P-gp、GSTπ及TopoⅡ在胃癌中的表达及临床意义

目的 :探讨耐药基因蛋白P gp、GSTπ和TopoⅡ在胃癌中的表达及其临床意义。方法 :应用S P免疫组化法对 85例胃癌进行检测。结果 :胃癌组织P gp、GSTπ表达率分别为 37 6 5 %及 6 3 5 3% ,表达强度与临床分期有关 ,其中高分期者P gp表达较低分期者为高。TopoⅡ表达率为 5 5 2 9% ,阳性率与组织学分类相关 ,分化较低者 (5 9 5 7% )较分化较高者 (38 30 % )阳性率高。结论 :P gp、GSTπ、TopoⅡ的耐药机制各不相同 ,根据P gp、GSTπ和TopoⅡ表达情况进行药物选择对胃癌化疗具有重要的指导意义。

结直肠癌中错配修复基因表达与临床病理及Pgp、GSTπ、TopoⅡ、Ki-67表达的关系研究

目的：探讨结直肠癌错配修复基因（MLH1，PMS2，MSH2，MSH6）免疫组化表达特点及其与临床病理的关系，以及错配修复基因（MLH1，PMS2，MSH2，MSH6）与结直肠癌中P-糖蛋白（Pgp）、谷胱甘肽-S-转移酶（GSTπ）、DNA拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）、细胞增殖抗原Ki-67免疫组化表达关系。方法：回顾性分析2014年2月至2015年12月我院收治的93例结直肠癌患者的临床病理资料，采用免疫组织化学法，检测癌组织中错配修复基因（MLH1，PMS2，MSH2，MSH6）、Pgp、GSTπ、TopoⅡ、Ki-67的表达，分析其表达特点。采用多个样本率（或构成比）的比较（即：R×C表的χ2检验），分析结直肠癌错配修复基因（MLH1，PMS2，MSH2，MSH6）与临床病理的关系及其与Pgp、GSTπ、TopoⅡ、Ki-67免疫组化表达关系。利用Pearson相关分析法分析MLH1、PMS2、MSH2、MSH6与Ki-67表达相关性。结果：错配修复基因MLH1、PMS2、MSH2、MSH6表达缺失阳性率分别占14.0%、17.2%、10.8%、11.8%，Pgp（-）、Pgp （＋）、Pgp （＋＋）、Pgp （＋＋＋）表达率分别占3.2%、25.8%、51.6%、19.3%。GSTπ（-）、GSTπ（＋）、GSTπ（＋＋）、GSTπ（＋＋＋）表达率分别占3.3%、16.7%、56.7%、23.3%。TopoⅡ阴性表达及IV级表达未见，TopoⅡⅠ级、Ⅱ级、Ⅲ级表达率分别占19.3%、77.4%、3.2%。Ki-67表达＜10%（＋）、10-50%（＋）、＞50%（＋）分别占1.3%、25%、50%。错配修复基因MLH1、PMS2、MSH2、MSH6缺失表达与患者的性别、年龄、病理分化、TNM分期无统计学差异（P＞0.05）。MSH2缺失表达与发病部位无统计学差异（P＞0.05）。MLH1、PMS2、MSH6基因缺失表达与发病部位有一定差异性（P＜0.05），发生左半结肠的缺失表达阳性率分别为：10.7%、10.7%、7.1%，右半结肠缺失表达阳性率分别为28.6%、35.7%、25%，直肠缺失表达阳性率为5.4%、8.1%、5.4%。MLH1、PMS2、MSH2、MSH6缺失表达与Pgp、GSTπ、TopoⅡ的表达无统计学差异（P＞0.05）。MLH1、PMS2、MSH2、MSH6缺失表达与Ki-67表达有一定差异性（P＜0.05）， Ki-67＜10%（＋）的MLH1、PMS2、MSH2、MSH6缺失表达率为62.5%，Ki-6710%~50%（＋）的MLH1、PMS2、MSH2、MSH6缺失表达率分别为21.1%、0、10.5%、5.3%，Ki-67＞50%（＋）的MLH1、PMS2、MSH2、MSH6缺失表达率分别为6.1%、4.1%、8.2%、6.1%。MLH1、PMS2、MSH2、MSH6缺失表达与Ki-67表达呈负相关（相关系数分别为r=-0.969、r=-0.464、r=-0.143、r=-0.344， P＜0.05）。结论：错配修复基因MLH1、PMS2、MSH6基因缺失表达发生右半结肠几率相对较高，其次依次是左半结肠、直肠。MLH1、PMS2、MSH2、MSH6缺失表达与Ki-67表达呈负相关。

