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GSTθ高表达抑制宫颈癌HeLa细胞的生长和增加放射敏感性
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作者 乔惠萍 徐加英 +1 位作者 焦旸 樊赛军 《中国医药指南》 2008年第23期239-243,共5页
目的了解增加GSTθ表达水平对人类宫颈癌HeLa细胞生长,细胞周期和放疗敏感性的影响。方法通过脂质体LipofectAMINE将pcDNA3-GSTθ真核质粒载体转染获得高GSTθ表达水平的HeLa稳定转染细胞;采用RT-PCR和Western蛋白免疫印迹法检测分别检... 目的了解增加GSTθ表达水平对人类宫颈癌HeLa细胞生长,细胞周期和放疗敏感性的影响。方法通过脂质体LipofectAMINE将pcDNA3-GSTθ真核质粒载体转染获得高GSTθ表达水平的HeLa稳定转染细胞;采用RT-PCR和Western蛋白免疫印迹法检测分别检测GSTθ mRNA和蛋白的表达水平;采用细胞记数和MTT法测定细胞的生长;采用流式细胞仪分析细胞周期的变化。结果GSTθ高水平表达显著地延缓和降低HeLa细胞的生长,并导致G2/M期的阻滞。GSTθ水平提高也增加了细胞对培养基中血清和生长因子的依赖性。另外,GSTθ高水平的表达增加了HeLa细胞对电离辐射的敏感性。结论我们首次证实在HeLa细胞,GSTθ高水平表达可以引起细胞周期阻滞,延缓和降低细胞生长和增加细胞的放射敏感性。这些实验结果将为GSTθ作为一新的靶基因在宫颈癌治疗中的作用提供了实验基础和依据。 展开更多
关键词 gstθ HELA细胞 细胞生长 细胞周期 放射敏感性
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GSTθ转染对宫颈癌HeLa细胞侵袭性的影响
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作者 乔惠萍 李启民 陈鹏 《中外医疗》 2011年第34期27-28,30,共3页
目的 了解增加GSTθ表达水平对人类宫颈癌HeLa细胞生长及侵袭能力的影响。方法 通过脂质体将pcDNA3-GSTθ真核质粒载体转染获得高GSTθ表达水平的HeLa稳定转染细胞;采用RT-PCR检测GSTθmRNA的表达水平;采用细胞记数和MTT法测定细胞的... 目的 了解增加GSTθ表达水平对人类宫颈癌HeLa细胞生长及侵袭能力的影响。方法 通过脂质体将pcDNA3-GSTθ真核质粒载体转染获得高GSTθ表达水平的HeLa稳定转染细胞;采用RT-PCR检测GSTθmRNA的表达水平;采用细胞记数和MTT法测定细胞的生长;采用划痕拍照方法观察细胞侵袭能力的改变。结果 GSTθ高水平表达显著地延缓和降低HeLa细胞的生长,并使HeLa细胞的侵袭能力下降。结论 GSTθ高水平表达可以延缓和降低细胞生长并降低HeLa细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 gstθ HELA细胞 细胞生长 侵袭
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芥菜BjGSTF12基因克隆及表达分析
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作者 朱云娜 陈凤梅 +4 位作者 李芷娴 王斌 冯慧敏 胡芳 李海渤 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期267-280,共14页
为了探究谷胱甘肽转移酶编码基因(GST)在芥菜花青素积累中的作用,该文以紫薹-绿薹芥菜近等位基因系为材料,克隆到1个花青素积累相关的GST基因,命名为BjGSTF12。该文对BjGSTF12编码蛋白及其启动子进行生物信息学分析,并分析其在绿薹、紫... 为了探究谷胱甘肽转移酶编码基因(GST)在芥菜花青素积累中的作用,该文以紫薹-绿薹芥菜近等位基因系为材料,克隆到1个花青素积累相关的GST基因,命名为BjGSTF12。该文对BjGSTF12编码蛋白及其启动子进行生物信息学分析,并分析其在绿薹、紫薹芥菜中的表达水平及其与花青素含量的关系。结果表明:(1)BjGSTF12的基因组和cDNA全长分别为808、651 bp,编码216个氨基酸,具有GST_N端和GST_C端保守结构域。然而,绿薹、紫薹芥菜BjGSTF12序列无区别。(2)BjGSTF12与拟南芥AtGSTF12亲缘关系最近,同属于φ亚家族。(3)2个芥菜品系BjGSTF12启动子序列存在4处碱基突变/插入,但二者顺式作用元件种类与数目相同,均含9个MYB结合位点、1个赤霉素响应元件、3个非生物胁迫响应元件。(4)紫薹芥菜花青素含量显著高于绿薹芥菜,BjGSTF12表达水平与花青素含量表现出类似变化规律。(5)互作蛋白网络分析表明,BjGSTF12与花青素合成关键酶、糖基化修饰、转运蛋白等蛋白存在互作。综上认为,BjGSTF12在芥菜薹茎花青素积累中可能发挥重要作用,BjGSTF12可能通过互作蛋白调控芥菜花青素合成、修饰、转运从而影响花青素积累。该文对深入研究GST在芥菜薹茎花青素积累的功能及作用机制奠定了一定理论基础。 展开更多
关键词 芥菜 gst 生物信息学分析 表达分析 花青素积累
