前列腺癌组织中GSTP1和DAPK基因异常甲基化检测及临床意义

目的:检测前列腺癌组织中GSTP1和DAPK基因异常甲基化,探讨其甲基化与前列腺癌临床病理特征间的关系。方法:采用巢式甲基化特异性PCR(nested methylation specific polymerase chain reaction,NMSP)法对57例前列腺癌组织和35例良性前列腺增生组织进行甲基化检测,分析其甲基化的发生与前列腺癌临床病理特征间的关系。结果:前列腺癌组织中GSTP1和DAPK基因甲基化检出率显著高于良性前列腺增生组织(GSTP1:61.4%vs 2.9%;DAPK:43.9%vs 8.6%;均P<0.01)。GSTP1基因甲基化率在不同Gleason评分间具有明显差异(χ2=11.53,P=0.001),而在不同年龄、前列腺特异性抗原(PSA)和临床分期之间差异却无显著性(χ2=0.111,1.662和1.975,均P>0.05);DAPK基因甲基化率在不同年龄、PSA、Gleason评分和不同临床分期之间均无明显差异(χ2=0.071、0.002、1.290和2.309,P均>0.05)。结论:GSTP1和DAPK基因异常甲基化与前列腺癌的发生与发展相关,可有助于前列腺癌的诊断。

GSTP1和ERCC1基因多态性与食管癌患者放疗敏感性及预后的关系

目的探讨谷胱甘肽硫转移酶P1基因(GSTP1)和切除修复交叉互补基因1(ERCC1)基因多态性与食管癌患者放疗敏感性及预后的关系。方法选取接受多西他赛单药化疗和同期放疗的食管癌患者200例,放疗1个疗程后根据完全缓解、部分缓解、稳定、进展情况将患者分为放疗敏感组(完全缓解、部分缓解)、放疗不敏感组(稳定、进展),进行3 a随访,记录患者生存情况。采集患者外周静脉血,提取基因组DNA并进行PCR扩增,分析GSTP1基因G28152A位点和ERCC1基因C118T位点的单核苷酸多态性(SNP)。取适量的患者食管癌组织,组织匀浆后应用酶联免疫吸附法测定髓磷脂碱性蛋白1(MBP-1)、磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、磷脂酶Cε1(PLCE1)基因蛋白浓度。结果GSTP1基因携带杂合型GA和突变型AA的食管癌患者放疗后完全缓解、部分缓解的比例明显高于野生型GG的患者,稳定、进展的比例明显低于野生型GG的患者(P<0.01)。ERCC1基因携带野生型CC的食管癌患者放疗后完全缓解、部分缓解的比例明显高于携带杂合型CT和突变型TT的患者(P<0.01)。GSTP1基因携带杂合型GA和突变型AA的食管癌患者放疗后生存率升高(P<0.05);ERCC1基因携带野生型CC的食管癌患者放疗后生存率明显升高(P<0.05)。放疗不敏感组凋亡相关基因MBP-1、PTEN表达水平明显降低,增殖相关基因Cyclin D1、PLCE1表达水平明显升高(P<0.05)。GSTP1基因携带杂合型GA和突变型AA的食管癌患者MBP-1、PTEN表达水平明显升高,Cyclin D1、PLCE1表达水平明显降低(P<0.01)。ERCC1基因携带野生型CC的食管癌患者MBP-1、PTEN表达水平明显升高,Cyclin D1、PLCE1表达水平明显降低(P<0.05)。结论GSTP1基因携带杂合型GA和突变型AA、ERCC1基因携带野生型CC的食管癌患者放疗预后较好,可能与上调凋亡相关基因MBP-1、PTEN表达,下调增殖相关基因Cyclin D1、PLCE1表达有关。

