全球系统重要性银行（Global Systemically Important Banks,GSIBs）包括美国、欧洲、日本、中国的大型银行30家,总资产逾47万亿美元,占全球银行业资产逾三分之一,可谓是全球银行业的缩影。所谓知己知彼,百战不殆,中国大型商业银行以提...全球系统重要性银行（Global Systemically Important Banks,GSIBs）包括美国、欧洲、日本、中国的大型银行30家,总资产逾47万亿美元,占全球银行业资产逾三分之一,可谓是全球银行业的缩影。所谓知己知彼,百战不殆,中国大型商业银行以提升国际化程度作为长远的发展目标,需要紧贴全球银行业的发展趋势,才能制定合适的战略。展开更多
为深入研究大肠杆菌谷胱甘肽转运系统的蛋白质结构和功能,对该系统中的gsiB基因进行了克隆和表达条件的优化。根据大肠杆菌谷胱甘肽转运系统中底物结合蛋白gsiB基因序列,利用PCR方法扩增到该基因的编码区序列,利用SLIC(Sequence and lig...为深入研究大肠杆菌谷胱甘肽转运系统的蛋白质结构和功能,对该系统中的gsiB基因进行了克隆和表达条件的优化。根据大肠杆菌谷胱甘肽转运系统中底物结合蛋白gsiB基因序列,利用PCR方法扩增到该基因的编码区序列,利用SLIC(Sequence and ligation–independent cloning)方法直接将其插入pWaldo-GFPe中,成功构建了重组表达质粒pWaldo-GFP-GsiB。将重组质粒转化不同的大肠杆菌表达菌株进行诱导表达,通过改变培养温度和IPTG浓度等条件,得到了能够大量表达目标蛋白的重组子。结果表明:大肠杆菌BL21(DE3)是gsiB基因表达的最佳宿主菌;18℃低温诱导培养有利于gsiB基因的大量表达;0.1mmol/LIPTG足够诱导gsiB基因表达,增加IPTG浓度(0.1mmol/L～1.0mmol/L)并不能明显地促进gsiB基因的表达。Western blotting结果显示目标蛋白质有表达,其分子量大小与预期相符。展开更多
文摘全球系统重要性银行（Global Systemically Important Banks,GSIBs）包括美国、欧洲、日本、中国的大型银行30家,总资产逾47万亿美元,占全球银行业资产逾三分之一,可谓是全球银行业的缩影。所谓知己知彼,百战不殆,中国大型商业银行以提升国际化程度作为长远的发展目标,需要紧贴全球银行业的发展趋势,才能制定合适的战略。
文摘为深入研究大肠杆菌谷胱甘肽转运系统的蛋白质结构和功能,对该系统中的gsiB基因进行了克隆和表达条件的优化。根据大肠杆菌谷胱甘肽转运系统中底物结合蛋白gsiB基因序列,利用PCR方法扩增到该基因的编码区序列,利用SLIC(Sequence and ligation–independent cloning)方法直接将其插入pWaldo-GFPe中,成功构建了重组表达质粒pWaldo-GFP-GsiB。将重组质粒转化不同的大肠杆菌表达菌株进行诱导表达,通过改变培养温度和IPTG浓度等条件,得到了能够大量表达目标蛋白的重组子。结果表明:大肠杆菌BL21(DE3)是gsiB基因表达的最佳宿主菌;18℃低温诱导培养有利于gsiB基因的大量表达;0.1mmol/LIPTG足够诱导gsiB基因表达,增加IPTG浓度(0.1mmol/L～1.0mmol/L)并不能明显地促进gsiB基因的表达。Western blotting结果显示目标蛋白质有表达,其分子量大小与预期相符。
