GST-hDSL重组蛋白的原核表达纯化及对人造血祖细胞的扩增作用

目的:原核表达DSL与谷胱甘肽S转移酶(GST)的融合蛋白并研究观察GST-hDSL对人脐带血CD34^+造血祖细胞的体外扩增作用。方法:将人DSL cDNA的蛋白编码序列克隆入原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆茵DH5α中诱导表达融合蛋白,用DEAE阴离子交换柱纯化目的蛋白。然后分离、纯化脐带血CD34^+造血祖细胞,不加细胞因子或加入SCF(干细胞生长因子,stem cell factor)和GM-CSF(粒-巨噬细胞集落刺激因子,granulocyte-macrophage colony-stimulating factor),经过14天的培养,检测GST-hDSL对细胞总数、CD^(34+)细胞百分率、以及集落形成的影响。结果:当SCF和GM-CSF存在时,GST-hDSL组的CD34^+细胞百分率,集落(colony forming cells,CFC)数以及高增值潜能集落(high proliferative potential colonyformning cells,HPP-CFC)数分别是对照组的1.9、1.2、5.3倍。结论:当与SCF和GM-CSF联合作用时,重组GST-hDSL蛋白对造血祖细胞具有扩增作用。