PEAR1、GSTP1基因型与脑梗死预后的相关性分析

目的 探讨PEAR1、GSTP1基因型与脑梗死预后的相关性,为脑梗死个体化精准治疗及二级预防提供理论参考.方法 选取首发症状型脑梗死患者,入院后遵循抑制血小板聚集、营养神经、改善循环及对症治疗原则,患者24 h内口服阿司匹林100 mg, 1次/d,并长期维持治疗.收集患者的一般资料、既往史、血小板相关指标、PEAR1及GSTP1基因型、相关待测量表评分及脑梗死复发周期,出院随访13个月.根据脑梗死复发及复发周期进行分组,比较PEAR1、GSTP1基因多态性及其他临床资料与脑梗死预后是否具有关联.结果 入组患者PEAR1基因突变型(AA+AG)占60.1%,未突变型(GG)占39.9%;GSTP1基因突变型(AG+GG)占31.8%,未突变型(AA)占68.2%.对比分析两组患者冠心病病史、出院时NIHSS评分、血小板计数及GSTP1基因型与脑梗死复发有关联.多因素Logistic回归分析显示冠心病病史、出院时低NIHSS评分、低血小板计数及GSTP1基因突变型(AG+GG)为脑梗死复发的独立危险因素(P<0.05).结论 首发症状型脑梗死患者年龄越大、出院时低NIHSS评分、低血小板计数或GSTP1为基因突变型(AG+GG)脑梗死预后较差.

GSTP1基因多态性与结直肠癌患者奥沙利铂化疗敏感性及周围神经毒性的关系

目的探讨谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1)基因多态性与结直肠癌患者含奥沙利铂化疗方案的敏感性及周围神经毒性(CIPN)的关系。方法选取某医院应用奥沙利铂化疗的结直肠癌患者70例,入院后24 h内统计患者基本临床资料。所有患者于化疗前静脉采血2 mL,采用地高辛原位杂交试剂盒进行杂交染色,多通道荧光定量分析仪检测GSTP1基因型,对比不同基因型患者化疗2个周期后的疗效及毒副反应发生情况。所有患者均经mFOLFOX6/XELOX方案治疗,采用实体瘤疗效评价标准(RECIST)进行疗效评价,美国国家癌症研究所常见不良反应术语评定标准(NCI-CTCAE)进行毒副反应评估。结果(1)患者性别、年龄、TNM分期、淋巴结转移情况、肿瘤部位、ECOG评分、化疗方案、伴发慢性病、奥沙利铂剂量等病理生理及药物因素与GSTP1基因型分布及化疗疗效无明显相关性(P>0.05)。(2)CIPN具有剂量累积性,奥沙利铂累积剂量高者CIPN发生率较高(P<0.05)。(3)GSTP1野生型与突变型患者疾病控制率分别为78.05%、89.66%,差异无统计学意义(P>0.05)。(4)GSTP1野生型患者CIPN、骨髓抑制发生率明显高于突变型患者(P<0.05),其余不良反应(乏力、胃肠道反应、口腔黏膜炎等)各基因型间的差异无统计学意义(P>0.05)。(5)70例患者CIPN发生程度较轻,无4级以上CIPN。GSTP1基因多态性与CIPN严重程度无关(P>0.05)。结论GSTP1基因多态性与结直肠癌患者病理生理因素、化疗疗效无关,与患者使用奥沙利铂后CIPN的发生相关。检测GSTP1基因多态性可能成为接受奥沙利铂化疗的结直肠癌患者发生CIPN的一个预测指标。

广东地区汉族人群GPⅢa、PEAR1、PTGS1和GSTP1基因多态性分析及相关性研究

目的研究广东地区汉族人群血小板膜糖蛋白Ⅲa(GPⅢa)、血小板内皮聚集受体1(PEAR1)、前列腺素内过氧化物合酶1(PTGS1)、谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)基因多态性分布情况并进行相关性分析。方法收集2019年1月至2022年4月于广州达安临床检验中心实验室检测的患者样本,共2985例。对患者的GPⅢa基因rs5918位点、PEAR1基因rs12041331位点、PTGS1基因rs10306114位点、GSTP1基因rs1695位点进行基因检测。应用统计学方法比较四个基因位点变异情况在广东汉族人群中的分布差异,分析其与性别、年龄的相关性。结果rs5918位点、rs12041331位点、rs10306114位点、rs1695位点在广东汉族人群中的人群频率分别为0.39%、42.55%、0.05%、17.52%。rs1695位点的基因型和等位基因频率在不同年龄组间的分布差异有统计学意义(P<0.05),其他三个基因位点在不同年龄组之间的分布差异无统计学意义(P>0.05)。广东地区汉族人群四个基因位点基因型和等位基因频率的分布与我国汉族人群差异无统计学意义(P>0.05),与南亚、非洲、欧洲、拉丁美洲人群差异有统计学意义(P<0.05)。结论广东地区汉族人群rs1695位点(GSTP1)年龄<60岁组携带G等位基因的比例增加,存在地区和年龄的差异性,可为指导广东地区汉族人群阿司匹林个性化用药提供依据。

