曲美替尼与GSK2126458联合用药逆转结直肠癌SW480细胞的耐药

近年来,肿瘤靶向药物因其特异性强与对正常细胞损伤小等特点,已成为癌症治疗的热点药物。但由肿瘤异质性导致的靶向药物的耐受现象,成为癌症治疗需要解决的难题之一。为解决单一药物的耐受现象,可以通过药物组合来达到理想的治疗效果。本课题以结直肠癌为研究对象,评估8种结直肠癌细胞对30种靶向药物的敏感性,并筛选可逆转耐药的药物组合,探究药物组合的作用。通过MTT实验测定细胞存活率,计算IC50值进行敏感性分析,敏感标准为IC50值≤100 nmol/L。对敏感的单药进行组合筛选,选取细胞存活率最小的组合。采用流式细胞术和Western印迹检测联合用药对细胞凋亡及MAPK、PI3K通路相关蛋白质表达水平的影响。MTT结果显示,结直肠癌SW480细胞耐受30种肿瘤靶向药物,经联合用药筛选,SW480细胞对曲美替尼与GSK2126458组合最为敏感,与对照组和单药组相比,该组合可使SW480细胞凋亡明显增加。免疫印迹结果显示,ERK、Akt和mTOR磷酸化水平降低,Cleaved PARP表达增加。上述结果表明,8种结直肠癌细胞存在不同程度耐受靶向抑制剂的现象,曲美替尼与GSK2126458联合应用可逆转结直肠癌SW480细胞的耐药现象。

抗肿瘤候选药GSK2126458的合成研究

对GSK2126458文献的合成方法进行了改进,用丙二酸亚异丙酯(4)代替文献方法中的乙氧基亚甲基丙二酸二乙酯(7),缩短了两步合成了6-溴-4-羟基喹啉(6),6-溴-4-氯喹啉(12)先进行一次Sonagashira反应,再进行Diels-Alder反应合成了哒嗪环,避免了使用昂贵的4-哒嗪硼酸(14),节约了成本。最后suzuki偶联制备了GSK2126458(1),总收率为25.3%

PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂与TKI对AML小鼠的影响研究

目的观察GSK2126458联合尼洛替尼对急性髓细胞白血病(AML)小鼠细胞增殖、凋亡的影响,探讨磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/雷帕霉素靶体蛋白(mTOR)信号通路抑制剂与酪氨酸激酶抑制剂(TKI)对AML小鼠病情发生、发展的影响。方法成功造模40只AML小鼠模型,分为4组,每组各10只。其中GSK2126458组给予10 mg/kg GSK2126458治疗,尼洛替尼组给予75 mg/kg尼洛替尼治疗,GSK2126458联合尼洛替尼组(联合组)给予10 mg/kg GSK2126458和75 mg/kg尼洛替尼治疗,对照组给予等量生理盐水,均连续给药2周。检测各组细胞增殖、凋亡和原癌基因(c-myc)、生存素(survivin)mRNA表达水平。结果GSK2126458组、尼洛替尼组和联合组外周血和骨髓中白血病细胞的细胞增殖率明显低于对照组(P<0.05)。GSK2126458组、尼洛替尼组和联合组骨髓中细胞凋亡率明显高于对照组,且联合组骨髓中细胞凋亡率明显高于GSK2126458组和尼洛替尼组,差异有统计学意义(P<0.05)。GSK2126458组、尼洛替尼组和联合组骨髓中c-myc、survivin基因mRNA表达水平明显低于对照组,且联合组骨髓中c-myc、survivin基因mRNA表达水平明显低于GSK2126458组和尼洛替尼组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论GSK2126458联合尼洛替尼可降低AML小鼠c-myc和survivin表达水平,其通过抑制PI3K/mTOR活性进而抑制白血病细胞的增殖。