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GST family genes in jujube actively respond to phytoplasma infection
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作者 Qipeng Wang Liman Zhang +5 位作者 Chaoling Xue Yao Zhang Xiangrui Meng Zhiguo Liu Mengjun Liu Jin Zhao 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CAS CSCD 2024年第1期77-90,共14页
Jujube witches’broom(JWB)caused by phytoplasma has a severely negative effect on multiple metabolisms in jujube.The GST gene family in plants participates in the regulation of a variety of biotic and abiotic stresses... Jujube witches’broom(JWB)caused by phytoplasma has a severely negative effect on multiple metabolisms in jujube.The GST gene family in plants participates in the regulation of a variety of biotic and abiotic stresses.This study aims to identify and reveal the changes in the jujube GST gene family in response to phytoplasma infection.Here,70 ZjGSTs were identified in the jujube genome and divided into 8 classes.Among them,the Tau-class,including 44 genes,was the largest.Phylogenetic analysis indicated that Tau-class genes were highly conserved among species,such as Arabidopsis,cotton,chickpea,and rice.Through chromosome location analysis,37.1%of genes were clustered,and 8 of 9 gene clusters were composed of Tau class members.Through RT-PCR,qRT-PCR and enzyme activity detection,the results showed that the expression of half(20/40)of the tested ZjGSTs was inhibited by phytoplasma infection in field and tissue culture conditions,and GST activity was also significantly reduced.In the resistant and susceptible varieties under phytoplasma infection,ZjGSTU49-ZjGSTU54 in the cluster IV showed opposite expression patterns,which may be due to functional divergence during evolution.Some upregulated genes(ZjGSTU45,ZjGSTU49,ZjGSTU59,and ZjGSTU70)might be involved in the process of jujube against JWB.The yeast two-hybrid results showed that all 6 Tauclass proteins tested could form homodimers or heterodimers.Overall,the comprehensive analysis of the jujube GST gene family revealed that ZjGSTs responded actively to phytoplasma infection.Furthermore,some screened genes(ZjGSTU24,ZjGSTU49-52,ZjGSTU70,and ZjDHAR10)will contribute to further functional studies of jujube-phytoplasma interactions. 展开更多
关键词 Chinese jujube gst gene Family PHYTOPLASMA Gene cluster EXPRESSION Protein interaction