MTHFR,GSTP1,ERCC1基因多态性与结直肠癌FOLFOX化疗方案疗效相关性研究

目的:探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR),谷胱甘肽S转移酶P1(glutathione S-transferase pi-1,GSTP1),核苷酸切除修复交叉互补组-1(excision repair cross-complementing group 1,ERCC1)基因多态性与结直肠癌5-氟尿嘧啶/奥沙利铂/亚叶酸钙(FOLFOX)化疗方案疗效的相关性。方法:150例晚期大肠癌患者抽取静脉血并提取DNA,用荧光定量PCR和高分辨率溶解曲线分型技术(HRM-SNP)等方法检测患者MTHFR、GSTP1、ERCC1基因型。所有患者均经FOLFOX方案治疗,以实体瘤化疗疗效评价标准(RECIST1.1)评价疗效。运用SPSS 19.0结合临床资料进行统计分析。结果:⑴患者性别,年龄,结直肠癌分期(TNM),肿块部位等和FOLFOX化疗疗效均无明显相关性(P>0.05)。⑵GSTP1Ile105Val Ile/Ile和Ile/Val+Val/Val有效率分别为19.7%、20.5%,两组基因型之间的OR值为2.876,95%CI(1.288,6.424),P<0.05;MTHFR Ala222 Val Ala/Ala和Ala/Val+Val/Val有效率分别为11.8%、28.3%,OR值为2.236,95%CI(1.020,5.017),P<0.05。结论:GSTP1Ile105Val、MTHFR Ala222Val单核苷酸多态性与结直肠癌对FOLFOX方案化疗疗效相关,检测GSTP1 Ile105Val、MTHFR Ala222Val单核苷酸多态性可能成为预测结直肠癌患者接受FOLFOX方案化疗疗效的指标。

诱导痰RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区甲基化在肺癌诊断中的价值

目的:探讨诱导痰中RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区异常甲基化及其联合检测在肺癌诊断中的价值。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)技术,检测82例肺癌患者诱导痰和对应肿瘤组织以及25例肺部良性病变组织中RASSF1A,p16和DAPK3种基因启动子区甲基化改变,并分析三者与临床病理资料的关系。结果:肺癌病理组织中RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区甲基化检出率分别为63.4%,59.8%和58.5%,对应的诱导痰三者甲基化检出率分别为54.9%,48.8%和51.2%;肺部良性病变组织中甲基化检出率均为零,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。RASSF1A基因甲基化检出率在中高分化和无淋巴结转移的肺癌中明显低于低分化和未分化及有淋巴结转移者(P<0.05),与年龄、性别、吸烟指数、临床分期及病理类型无关,而p16和DAPK基因甲基化检出率与上述因素均无明显相关性(P>0.05);联合检测3种基因甲基化的检出率为73.2%。结论:联合检测诱导痰中RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区高甲基化有可能作为诊断肺癌及评估预后的简便有效的指标,并能提高检出率。