急性白血病P-170和GSTπ的表达及临床意义

用免疫细胞化学技术检测40例急性白血病患者P-170、GSTx的表达。结果:P-170阳性率为30％,初诊患者阳性率为26.7％,复发患者为50％,P-170阳性者CR率低,预后差;GST=阳性率为30％,初诊患者为20％,复发患者为75％,GSTx阳性者CR率低于阴性者:P-170和GST^t的表达在本组病例无相关性。

乳腺癌中医辨证分型与GSTπ、P53表达的相关性分析

目的探讨乳腺癌患者的中医辨证分型与GSTπ、P53表达的相关性。方法对乳腺癌患者106例进行术前中医辨证分型,术后进行病理组织学分类及GSTπ、P53的检测,并进行分析。结果乳腺癌患者术前辨证为血瘀证者GSTπ、P53的阳性率高于其他类型组,有显著差异(P<0.05)。结论乳腺癌中医辨证分型中血瘀证者GSTπ、P53的阳性率最高,预后差。

乳腺癌中医辨证分型与GSTπ表达的相关性分析

目的:探讨中医辨证分型与乳腺癌GSTπ表达的相关性。方法:根据中医辨证分型将80例乳腺癌患者分为血瘀证23例,肝郁证30例,脾虚证17例,肾阴虚证10例。采用免疫组化法测定不同中医类型及GSTπ表达。结果:血瘀证型乳腺癌患者GSTπ表达的阳性率为82.61%,肝郁证、脾虚证及肾阴虚证型乳腺癌患者GSTπ表达的阳性率分别为33.33%,64.71%及30.00%,血瘀证型GSTπ的阳性表达率明显高于其它类型组,经统计学处理有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌癌组织中GSTπ的表达与中医辨证有相关性,血瘀证者GSTπ表达的阳性率最高,预后差。

急性白血病患者GSTπ、TopoⅡα和p170表达及临床意义

目的 探讨急性白血病 (AL)患者谷胱甘肽 S 转移酶π(GSTπ) ,DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)及P糖蛋白(p170 )的表达及临床意义。方法 采用免疫组化S P法检测 94例AL患者白血病细胞中GSTπ、TopoⅡα和p170表达的阳性率。结果 GSTπ、TopoⅡα和 p170在ANLL中的初治组 (A组 )及复发或难治组 (B组 )中的阳性率分别为2 2 0 %、43 2 %、2 2 0 %及 5 0 0 %、5 0 0 %、46 7% ;三者在ALLA组及B组的阳性率分别为 4 3%、0、18 2 %及30 0 %、18 2 %、30 0 %。GSTл阳性、TopoⅡα阴性、p170阳性AL患者完全缓解率 (CR)与GSTπ阴性、TopoⅡα阳性、p170阴性的CR率分别为 2 5 0 %、75 0 %、38 5 %及81 8%、37 5 %、84 2 %。除TopoⅡα外 ,耐药因子阳性患者的CR率低于阴性患者 (P <0 0 1及 0 0 5 )。相关分析显示GSTπ与p170之间密切正相关 (r =0 6 4,P <0 0 1)。结论 GSTπ、p170过度表达与AL患者的化疗疗效及预后密切相关 ,且GSTπ与 p170过度表达密切正相关。