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冷胁迫下甘蓝型冬油菜表达蛋白及BnGSTs基因家族的鉴定与分析 被引量:1
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作者 马骊 白静 +10 位作者 赵玉红 孙柏林 侯献飞 方彦 王旺田 蒲媛媛 刘丽君 徐佳 陶肖蕾 孙万仓 武军艳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期153-166,共14页
谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferases, GST)参与调节植物生长、发育和逆境胁迫反应的许多方面。本研究利用双向电泳和质谱技术分析‘16VHNTS309’在冷胁迫下差异表达的蛋白质,基于GO和KEGG分析鉴定出BE、APX、SOD、GST等参与... 谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferases, GST)参与调节植物生长、发育和逆境胁迫反应的许多方面。本研究利用双向电泳和质谱技术分析‘16VHNTS309’在冷胁迫下差异表达的蛋白质,基于GO和KEGG分析鉴定出BE、APX、SOD、GST等参与冷胁迫反应的蛋白质。利用q RT-PCR和生理指标鉴定到响应冷胁迫的关键蛋白质GST,采用同源克隆法克隆到‘16VHNTS309’的GST基因。该基因CDS长度为642bp,编码213个氨基酸,是一个不稳定蛋白,属于GST_N_3谷胱甘肽S-转移酶家族,与甘蓝型油菜‘ZS11’序列相似性为99.22%,与‘ZS11’和‘Vision’两者的氨基酸序列相比较发现第127位亮氨酸(L)突变为脯氨酸(P)。基因家族分析表明,在甘蓝型油菜中共鉴定到153个Bn GSTs成员,按其功能主要分为Zeta、Phi、Theta、CHQ、DHAR、Lambda和Tau这七大类型,大部分的Bn GSTs属于Phi和Tau这2种类型。系统进化将Bn GSTs分为12个亚家族,亚家族Ⅰ和Ⅷ包含了较多的成员,Bn GSTs不均匀的分布在18条染色体上, C06染色体上分布Bn GSTs基因数量最多,含有10个保守的蛋白质基序。Bn GSTs基因家族中有99对基因存在共线性关系, 131个基因来自基因复制事件,片段重复事件在Bn GSTs基因的进化中起着重要作用。冷胁迫下Bna A02g35760D、Bna C06g20450D、Bna C06g35490D、Bna A02g03230D和Bna A02g35980D在强抗寒品种中的显著高表达,是弱抗寒品种的7~12倍,并且强抗寒品种具有较高的生理酶活性。另外,在冷冻胁迫下鉴定到一些瞬时和持续表达的关键候选基因。这些结果为进一步研究Bn GSTs基因在强抗寒甘蓝型冬油菜抗寒分子调控中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 甘蓝型冬油菜 冷胁迫 蛋白质谱 gst基因家族 表达模式
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拟南芥AtGST8的功能及其过表达植株对甲基紫精胁迫的响应
6
作者 王玲娟 鲁帅 +4 位作者 高聪 韩缤莹 赵成磊 薛鹏辉 曹云英 《南通大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第1期44-53,共10页
谷胱甘肽S-转移酶(GST)可催化还原型谷胱甘肽(GSH)与底物连接,形成水溶性产物。植物受到胁迫时,GST会诱导表达,保护植物免受伤害,对植物抗逆起到重要作用。文章研究分析了拟南芥AtGST8的定位、表达及其过表达植株对甲基紫精(MV)胁迫的... 谷胱甘肽S-转移酶(GST)可催化还原型谷胱甘肽(GSH)与底物连接,形成水溶性产物。植物受到胁迫时,GST会诱导表达,保护植物免受伤害,对植物抗逆起到重要作用。文章研究分析了拟南芥AtGST8的定位、表达及其过表达植株对甲基紫精(MV)胁迫的响应。结果表明:AtGST8定位在细胞膜。除种子和胚外,AtGST8在其余器官中均有表达,在莲座叶中表达较弱,而在花和果荚中的表达与生育进程有关。在果荚中表达量最高,叶中表达量最低。MV显著提高了所有供试材料幼苗中丙二醛(MDA)和抗坏血酸(AsA)含量,诱导超氧阴离子(O_(2)·^(-))的产生,过表达AtGST8植株的MDA和O_(2)·^(-)的增幅小于野生型,AsA则相反。MV处理明显降低了野生型中的还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)水平,在过表达AtGST8植株中的变化则不明显;MV处理显著增加了所有供试材料中氧化胁迫保护酶(超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX))的活性;过表达AtGST8植株中GSH过氧化物酶(GSH-Px)和GST活性明显增大,而野生型变化不明显;MV处理的保护酶相关基因(SAPX、PRX34、CAT1、GST8)的表达水平与酶活表现一致。过表达AtGST8植株遭受MV胁迫后能够维持较高的AsA含量、GSH/GSSG水平、抗氧化酶活性及转录水平,从而及时清除体内的活性氧以减轻MV胁迫对植物的伤害。 展开更多
关键词 亚细胞定位 组织表达 gst8基因 甲基紫精 活性氧