GSTP1(rs1695)基因多态性与自体造血干细胞移植患者血液学毒性的关系研究

目的:研究GSTP1(rs1695)(简称GSTP1)基因多态性与自体造血干细胞移植患者使用CBV方案(环磷酰胺、卡莫司汀、依托泊苷)预处理后血液学毒性之间的关系。方法:对2015年4月-2017年6月到我院治疗的83例使用CBV方案预处理的自体造血干细胞移植患者进行回顾性分析,采用荧光染色原位杂交检测法测定GSTP1 A313G的多态性,统计血液学毒性和粒细胞缺乏性发热发生率以及白细胞、中性粒细胞、血小板植入时间,分析GSTP1基因与上述指标之间的关系。结果:83例患者中28例(33.73%)存在有至少1个基因位点的变异,A等位基因频率为81.3%,G等位基因频率为18.7%。GSTP1 AA基因型患者发生Ⅳ度白细胞、Ⅳ度中性粒细胞、Ⅳ度血小板减少的时间分别为化疗后(8.91±1.25)、(9.02±1.19)、(11.56±1.58)d,携带GSTP1 313等位基因G(AG/GG基因型)的患者减少的时间分别为化疗后(8.61±1.17)、(8.68±1.19)、(11.44±1.34)d。GSTP1 AA基因型患者白细胞、中性粒细胞、血小板的植入时间分别为自体造血干细胞回输后(11.98±1.99)、(10.44±1.35)、(15.55±2.18)d;携带GSTP1 313等位基因G(AG/GG基因型)的患者植入时间分别为自体造血干细胞回输后(12.41±2.44)、(10.36±1.62)、(16.29±3.15)d。GSTP1 AA基因型及携带GSTP1 313等位基因G(AG/GG基因型)的患者移植期间发生Ⅲ~Ⅳ度贫血的患者分别为24、11例,分别占对应基因型患者的43.64%、39.29%;发生粒细胞缺乏性发热的分别为21、11例,分别占对应基因型患者的38.18%、39.29%,但上述差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:GSTP1基因多态性与自体造血干细胞移植患者使用CBV方案预处理后的血液学毒性未见相关性,亦不影响干细胞植入时间。

急性淋巴细胞白血病患儿GSTP1及MTHFR基因多态性对大剂量甲氨蝶呤不良反应的影响

目的:研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿的GSTP1及MTHFR基因多态性对大剂量甲氨蝶呤(HDM TX)不良反应的影响。方法:对2014年1月-2016年1月98例ALL患儿采用PCR方法测定C677T A303G及MTHFR C677T的多态性,观察患儿HD-M TX化疗期间的不良反应发生情况,分析C677T及MTHFR对不良反应发生的影响。结果:98例患儿中61例(62.24%)存在有至少1个基因位点的变异;C677TA303G基因多态性表现:A基因频率84.69%,G基因频率15.31%;MTHFR C677T基因多态性表现:C基因频率66.33%,T基因频率33.67%。98例患儿中,7例(7.14%)发生骨髓抑制,23例(23.47%)发生肝损害,15例(15.31%)发生肾损害,48例(48.98%)发生胃肠道反应,46例(46.94%)发生黏膜损害。对患儿的年龄、性别、危险程度及MTX的剂量进行校正后分析显示,基因多态性与骨髓抑制、胃肠道及黏膜损害的发生无显著相关性(P>0.05)。然而,变异基因数量与肝功能及肾功能损害的发生具有显著相关性(P<0.05)。结论:MTHFR及C677T基因联合变异时患儿的M TX不良反应发生风险明显增加,对此应引起临床上的重视。

宫颈癌细胞中DAPK1基因CpG岛甲基化及其表达

目的 :探讨宫颈癌细胞中凋亡相关蛋白激酶 1(DAPK1 )基因CpG岛甲基化及其表达与宫颈癌的相关性 .方法 :应用甲基化特异性PCR和SABC免疫组化方法 ,检测 32(鳞癌 1 8,腺癌 1 4 )例宫颈癌组织DAPK1基因CpG岛甲基化修饰及蛋白表达 .结果 :宫颈癌中DAPK1基因甲基化扩增阳性率明显增高 5 6 .3% ,与正常宫颈比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,鳞癌与腺癌甲基化扩增阳性率无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;宫颈癌中DAPK1蛋白表达阳性率降低 1 5 .6 3% ,与正常宫颈比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,鳞癌和 7例与腺癌无显著性差异 (P >0 .0 5 ) .结论 :DAPK1基因CpG岛异常甲基化修饰能抑制DAPK1的转录 ,使DAPK1蛋白不表达 ,丧失抑癌作用 。

