRX1、TRX1基... 本试验旨在研究抗氧化基因谷氧还蛋白1(GRX1)、硫氧还蛋白1(TRX1)在云南乌金猪脑垂体、下丘脑、甲状腺、胸腺、胰腺、生殖腺、肝脏、皮肤、十二指肠、空肠、回肠11种组织中的差异表达,探讨L-组氨酸对乌金猪氧化应激细胞中GRX1、TRX1基因表达的调节作用。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测乌金猪组织中GRX1、TRX1基因表达;以过氧化氢(H2O2)为氧化应激源建立氧化应激细胞模型,探讨L-组氨酸对GRX1、TRX1基因表达的调节作用。结果表明:1)GRX1、TRX1基因在乌金猪被检测组织中均有表达,肝脏表达量最高,其次是皮肤、空肠,其他组织中的表达量相对较低;2)乌金猪组织中TRX1基因表达量明显高于G RX1基因表达量;3)细胞培养结果表明,受到H2O2刺激时,氧化应激细胞中GRX1、TRX1基因产生过表达,L-组氨酸对氧化应激细胞或非应激细胞中GRX1、TRX1基因表达具有调节作用,其适宜浓度约为280μg/mL。乌金猪GRX1、TRX1基因表达具有明显组织特异性,H2O2可诱导氧化应激细胞中GRX1、TRX1基因产生过表达,添加适宜浓度的L-组氨酸可以调节氧化应激细胞或非应激细胞中GRX1、TRX1基因表达。结果提示,通过营养途径可诱导乌金猪体内G RX1、TRX1基因的表达,这是缓解机体氧化应激损伤和增强抗氧化能力的一种有效方式。 展开更多
关键词 乌金猪 氧化应激 谷氧还蛋白1 硫氧还蛋白1 基因表达 L-组氨酸
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Exploring the precision redox map during fasting-refeeding and satiation in C.elegans
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作者 Xinhua Qiao Lu Kang +7 位作者 Chang Shi Aojun Ye Dongli Wu Yuyunfei Huang Minghao Deng Jiarui Wang Yuzheng Zhao Chang Chen 《Stress Biology》 2023年第1期187-200,共14页
Fasting is a popular dietary strategy because it grants numerous advantages,and redox regulation is one mecha-nism involved.However,the precise redox changes with respect to the redox species,organelles and tissues re... Fasting is a popular dietary strategy because it grants numerous advantages,and redox regulation is one mecha-nism involved.However,the precise redox changes with respect to the redox species,organelles and tissues remain unclear,which hinders the understanding of the metabolic mechanism,and exploring the precision redox map under various dietary statuses is of great significance.Twelve redox-sensitive C.elegans strains stably expressing genetically encoded redox fluorescent probes(Hyperion sensing H_(2)O_(2) and Grx1-roGFP2 sensing GSH/GSSG)in three organelles(cytoplasm,mitochondria and endoplasmic reticulum(ER))were constructed in two tissues(body wall muscle and neurons)and were confirmed to respond to redox challenge.The H_(2)O_(2) and GSSG/GSH redox changes in two tissues and three organelles were obtained by confocal microscopy during fasting,refeeding,and satiation.We found that under fasting condition,H_(2)O_(2) decreased in most compartments,except for an increase in mitochondria,while GSSG/GSH increased in the cytoplasm of body muscle and the ER of neurons.After refeeding,the redox changes in H_(2)O_(2) and GSSG/GSH caused by fasting were reversed in most organelles of the body wall muscle and neurons.In the sati-ated state,H_(2)O_(2) increased markedly in the cytoplasm,mitochondria and ER of muscle and the ER of neurons,while GSSG/GSH exhibited no change in most organelles of the two tissues except for an increase in the ER of muscle.Our study systematically and precisely presents the redox characteristics under different dietary states in living animals and provides a basis for further investigating the redox mechanism in metabolism and optimizing dietary guidance. 展开更多
关键词 Redox Fasting Refeeding Satiation Hyperion grx1-roGFP2 Caenorhabditis elegans
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