小分子GTP酶的结构与功能

小分子GTP酶是真核生物中普遍存在的一类分子量较小的蛋白质,它们具有保守的GTP结合结构域,在GTP酶类中自成一个超家族。根据序列结构的不同它们又分为多个家族,不同的家族分别在诸如细胞信号转导、胞质骨架的建成和物质转运等过程中起着非常重要的调控功能。

早期宫颈癌组织GTP酶激活蛋白-Src同源结构域3-结合蛋白1的表达与宫颈癌临床病理特征和根治术后复发的相关性

目的探讨早期宫颈癌组织GTP酶激活蛋白-Src同源结构域3-结合蛋白1(G3BP1)的表达与根治术后复发的相关性。方法选取2015年2月—2018年2月丽水市人民医院收治的拟行根治性手术治疗的早期宫颈癌患者372例,均于手术时保留宫颈癌组织与癌旁组织,采用免疫组织化学法检测宫颈癌组织与癌旁组织中G3BP1表达情况,并分析宫颈癌组织中G3BP1蛋白表达与患者临床病理特征的关系。另术后随访3年,根据患者复发情况将其分为复发组与未复发组,对比复发组、未复发组宫颈癌组织中G3BP1蛋白表达情况,采用多因素logistic回归性分析法分析宫颈癌组织中G3BP1蛋白表达与宫颈癌患者根治性术后复发的关系,并采用受试者工作曲线(ROC)分析癌组织中G3BP1蛋白表达对宫颈癌患者根治性术后复发的预测效能。结果宫颈癌组织中G3BP1蛋白阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05);G3BP1蛋白在不同病理类型、有无子宫旁侵犯患者中的阳性表达率无显著性差异(P>0.05),年龄>40岁、最大肿瘤直径≥4 cm、临床分期为ⅡA1~ⅡA2、低/未分化、出现淋巴结转移、有肌层浸润、有阴道浸润的宫颈癌患者G3BP1蛋白阳性表达率均分别高于年龄≤40岁、最大肿瘤直径<4 cm、临床分期为ⅠA1~ⅠA2、ⅠB 1~ⅠB 2、高/中分化、无淋巴结转移、无肌层浸润及无阴道浸润的患者(P<0.05);早期宫颈癌患者根治术后3年复发率为6.45%,复发组宫颈癌组织中G3BP1蛋白阳性表达率高于未复发组(P<0.05);阴道切缘阳性、G3BP1蛋白阳性表达均是宫颈癌患者根治术后复发的独立危险因素(P<0.05)。宫颈癌组织中G3BP1蛋白阳性表达预测宫颈癌患者根治性术后复发的灵敏度、特异度、AUC及95%CI分别为91.75%(22/24)、86.50%(301/348)、0.938及0.908~0.960(P<0.001)。结论早期宫颈癌组织中G3BP1蛋白呈现高表达,其在不同的年龄、肿瘤大小、临床分期、分化程度、淋巴结转移、肌层浸润及阴道浸润等病理特征患者中呈显著差异性表达,且在根治术后复发的患者中阳性表达率更高,是早期宫颈癌患者根治术后复发的危险因素,对术后复发具有一定的预测价值。

槲皮素通过G3BP1调控Wnt信号通路抑制宫颈癌细胞增殖

目的:探讨槲皮素通过G3BP1调控Wnt/β-Catenin通路抑制宫颈癌细胞增殖的作用机制。方法:建立SiHa细胞裸鼠皮下移植瘤模型,设置模型对照组、槲皮素25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg组,检测给药第7 d、14 d、21 d瘤体积变化,给药结束后取肿瘤组织称重,Western blot检测瘤组织中GTP酶激活蛋白-Src同源结构域3-结合蛋白1(G3BP1)、β-连环蛋白(β-Catenin)水平。采用CCK-8法分析5μmol/L^320μmol/L槲皮素作用48 h对SiHa细胞增殖的抑制作用,并计算半数抑制浓度(IC50);将25、50及100μmol/L槲皮素作用于SiHa细胞,绘制7 d生长曲线;观察细胞集落形成情况;采用Western blot法检测细胞G3BP1、β-Catenin、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、Myc原癌基因(c-Myc)蛋白表达水平;敲低或上调G3BP1的表达,观察其对抑制率以及G3BP1、β-Catenin、cyclinD1、c-Myc蛋白水平的影响。结果:槲皮素25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg组给药第14 d、21 d瘤体积明显小于模型对照组,与模型对照组比较,槲皮素50、100 mg/kg组能明显降低瘤体质量(P<0.05)。25、50、100 mg/kg的槲皮素能明显下调瘤体G3BP1、β-Catenin蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。CCK-8结果显示,槲皮素对宫颈癌SiHa细胞的增殖均具有抑制作用,并伴随槲皮素浓度的增加,抑制作用明显增加,IC50为(84.19±5.12)μmol/L;生长曲线提示槲皮素25、50、100μmol/L对SiHa细胞生长具有明显的抑制作用;显著抑制SiHa细胞的集落形成;与模型对照组比较,槲皮素25、50、100μmol/L可下调G3BP1、β-Catenin、cyclinD1、c-Myc蛋白表达;敲低G3BP1的表达,槲皮素50μmol/L显著增加抑制率,下调β-Catenin、cyclinD1、c-Myc蛋白表达,上调G3BP1的表达,槲皮素50μmol/L显著降低抑制率,上调β-Catenin、cyclinD1、c-Myc蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:槲皮素能抑制宫颈癌细胞增殖,其机制可能是通过靶向G3BP1调控Wnt/β-Catenin通路有关。