P-gp、TopoⅡ、GSTπ在胃癌中的表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中耐药基因P-糖蛋白（P-gP）、DNA拓扑异构酶（Topo）Ⅱ和谷胱甘肽转移酶（GST）π的表达以及与胃癌组织学类型、临床分期、淋巴结转移的关系及临床意义。方法用S-P免疫组化二步法对216例胃癌手术标本进行检测。结果胃癌组织中P-gP、TopoⅡ、GSTπ阳性表达率分别为56.90％、56.90％、60.20％，p-gP表达与胃癌组织学类型和临床分期有关（均P〈0.05）；TopoⅡ表达与胃癌组织学类型、临床分期、淋巴结转移有关（均P〈0.05）；GSTπ表达与临床分期有关（P〈0.05）。结论P-gP、TopoⅡ、GSTπ在胃癌原发性多药耐药中起重要作用。联合检测P-gP、TopoⅡ、GSTπ对于胃癌化疗方案选择具有一定的指导意义。

p170、GSTπ、ToPoⅡ在肺癌中的表达及其临床意义

化学治疗是肿瘤综合性治疗的重要措施之一,然而经过化学治疗的病人仍有复发、转移的可能,这就使人们认识了瘤细胞在药物环境中的存活和生长能力与它的多药耐药性密切相关.为了解肺癌中多药耐药基因及其蛋白产物的表达情况,指导临床治疗,我们应用S-P微波免疫组化法检测32例肺癌中p170(糖蛋白)GSTπ(谷胱甘肽转移酶)ToPoⅡ(脱普异构酶)的表达情况,并探讨其临床意义.

氧化应激蛋白GSTπ及HO-1在烟草相关口腔癌中的表达

目的检测吸烟与非吸烟者口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中氧化应激蛋白GSTπ、HO-1及核转录因子NF-κB的表达,初步探讨烟草在口腔癌中的作用机制。方法随机选取40例OSCC福尔马林固定组织标本、20例OSCC新鲜组织标本以及10例正常口腔黏膜标本。采用免疫组织化学染色和荧光定量PCR方法,检测氧化应激蛋白GSTπ、HO-1及核转录因子NF-κB在吸烟与非吸烟者OSCC组织中的表达。结果 OSCC组织中GSTπ、HO-1和NF-κB表达均显著高于正常口腔黏膜(P<0.05)。吸烟者OSCC组织中GSTπ、HO-1、NF-κB表达高于非吸烟者(P<0.05)。结论氧化应激蛋白GSTπ、HO-1与烟草相关口腔癌的发生发展密切相关,烟草可能是通过激活核转录因子NF-κB,调控其下游抗氧化基因GSTπ、HO-1表达发挥抗氧化作用的。

肿瘤中GST活性及GSTπ基因表达的研究

通过测定肿瘤中ＧＳＴ活性和以杂交方法检测肿瘤中ＧＳＴπｍＲＮＡ含量，结果表明：５６例肿瘤组织与癌旁组织比较，胃癌、肺癌、结肠癌、直肠癌、乳腺癌ＧＳＴ活性增高分别为１．１，１．１５，１．２６，１．０６，３．８４倍（Ｐ＜０．０５），膀胱癌与白血病细胞无增高。基因杂交方法检测肿瘤中ＧＳＴ辽ｍＲＮＡ含量，胃癌、肺癌。结肠癌、直肠癌、乳腺癌、膀胱癌、白血病细胞分别为１．８１，２．５５，２．４，１．５，４．８７，１．２，１．３１倍（Ｐ＜０．０５），阳性率分别为６０％，５０％，５０％，６０％，６４２％，６２．５％，５Ｏ％。基因杂交检测ＧＳＴπ方法优于ＧＳＴ活性测定。