3种胃癌细胞株中GSTP1基因表达及其启动子区甲基化状态的研究

目的研究候选基因GSTP1在胃癌细胞株中的表达及其启动子区的甲基化状态,初步探讨胃癌细胞株GSTP1基因表达水平与其启动子区甲基化的相关性。方法采用RT-PCR和Western blot技术分别检测GSTP1在人胃癌细胞株MGC803、BGC823和SGC7901中的mRNA和蛋白表达水平。甲基化特异性PCR(MSP)法检测启动子区域甲基化状态。分别用不同浓度的去甲基化药物5-氮杂胞苷处理GSTP1基因启动子区高甲基化状态细胞后,再检测GSTP1基因蛋白表达水平。结果人胃癌细胞株BGC823和SGC7901中GSTP1 mRNA和蛋白呈阳性表达,MGC803中mRNA和蛋白呈阴性表达;BGC823和SGC7901细胞GSTP1基因启动子区域未发生甲基化,而MGC803细胞启动子区呈高甲基化状态;经5-氮杂胞苷药物干预后,MGC803细胞的GSTP1蛋白表达明显增强。结论胃癌MGC803细胞株中GSTP1基因表达沉默与启动子区高甲基化状态有关。

广东部分地区健康人群GSTP1基因多态性研究

目的 了解谷胱甘肽 S 转移酶P1(GSTP1)基因多态性在广东省部分地区健康人群中的分布规律。方法 应用聚合酶链式反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)的方法检测广东省粤语言地区 2 2 4名健康人GSTP1基因型。应用SPSS软件进行统计分析。结果 在所调查人群中野生纯合子GSTP1 A A基因型的频率为 66 5 % (14 9 2 2 4) ;杂合子GSTP1 A G在人群占 2 6 8% ,突变纯合子GSTP1 G G占 6 7%。经检验这种分布在不同性别、职业、地区以及生活方式人群中的分布均衡。结论 二分类Logistic回归分析结果显示 ,高血压、冠心病、脑卒中、肺癌及鼻咽癌等家族史在人群中的发生与人群GSTP1不同基因型的分布无显著相关关系。

EGCG对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4增殖、细胞周期及DAPK1基因甲基化影响的研究

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4增殖、细胞周期的影响及其作用机制。方法:应用EGCG 0、50、75、100及125μmol/L分别处理NB4细胞24、48、72、96 h后,使用CCK-8法检测各时间点和浓度的细胞增殖水平,流式细胞术检测不同浓度EGCG处理NB4细胞48 h后的细胞周期情况,RT-PCR检测DNMT1、DNMT3a、DAPK1 mRNA的表达水平,甲基化特异性PCR检测DAPK1基因的甲基化状态,Western blot检测DAPK1蛋白的表达情况。结果:EGCG明显抑制NB4细胞增殖并诱导细胞阻滞于G_0/G_1期,且呈时间-浓度依赖性(r=0. 916)。EGCG呈浓度依赖性下调NB4细胞DNMT1、DNMT3a的表达,且对DNM T3a的作用更为明显。随EGCG浓度增加,DAPK1基因的甲基化程度减弱(r=-0. 813),DAPK1 mRNA和蛋白表达上调(r=0. 96,r=0. 991)。结论:EGCG通过抑制DNMT1和DNMT3a基因的表达,下调DAPK1S基因的甲基化程度,从而抑制NB4细胞增殖和诱导其细胞周期阻滞。

HCC患者GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化状态研究

目的检测人原发性肝癌(HCC)中抑癌基因GSTP1的启动子区CpG岛甲基化的状况,并探讨其在肝癌发生中的作用。方法以已知的GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化阳性的乳腺癌细胞株MCF-7为阳性对照,以11例正常人外周血单核细胞(PBMC)DNA为阴性对照,用甲基化特异性PCR(MSP)的方法对26例肝细胞癌患者的癌、远癌组织中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化的状态进行检测。结果在26例原发性肝癌中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化在癌组织为88%(23/26),在远癌组织中为69%(18/26);而在11例正常人外周血单核细胞均为甲基化阴性。结论抑癌基因GSTP1基因启动子区CpG岛高甲基化可能是肝癌发生早期的分子事件,在人原发性肝癌的发生发展中具有重要的作用。