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响应槲皮素诱导的美国白蛾GST基因鉴定及表达分析
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作者 孟香 潘忠玉 陈敏 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期110-118,共9页
【目的】谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)是昆虫体内一种重要的解毒酶,在植食性昆虫对植物次生物质的解毒适应中发挥重要作用。本研究筛选和鉴定了美国白蛾中肠响应槲皮素诱导的GST基因,分析了槲皮素对GST基因的诱导表达模式,为阐明美国白蛾GST... 【目的】谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)是昆虫体内一种重要的解毒酶,在植食性昆虫对植物次生物质的解毒适应中发挥重要作用。本研究筛选和鉴定了美国白蛾中肠响应槲皮素诱导的GST基因,分析了槲皮素对GST基因的诱导表达模式,为阐明美国白蛾GST基因在解毒代谢槲皮素中的功能奠定基础。【方法】基于槲皮素诱导的美国白蛾中肠转录组,筛选和鉴定响应槲皮素诱导的GST基因;通过构建系统发育树分析GST基因的家族类别;采用实时荧光定量PCR技术研究槲皮素对GST基因诱导的剂量效应和时间效应。【结果】鉴定了美国白蛾响应槲皮素诱导的6个GST基因;系统发育分析显示HcGST-E1、HcGST-E2、HcGST-E3属于GSTEpsilon家族,HcGST-S1、HcGST-S2属于GSTSigma家族,HcGST-O1属于GST Omega家族。不同质量分数槲皮素对GST基因的诱导作用不同,本实验质量分数(0.5%、1.0%、2.0%、4.0%)的槲皮素均能诱导HcGST-E1表达水平显著上调,0.5%、1.0%和2.0%的槲皮素诱导HcGST-E3表达水平显著升高;0.5%的槲皮素诱导HcGST-O1的表达水平显著增加。本实验质量分数的槲皮素均诱导HcGST-S1显著下调表达;0.5%和1.0%的槲皮素诱导HcGST-S2的表达水平显著下调。3个上调GST基因均在24 h或36 h内显著上调表达响应槲皮素的诱导。【结论】槲皮素能显著诱导美国白蛾中肠6个GST基因的表达水平,但对不同基因诱导的表达模式不同。HcGST-E1、HcGST-E3和HcGST-O1显著上调表达响应不同质量分数槲皮素的诱导,推测这3个基因是参与美国白蛾解毒代谢槲皮素的关键基因。 展开更多
关键词 美国白蛾 gst基因 槲皮素 诱导 转录表达
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星豹蛛两个GST基因克隆、鉴定及其对溴氰菊酯胁迫的响应表达
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作者 焦丽亚琳 赵萌萌 +3 位作者 王美 牛越 王西 李锐 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1161-1170,共10页
【目的】为明确星豹蛛Pardosa astrigera体内2个谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferases,GSTs)基因的时空表达模式,并探究其是否能对溴氰菊酯的胁迫做出响应。【方法】基于星豹蛛转录组数据库,PCR克隆星豹蛛GST基因PaGSTd1和PaGS... 【目的】为明确星豹蛛Pardosa astrigera体内2个谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferases,GSTs)基因的时空表达模式,并探究其是否能对溴氰菊酯的胁迫做出响应。【方法】基于星豹蛛转录组数据库,PCR克隆星豹蛛GST基因PaGSTd1和PaGSTd2全长cDNA序列并进行生物信息学分析;利用RT-qPCR检测PaGSTd1和PaGSTd2在星豹蛛不同发育阶段(2-6龄若蛛和成蛛)、雌雄成蛛不同组织(头胸部、腹和足)以及通过药膜法利用不同浓度[LC 10(5.151 mg/L),LC 30(8.619 mg/L)和LC 50(12.311 mg/L)]溴氰菊酯胁迫不同时间(6,12,18,24和48 h)雄成蛛中的表达量。【结果】星豹蛛PaGSTd1(GenBank登录号:OR096398)全长cDNA序列长708 bp,开放阅读框长645 bp,编码214个氨基酸;星豹蛛PaGSTd2(GenBank登录号:OR096399)全长cDNA序列长793 bp,开放阅读框长645 bp,编码214个氨基酸。RT-qPCR检测结果表明,PaGSTd1和PaGSTd2在星豹蛛不同发育阶段和成蛛不同组织都有表达,均在5龄若蛛中的表达量最低;PaGSTd1在4龄若蛛中的表达量最高,PaGSTd2在成蛛中的表达量最高;PaGSTd1和PaGSTd2在足中的表达量最高,在除腹部外的其他组织中表达量均为雄成蛛的显著高于雌成蛛的。LC 10溴氰菊酯胁迫24 h时星豹蛛雄成蛛中PaGSTd1被诱导表达,6和18 h时PaGSTd2被诱导表达;LC 30溴氰菊酯胁迫18,24和48 h时雄成蛛中PaGSTd1被诱导表达,18 h时PaGSTd2被诱导表达;LC 50溴氰菊酯胁迫24 h时雄成蛛中PaGSTd1和PaGSTd2被诱导表达。【结论】本研究克隆得到星豹蛛两个GST基因PaGSTd1和PaGSTd2,均在星豹蛛足中表达量最高,说明足中这2个GST基因在对外源物质的解毒起到重要作用;这两个GST基因可以被溴氰菊酯诱导表达,说明可能参与星豹蛛对溴氰菊酯的胁迫响应,为后续GSTs的功能研究提供线索。 展开更多