病毒包装细胞PA317/HGSTπ的建立

目的 建立产逆转录病毒的PA31 7/HGSTπ细胞株 ,为进一步把耐药基因GSTπ导入造血干细胞以逆转卵巢癌化疗药物对骨髓的毒副作用的研究奠定基础。方法 用限制性内切酶HpaⅠ、BamhⅠ分别双酶切质粒 pLXSH GSTπ和pLXSN ,回收GSTπ小片段和 pLXSN大片段 ,在T4连接酶的作用下 ,构建重组逆转录病毒质粒pLXSN GSTπ ;酶切鉴定后用脂质体转染PA31 7包装细胞 ,G4 1 8筛选获得抗性克隆 ,用Hela细胞测定病毒滴度。结果 (1 )酶切证实pLXSN GSTπ和 pLXSH GSTπ的目的片段完全一致 ,表明重组质粒构建成功 ;(2 )G4 1 8筛选获得多个抗性克隆 ,Hela测定病毒滴度最高为 2 .2× 1 0 3 CFU/ml。结论 本研究成功建立了产病毒包装细胞株PA31 7/HGSTπ ,该细胞株能产生含有耐药基因GSTπ的逆转录病毒 。

急性白血病P-gp和GSTπ的表达及临床意义

目的 :探讨初诊急性白血病 (AL)耐药机制。方法 :应用免疫酶法 (APAAP)检测 74例初诊急性白血病 (AL)P gp、GSTπ的表达及临床意义。 结果 :急性髓性白血病 (AML)患者P gp阳性率 2 1% ,GSTπ阳性率2 7% ,两者均阳性 13% ;急性淋巴白血病 (ALL)患者P gp阳性率 14% ,GSTπ阳性率 5 0 % ,两者均阳性 9%。无论是AML还是ALL两者均无相关性。P gp和GSTπ均阳性者完全缓解 (CR)明显低于均阴性者 (P <0 .0 5 )。结论 :P gP。

GSTπ在膀胱移行细胞癌中的表达和意义

目的 :探讨谷胱甘肽转移酶π(glutathiones -transferaseπ ,GST -π)的表达与膀胱癌生物学行为的关系。方法 :采用免疫组化方法对 80例膀胱癌组织中GST -π进行观察。结果 :GST -π总阳性率为 6 6 .2 5 % (5 3/80 ) ,在I级阳性率为 4 5 .4 5 % (10 /2 2 ) ,II级中阳性率为71.4 3% (2 5 /35 ) ,III级中阳性率为 78.2 6 % (18/2 3)。结论 :GST -π的高表达与膀胱癌的病理分级有关 ,且可能与肿瘤的耐药有关。

急性淋巴细胞白血病患者GSTπ、P170表达及临床意义

目的检测急性淋巴细胞白血病(ALL)患者白血病细胞中谷胱甘肽-S-转移酶π(GSTπ)及P170的表达,探讨其与ALL患者临床特征的关系。方法应用免疫细胞化学(ABC)法检测43例ALL患者白血病细胞中GSTπ及P170蛋白表达状况。结果ALL患者GSTπ的阳性率32·5%。复发组ALL患者GSTπ表达显著高于初发ALL(47·4%vs20·8%,P<0·05);GSTπ阳性组ALL患者完全缓解(CR)率显著低于GSTπ阴性组(7·1%vs70·0%,P<0·01)。GSTπ与P170双阳性组CR率显著低于单纯P170/GSTπ阳性患者、GSTπ和P170双阴性组(P<0·001)。结论ALL患者中GSTπ表达可能与患者对化疗耐药及疗效密切相关;GSTπ与P170双阳性可能对化疗疗效和预后判断更有参考价值。

