GTF-PAc融合防龋DNA疫苗研究(Ⅲ)pGLUA-P免疫定菌鼠防龋研究

目的 :了解GTF -PAc融合防龋DNA疫苗 pGLUA -P激发机体免疫反应和抑制龋病的能力。 方法 :将pGLUA -P和携带 pac基因A -P基因片段的DNA防龋疫苗 pCIA -P以颌下腺周围区域皮下注射 (TSG)和股四头肌注射途径分别免疫定菌SD大鼠 ,以ELISA法检测血清和唾液中的抗体水平 ,采用Keyes法评估大鼠磨牙患龋情况。结果 :pGLUA -P和 pCIA -P经TSG免疫及 pGLUA -P经股四头肌注射免疫组的血清抗PAc的IgG抗体水平明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,pGLUA -P和pCIA -P经TSG免疫组的唾液抗PAc的IgA抗体水平明显高于其余组 (P <0 .0 5 ) ;pGLUA -P经TSG免疫组的釉质龋和牙本质浅龋记分最低 (P <0 .0 5 ) ;经TSG免疫 pGLUA-P组和pCIA -P组的牙本质中龋记分最低 (P <0 .0 5 )。结论 :GTF -PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA -P可以有效地诱导机体的免疫反应 ,抑制龋病的发生和发展 ,防龋效果优于防龋DNA疫苗 pCIA -P。

GTF-PAc融合防龋DNA疫苗的研究(Ⅰ)携带GLU基因片段的真核表达质粒pGLU的构建

目的 :将变形链球菌葡糖基转移酶GTF I的编码葡聚糖结合区 (GLU)的序列克隆到真核载体 pCI中 ,为构建GTF PAc融合防龋DNA疫苗做准备。方法 :用PCR的方法扩增含gtfB基因的重组质粒 pYNB13的GLU区序列 ;将载体 pCI和GLU扩增片段分别酶切 ,体外连接 ,构建成真核表达质粒pGLU ,酶切电泳鉴定。 结果 :PCR获得了glu目的片段 ,质粒 pGLU含有 glu目的片段。 结论 :构建出了含有gtfB基因重要抗原决定簇区的真核表达质粒