关键词 星豹蛛 谷胱甘肽S-转移酶(gst) 溴氰菊酯 基因表达
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全球首座GST陆上薄膜型全容罐交付运营
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作者 曾妍 《天然气与石油》 2023年第2期105-105,共1页
2023年2月23日,全球首座GST陆上薄膜型全容罐项目--河北河间LNG调峰储备库在上海完成运营交接,正式交付运营。该项目由华港燃气集团出资,工程建设公司华北分公司EPC总承包建设。项目自2022年10月15日进液试运行以来,已平稳运行超百天,... 2023年2月23日,全球首座GST陆上薄膜型全容罐项目--河北河间LNG调峰储备库在上海完成运营交接,正式交付运营。该项目由华港燃气集团出资,工程建设公司华北分公司EPC总承包建设。项目自2022年10月15日进液试运行以来,已平稳运行超百天,每日气化规模达100多万立方米,对优化京津冀地区天然气储备库整体布局,助力国家“双碳”目标实现具有重要意义。 展开更多
关键词 工程建设公司 燃气集团 EPC总承包 薄膜型 储备库 整体布局 京津冀地区 gst
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二氯异氰尿酸钠胁迫下菲牛蛭GST基因分子克隆及表达规律研究
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作者 周维海 李焕华 王重阳 《水产研究》 2023年第4期167-175,共9页
谷胱甘肽转移酶(GST)是一种重要的解毒酶,在抗氧化和细胞解毒中起着重要作用。二氯异氰尿酸钠属于含氯消毒剂,常用于养殖行业、自来水、医院等杀灭细菌。为了研究菲牛蛭GST基因在应对二氯异氰尿酸钠胁迫中的作用,本研究对菲牛蛭GST基因... 谷胱甘肽转移酶(GST)是一种重要的解毒酶,在抗氧化和细胞解毒中起着重要作用。二氯异氰尿酸钠属于含氯消毒剂,常用于养殖行业、自来水、医院等杀灭细菌。为了研究菲牛蛭GST基因在应对二氯异氰尿酸钠胁迫中的作用,本研究对菲牛蛭GST基因进行了克隆和表达规律研究。结果表明,菲牛蛭GST基因编码区全长是654 bp,编辑217个氨基酸,其蛋白质序列与红鲍螺,红鲍,绿叶海蛞蝓,角突臂围轮虫,紫贻贝相应序列相似性分别为97%,97%,97%,96%,96%。实时荧光定量PCR结果显示GST基因在胁迫后表达量先下降后升高,在12 h表达量达到最低,48 h表达量最高,是12 h表达量的93倍。研究结果显示菲牛蛭GST基因参与了二氯异氰尿酸钠胁迫的解毒过程,为今后菲牛蛭人工养殖过程中含氯消毒剂的合理使用,及解析GST在生物体内排毒机制提供了参考。 展开更多
关键词 菲牛蛭 gst 二氯异氰尿酸钠
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长足大竹象信息素结合蛋白CbuqPBP2互作蛋白的筛选与验证
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作者 杨桦 李祥乾 +2 位作者 王帆 方睿 杨伟 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2024年第1期87-97,共11页
【目的】筛选长足大竹象(Cyrtotrachelus buqueti)信息素结合蛋白CbuqPBP2的互作蛋白,为实现利用信息物质对长足大竹象种群持续控制提供参考。【方法】利用GST pull-down联合质谱技术,对长足大竹象信息素结合蛋白CbuqPBP2的互作蛋白进... 【目的】筛选长足大竹象(Cyrtotrachelus buqueti)信息素结合蛋白CbuqPBP2的互作蛋白,为实现利用信息物质对长足大竹象种群持续控制提供参考。【方法】利用GST pull-down联合质谱技术,对长足大竹象信息素结合蛋白CbuqPBP2的互作蛋白进行筛选、鉴定和分析,并采用酵母双杂交试验验证了CbuqPBP2与信息素结合蛋白CbuqPBP1的特异性互作。【结果】GST pull-down共筛选出45个与长足大竹象信息素结合蛋白CbuqPBP2特异性结合的候选互作蛋白,包括CbuqPBP1、ND2、CYTB。这些互作蛋白主要参与细胞过程、定位、代谢过程、应激反应以及生物调控等多个生物学过程。使用酵母双杂交体系,构建了pGADT7-PBP1重组猎物质粒与pGBKT7-PBP2重组诱饵质粒,通过诱饵质粒毒性检测和自激活检测,表明重组诱饵质粒对Y2HGold酵母菌无毒性作用。共转化验证结果显示,诱饵质粒pGBKT7-PBP2共转化酵母菌株能够在TDO培养基上生长。【结论】CbuqPBP2和CbuqPBP1之间有相互作用,不同信息素结合蛋白间的互作对深入理解长足大竹象嗅觉感受机制提供了新的思路。 展开更多
关键词 长足大竹象 信息素结合蛋白 蛋白互作 酵母双杂交 gst pull-down