乳腺浸润性导管癌中PS2和GSTπ的表达及临床意义

目的 了解乳腺浸润性导管癌中雌激素调节蛋白 (PS2 )和谷胱甘肽S 转移酶π(GSTπ)的表达及其对预后和治疗的指导作用。方法 用标记的链亲和素生物素 (LSAB)免疫组化法对 2 10例乳腺浸润性导管癌患者的石蜡标本进行PS2和GSTπ的检测。结果 PS2的表达阳性率为 4 9.5 % ,GSTπ的表达阳性率为 4 8.1%。术后 5年和 10年生存率从高到低依次为PS2表达阳性 /GSTπ表达阴性组、PS2表达阳性 /GSTπ表达阳性组、PS2表达阴性 /GSTπ表达阴性组和PS2表达阴性 /GSTπ表达阳性组。结论 PS2表达阳性 /GSTπ表达阴性组患者的预后最好 ,PS2表达阳性 /GSTπ表达阳性组和PS2表达阴性 /GSTπ表达阳性组患者的预后次之 ,PS2表达阴性 /GSTπ表达阳性组患者的预后最差。因此 ,在临床中应根据患者的情况合理应用内分泌治疗和化疗。

阿霉素对人胃癌细胞GSTπ表达的影响

目的:探讨阿霉素对人胃癌细胞的杀伤作用及致GSTπ表达的变化。方法:利用人胃癌BGC-823细胞株,CO2培养箱进行培养过程中,加入阿霉素注射液继续培养5h或10h。然后用HE和免疫组化染色。光镜下观察并进行图象分析。结果:实验组BGC-823细胞变形,GSTπ表达位置和灰度有明显变化。结论:阿霉素作用5h可对胃癌细胞有杀伤作用,使胃癌细胞形态和GST基因表达有明显变化。

依他尼酸衍生物的合成及其抑制GSTπ活性研究

目的设计合成EA衍生物,并对其抑制GST活性进行研究。方法以取代苯酚为原料,经成醚反应、Friedel-Crafts酰基化反应、羟醛缩合反应合成目标化合物;并用人急性早幼粒白血病HL-60细胞株裂解液测定目标化合物对GST的抑制活性。结果合成了15个EA衍生物,其结构经IR、MS和1H-NMR谱确证;体外活性实验表明,化合物N-4、N-5、N-6、N-7有较高的抑酶活性。结论EA衍生物对GST具有良好的抑制活性,值得深入研究。

芥菜BjGSTF12基因克隆及表达分析

为了探究谷胱甘肽转移酶编码基因(GST)在芥菜花青素积累中的作用,该文以紫薹-绿薹芥菜近等位基因系为材料,克隆到1个花青素积累相关的GST基因,命名为BjGSTF12。该文对BjGSTF12编码蛋白及其启动子进行生物信息学分析,并分析其在绿薹、紫薹芥菜中的表达水平及其与花青素含量的关系。结果表明:(1)BjGSTF12的基因组和cDNA全长分别为808、651 bp,编码216个氨基酸,具有GST_N端和GST_C端保守结构域。然而,绿薹、紫薹芥菜BjGSTF12序列无区别。(2)BjGSTF12与拟南芥AtGSTF12亲缘关系最近,同属于φ亚家族。(3)2个芥菜品系BjGSTF12启动子序列存在4处碱基突变/插入,但二者顺式作用元件种类与数目相同,均含9个MYB结合位点、1个赤霉素响应元件、3个非生物胁迫响应元件。(4)紫薹芥菜花青素含量显著高于绿薹芥菜,BjGSTF12表达水平与花青素含量表现出类似变化规律。(5)互作蛋白网络分析表明,BjGSTF12与花青素合成关键酶、糖基化修饰、转运蛋白等蛋白存在互作。综上认为,BjGSTF12在芥菜薹茎花青素积累中可能发挥重要作用,BjGSTF12可能通过互作蛋白调控芥菜花青素合成、修饰、转运从而影响花青素积累。该文对深入研究GST在芥菜薹茎花青素积累的功能及作用机制奠定了一定理论基础。