5-Aza-CdR对胃癌细胞系BGC823生长及DAPK1基因甲基化的影响

目的观察5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对体外培养的胃癌BGC823细胞增生和凋亡的影响及其对此细胞中DAPK1基因的甲基化状态的影响。方法选择浓度为1×10-6的5-Aza-CdR处理体外培养的BGC823细胞后,用Annexin-v-FITC凋亡检测药物处理后细胞凋亡情况;MSP法检测用药前后细胞中Apaf-1基因的甲基化状态;RT-PCR法检测用药前后细胞中DAPK1的mRNA表达的变化。结果在药物作用24、48、72 h后细胞的凋亡率分别为5.83±0.53、9.23±0.58、15.34±0.90,较对照组明显增加(P<0.05)。DAPK1基因的甲基化状态得到了逆转,DAPK-1基因的mRNA表达得到增加。结论5-Aza-CdR对BGC823细胞具有增生抑制作用,并促进细胞凋亡。DAPK1基因表达情况与其甲基化状态的改变有关。

人工修饰双等位基因特异性引物结合SYBR Green Ⅰ荧光PCR法检测GSTP1基因多态性

目的建立人工修饰双等位基因特异性引物结合SYBR Green Ⅰ荧光PCR法检测GSTP1第105个密码子基因多态性的方法,并利用该法研究GSTP1第105个密码子在广西百色市人群遗传特征,为进一步研究GSTP1基因多态性与疾病的发生易感性研究奠定基础。方法采用人工修饰双等位基因特异性引物结合SYBR Green Ⅰ荧光PCR法技术对211例广西百色市健康成人进行GSTP1 Ile105Val基因分型,并分析是否存在性别差异及与国内外其他人群分布频率差异。结果人工修饰双等位基因特异性引物结合SYBR Green Ⅰ荧光PCR法GSTP1基因型检测结果与PCR产物测序结果一致,用此法检测出广西百色市女性和男性人群GSTP1 Ile105Val均以A等位基因为主,分别为79.7%和84.5%;AA野生纯合子型、AG杂合子型和GG突变纯合型在女性人群中分别为62.2%、35.1%和2.7%,男性人群则为71.0%、27.0%和2.0%。经统计学分析,广西GSTP1Ile105Val等位基因和基因型分布频率无性别差异,与辽宁、回族、印度、俄罗斯族等人群相应位点基因型分布频率无差异,但与国内维族、朝鲜族、蒙古族、高加索女性相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论人工修饰双等位基因特异性引物结合SYBR Green Ⅰ荧光PCR法是一种快捷、准确的基因多态性检测方法。广西人群GSTP1基因Ile105Val呈多态性分布,基因型分布频率无性别差异,与其他部分种族存在差异。

GSTM1和GSTP1基因多态性与卵巢癌发生风险的关系

目的探讨GSTM1和GSTP1基因多态性与卵巢癌发生风险的关系。方法选择2013年1月至2015年6月在北京大学深圳医院确诊为卵巢癌的手术患者124例为病例组,选取同时期来本院体检的健康女性124例为对照组。于清晨抽取所有研究对象4m L外周静脉血,用于multiplex-PCR和PCR-RFLP检测研究对象的GSTM1和GSTP1基因的多态性,并对结果进行分析。结果病例组GSTP1基因GG型分布频率为28.2%,与健康对照组相比差异有统计学意义（χ2=5.511,P〈0.05）,且GSTP1基因GG型可能会增加患卵巢癌的风险（OR=2.259,95%CI：1.14~4.50,P〈0.05）,携带GSTP1基因GG型患者患卵巢上皮性癌的比例明显高于卵巢非上皮性癌（χ2=4.017,P〈0.05）;而GSTM1各基因型分布与健康对照组相比差异均无统计学意义（均P〉0.05）,且与卵巢癌的发生风险无关联。结论 GSTP1基因多态性与卵巢癌的发病风险有关联,其GG型可能会增加卵巢上皮性癌的发病风险;而GSTM1基因则与卵巢癌的发病风险无关。