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GSTθ转染对HCT116细胞系的影响
12
作者 乔惠萍 焦旸 +1 位作者 徐加英 樊赛军 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第1期7-10,共4页
目的观察转染了GSTθ后HCT116细胞系的生长、细胞周期的变化,以及HCT116细胞系生长对血清浓度的依赖性。方法通过脂质体Lipofectamine将质粒载体pcDNA3及pcDNA3-GSTθ分别转染HCT116细胞获得稳定转染株,通过RT-PCR检测GSTθ的表达,细胞... 目的观察转染了GSTθ后HCT116细胞系的生长、细胞周期的变化,以及HCT116细胞系生长对血清浓度的依赖性。方法通过脂质体Lipofectamine将质粒载体pcDNA3及pcDNA3-GSTθ分别转染HCT116细胞获得稳定转染株,通过RT-PCR检测GSTθ的表达,细胞计数绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期变化,MTT法检测细胞生长对血清浓度的依赖。结果GSTθ转染后抑制了HCT116细胞的生长,并且是通过G2/M和S期阻滞而导致的,GSTθ还增加了HCT116细胞对血清的依赖性。结论GSTθ可降低HCT116细胞的恶性程度,使其对血清及营养物质的需求增加。 展开更多
关键词 gstθ HCT116细胞 细胞生长曲线 细胞周期 转染
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GSTθ高表达对肝癌7721细胞的生长及侵袭性的影响
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作者 乔惠萍 李启民 王英 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 2012年第1期23-25,88,共4页
目的探讨增加GSTθ表达水平对人类肝癌7721细胞生长及侵袭能力的影响。方法通过脂质体Lipo-fectAMINE将pcDNA3-GSTθ真核质粒载体转染获得高GSTθ表达水平的7721稳定转染细胞;采用RT-PCR检测GSTθmRNA的表达水平;采用细胞记数法测定细... 目的探讨增加GSTθ表达水平对人类肝癌7721细胞生长及侵袭能力的影响。方法通过脂质体Lipo-fectAMINE将pcDNA3-GSTθ真核质粒载体转染获得高GSTθ表达水平的7721稳定转染细胞;采用RT-PCR检测GSTθmRNA的表达水平;采用细胞记数法测定细胞的生长;采用Boyden小室方法观察细胞侵袭能力的改变。结果 GSTθ高水平表达对7721细胞的生长无明显影响,但使7721细胞的侵袭能力下降。结论本实验证实了在7721细胞中,GSTθ高水平表达可以降低细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 gstθ 7721细胞 细胞生长 侵袭
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壬基酚对牙鲆肝脏EROD和GST酶活性的影响 被引量:17
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作者 丁秀蓉 李正炎 +1 位作者 王波 傅明珠 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第S1期101-104,100,共5页
乙氧基-异酚恶唑脱乙基酶(EROD)和谷胱甘肽转移酶(GST)是动物体内主要的解毒酶,在外源毒物的转化和代谢过程中具有重要作用。本文应用牙鲆肝脏组织中的EROD和GST酶活性作为生物标志物,研究了不同浓度的壬基酚(0,0.10,0.33和1.00 mg·... 乙氧基-异酚恶唑脱乙基酶(EROD)和谷胱甘肽转移酶(GST)是动物体内主要的解毒酶,在外源毒物的转化和代谢过程中具有重要作用。本文应用牙鲆肝脏组织中的EROD和GST酶活性作为生物标志物,研究了不同浓度的壬基酚(0,0.10,0.33和1.00 mg·L^(-1))活体暴露下2种酶的活性响应特征。结果表明,与对照组相比,暴露于低浓度(0.10和0.33 mg·L^(-1))的壬基酚中,EROD和GST酶活性均被诱导,暴露4 d后0.33 mg·L^(-1)的壬基酚处理组中EROD和GST活性的诱导率分别为99.2%和127.5%。暴露于高浓度(1.00 mg·L^(-1))的王基酚中。2种酶的活性均被抑制,4 d后EROD和GST酶活性的抑制率分别为62.0%和37.3%。该试验表明,EROD和GST酶活性的响应可用来评价环境中壬基酚的污染效应。 展开更多
关键词 壬基酚 牙鲆 EROD gst
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野生大豆GsGST19基因的克隆及其转基因苜蓿的耐盐碱性分析 被引量:30
15
作者 王臻昱 才华 +4 位作者 柏锡 纪巍 李勇 魏正巍 朱延明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期971-979,共9页
谷胱甘肽S-转移酶对植物抵御逆境胁迫和解除细胞毒素起着重要作用。本研究从野大豆盐碱胁迫基因表达谱中筛选并克隆得到GsGST19基因,将其转化苜蓿,获得超量表达的转基因苜蓿,并对转基因苜蓿进行耐盐碱性分析。结果显示在正常培养条件下... 谷胱甘肽S-转移酶对植物抵御逆境胁迫和解除细胞毒素起着重要作用。本研究从野大豆盐碱胁迫基因表达谱中筛选并克隆得到GsGST19基因,将其转化苜蓿,获得超量表达的转基因苜蓿,并对转基因苜蓿进行耐盐碱性分析。结果显示在正常培养条件下,转基因苜蓿株系19-4和19-9的GST酶活性分别是非转基因株系的1.52倍和1.49倍。在100mmol L-1 NaHCO3处理14d后转基因株系生长状态良好,而非转基因对照株系明显萎蔫、失绿、甚至死亡;转基因株系的丙二醛含量和相对质膜透性显著低于非转基因株系(P<0.05),而叶绿素含量和根系活力显著高于非转基因对照(P<0.05),说明超量表达GsGST19基因增强了苜蓿的耐盐碱能力。 展开更多
关键词 谷胱甘肽S-转移酶(gst) 转基因苜蓿 野大豆 耐盐碱性
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镉胁迫下两种水稻GSH和GST应答差异的研究 被引量:14
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作者 胡延玲 张春华 +1 位作者 居婷 葛滢 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期305-310,共6页
还原型谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽转硫酶(GST)是水稻解毒系统中的重要组成部分。采用水培法研究了耐性不同的两种水稻(特优559和K优818)在不同程度镉(Cd)胁迫下GSH和GST的变化情况。结果表明,Cd处理导致两种水稻生物量减少、Cd吸收积累增... 还原型谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽转硫酶(GST)是水稻解毒系统中的重要组成部分。采用水培法研究了耐性不同的两种水稻(特优559和K优818)在不同程度镉(Cd)胁迫下GSH和GST的变化情况。结果表明,Cd处理导致两种水稻生物量减少、Cd吸收积累增加,水稻根部Cd含量和积累量均高于地上部,但Cd从水稻根部向地上部的转运存在明显的种间差异,耐性较弱的特优559的Cd转移率(S/R)随处理Cd浓度提高而上升,而耐性较强的K优818则恰好相反,将Cd更多地钝化在根部。两种水稻GSH和GST的变化趋势也有所不同,Cd胁迫使特优559的GSH含量和GST活性显著增加,而K优818的GSH在低浓度Cd处理时出现了小幅下降,但其GST活性变化与特优559相似,根部增幅更为显著。以上结果说明,水稻GSH和GST在Cd解毒和钝化过程中发挥了重要的作用,而且其应答机制存在着一定的基因型差异,这可能与两品种GST同功酶的组成、表达和功能不同有关。 展开更多
关键词 水稻 CD胁迫 GSH gst
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重组日本血吸虫26kDa GST抗原诱导水牛产生抗体及减少排卵的初步观察 被引量:12
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作者 何永康 刘述先 +6 位作者 喻鑫玲 宋光承 徐裕信 曹建平 杨瑞青 侯循亚 张新跃 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期133-135,共3页
目的 观察rSjc2 6GST抗原诱导水牛产生特异性抗体水平以及排卵数量的减少。  方法  2 0头水牛随机分为两组 ,每组 1 0头。试验组免疫rSjc2 6GST抗原 ,对照组注射佐剂 ,攻击感染日本血吸虫尾蚴后 ,定期检测抗rSjc2 6GST抗体、粪检虫... 目的 观察rSjc2 6GST抗原诱导水牛产生特异性抗体水平以及排卵数量的减少。  方法  2 0头水牛随机分为两组 ,每组 1 0头。试验组免疫rSjc2 6GST抗原 ,对照组注射佐剂 ,攻击感染日本血吸虫尾蚴后 ,定期检测抗rSjc2 6GST抗体、粪检虫卵和毛蚴。  结果 水牛免疫rSjc2 6GST抗原后 1个月 ,产生抗rSjc2 6GST抗体 ,至 1 2个月一直维持较高水平。试验组水牛感染后 50~ 90d,粪便EPG和MPG几何均值明显低于对照组 ,但在 1 0 0d以后两组的EPG和MPG均逐渐降低 ,至 330d均为 0。结论 水牛免疫rSjc2 6GST抗原后能产生特异性抗体 ,维持较高水平至 1 2个月 ,在感染后 3个月内有显著的减卵效果 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 rSjc26 gst抗原 特异性抗体 免疫保护力 排卵量 日本血吸虫重组抗原
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食蚊鱼(Gambusia afinis)cat、gapdh和gst基因的克隆及其在生态毒理学中的应用 被引量:6
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作者 欧瑞康 武小燕 +4 位作者 库培佳 王兰 苏甜 梁惜梅 聂湘平 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期83-92,共10页