普鲁卡因酰胺诱导肝癌细胞启动子区甲基化的GSTP1基因重新表达

目的 研究HepG2肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化与GSTP1基因表达的关系 ,并探讨普鲁卡因酰胺用于诱导因甲基化失活的GSTP1基因重新表达的可能性。方法 分别用 5 -杂氮 - 2′ -脱氧胞苷 (5 -Aza -CdR)和普鲁卡因酰胺处理HepG2细胞后培养 ,甲基化特异性PCR(MSP)检测细胞中GSTP1基因的甲基化状况 ,RT -PCR和Westernblot分别检测细胞中GSTP1mRNA和GST -π的表达。结果 HepG2细胞在去甲基化药物处理前 ,GSTP1基因完全甲基化 ,GSTP1基因不表达 ;药物处理后 ,普鲁卡因酰胺组和 5 -Aza -CdR组GSTP1基因有表达。结论 肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化可抑制GSTP1基因表达 ,普鲁卡因酰胺与 5 -Aza

NATC2,YP2B6和GSTP1基因多态性与苯乙烯生物监测的关系

目的:探讨NAT2,CYP2B6和GSTP1基因多态性与苯乙烯生物监测之间的关系。方法:选择58名接触苯乙烯的工人为研究对象,应用PCR-RFLP法判定基因型;应用高效液相色谱法测定其尿中三种代谢产物(苯乙醇酸、苯乙醛酸和苯乙烯巯基尿酸)的含量;并分析NAT2,CYP2B6和GSTP1基因多态性对接触不同水平苯乙烯工人尿中代谢产物含量有无显著影响(P<0.05)。结果:CYP2B6(BsrI)不同基因型苯乙烯尿中代谢产物含量有显著性差异;GSTP1(BsmAI)和NAT2 M3基因型在苯乙烯代谢中的作用差异均无统计学意义。结论:除传统生物检测指标如尿中化学代谢物和早期生物效应等,某些苯乙烯代谢酶基因多态性对其生物监测指标具有一定影响,因此也可作为遗传易感性生物标志物,用来评价苯乙烯接触人群的遗传易感性。

5-杂氮-2′-脱氧胞苷对前列腺癌PC3细胞系生长以及抑癌基因GSTP1、RASSF1A转录的影响

目的:观察DNA去甲基化药物5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-aza-CdR)对前列腺癌细胞株PC3抑癌基因GSTP1和RASSF1A转录改变以及细胞增殖活性的影响。方法:用不同浓度5-aza-CdR(2、5、10μmol/L)处理前列腺癌细胞株PC3,利用甲基化特异性PCR(MSP)法检测用药前PC3细胞株GSTP1、RASSF1A启动子甲基化状态;采用实时荧光定量RT-PCR法检测用药过程中GSTP1和RASSF1A mRNA转录改变;用MTT法和流式细胞术检测用药前后PC3肿瘤细胞增殖活性改变。结果:GSTP1、RASSF1A启动子区域出现甲基化现象。与对照组相比,药物组培养24h后GSTP1和RASSF1A mRNA表达未发生明显改变;培养48h后5、10μmol/L药物组GSTP1和RASSF1A mRNA表达出现上调;72h后各浓度药物组均检测出两基因mRNA表达升高(P<0.05)。药物组培养24和48h未出现明显的细胞增殖抑制现象和细胞周期改变;培养72h后,药物组细胞增殖抑制显著(P<0.05),细胞周期改变明显(P<0.05),阻滞于G0/G1期。结论:GSTP1和RASSF1A基因在PC3前列腺癌细胞系中的失表达可能与其启动子CpG岛高甲基化有关;5-aza-CdR能在一定程度上抑制PC3细胞增殖,干扰细胞周期,提高GSTP1和RASSF1A的转录水平。