根据Ensembl、Genbank登录的鱼类cat、gapdh和gst基因的CDS序列设计普通PCR扩增引物,寻找食蚊鱼的cat、gapdh和gst基因的c DNA片段,并根据定量引物设计要求设计出相应的SYBR Green I荧光定量RT-q PCR引物,建立了食蚊鱼cat、gapdh和gst... 根据Ensembl、Genbank登录的鱼类cat、gapdh和gst基因的CDS序列设计普通PCR扩增引物,寻找食蚊鱼的cat、gapdh和gst基因的c DNA片段,并根据定量引物设计要求设计出相应的SYBR Green I荧光定量RT-q PCR引物,建立了食蚊鱼cat、gapdh和gst基因的SYBR Green I荧光定量RT-q PCR方法。该方法在104~108数量级范围内有良好线性关系(R=0.999~1.000);熔解曲线显示扩增产物特异性良好,均为单一峰值;质粒标准品最高浓度与最低浓度的批内试验变异系数与批间试验变异系数均低于2%。利用该方法监测和评价环境污染物对水生生物的影响,选择了水体中常见典型药物污染物——双氯芬酸,研究其对食蚊鱼抗氧化基因表达的影响。结果表明,雌性食蚊鱼暴露在不同浓度双氯芬酸钠(0.005、0.05、0.5和5 mg·L-1)24 h后,其肝脏cat、gapdh和gst的mRNA呈现显著变化,相对于对照组,在低浓度0.005 mg·L-1时,cat与gst mRNA的表达量均有极显著上升(p<0.01),而其它浓度均极显著下降(p<0.01)。试验表明该方法具有快速、精确、灵敏度高的优点,可为利用该类小型鱼类的原位污染物的生物监测和生态毒理评价提供有力的技术支持。 展开更多
关键词 食蚊鱼 CAT GAPDH gst 实时荧光定量PCR 双氯芬酸
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日本血吸虫DNA多价疫苗SjGST-FABP/pcDNA3的构建及其保护性免疫研究 被引量:11
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作者 李建国 张阳德 +1 位作者 李罗丝 向秋 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第14期1709-1712,1716,共5页
目的构建日本血吸虫DNA多价疫苗SjGST-FABP/pcDNA3,用以免疫小鼠,观察其在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用。方法根据质粒pGEX-4T-1中SjGST-ORF和SjFABP基因序列,利用基因重组、PCR等技术将SjGST和SjFABP编码基因拼接在一起,得到融合... 目的构建日本血吸虫DNA多价疫苗SjGST-FABP/pcDNA3,用以免疫小鼠,观察其在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用。方法根据质粒pGEX-4T-1中SjGST-ORF和SjFABP基因序列,利用基因重组、PCR等技术将SjGST和SjFABP编码基因拼接在一起,得到融合基因SjGST-FABP,将融合基因SjGST-FABP定向克隆到pcDNA3多克隆位点上,转化大肠杆菌,经质粒扩增和DNA序列测定后,进行小鼠动物免疫和日本血吸虫尾蚴攻击感染及免疫保护性评价。结果成功构建了日本血吸虫DNA多价疫苗SjGST-FABP/pcDNA3。免疫小鼠获得42.39%的减虫率和56.09%肝减卵率(P<0.05)。结论日本血吸虫DNA多价疫苗SjGST-FABP/pcDNA3可诱导部分抗血吸虫尾蚴攻击感染的免疫保护效果,具有疫苗研究与开发价值。 展开更多
关键词 日本血吸虫 gst 脂肪酸结合蛋白 多价DNA疫苗
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P-gp、GSTπ及TopoⅡ在胃癌中的表达及临床意义 被引量:15
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作者 曲利娟 余英豪 曾玲 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期389-392,共4页
目的 :探讨耐药基因蛋白P gp、GSTπ和TopoⅡ在胃癌中的表达及其临床意义。方法 :应用S P免疫组化法对 85例胃癌进行检测。结果 :胃癌组织P gp、GSTπ表达率分别为 37 6 5 %及 6 3 5 3% ,表达强度与临床分期有关 ,其中高分期者P gp表达... 目的 :探讨耐药基因蛋白P gp、GSTπ和TopoⅡ在胃癌中的表达及其临床意义。方法 :应用S P免疫组化法对 85例胃癌进行检测。结果 :胃癌组织P gp、GSTπ表达率分别为 37 6 5 %及 6 3 5 3% ,表达强度与临床分期有关 ,其中高分期者P gp表达较低分期者为高。TopoⅡ表达率为 5 5 2 9% ,阳性率与组织学分类相关 ,分化较低者 (5 9 5 7% )较分化较高者 (38 30 % )阳性率高。结论 :P gp、GSTπ、TopoⅡ的耐药机制各不相同 ,根据P gp、GSTπ和TopoⅡ表达情况进行药物选择对胃癌化疗具有重要的指导意义。 展开更多
关键词 P-GP gstΠ TopoⅡ 胃癌 临床意义
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