miR-502-3p通过靶向GTPBP2基因调控结直肠癌干细胞增殖与凋亡

目的:探讨miR-502-3p通过靶向GTP结合蛋白2(GTPBP2)调控结直肠癌干细胞(CCSC)增殖、细胞周期和凋亡的分子机制。方法:利用免疫磁珠分选技术从结直肠癌细胞HCT116中分选CCSC(CD133+CD44+双阳性细胞和CD133-CD44-双阴性细胞),用qPCR法检测细胞中miR-502-3p表达水平。利用脂质体转染法分别将miR-NC、miR-502-3p、si-miR-NC、si-miR-502-3p、miR-502-3p+vector和miR-502-3p+GTPBP2转染至CD133+CD44+细胞中,记作miR-NC、miR-502-3p、si-miR-NC、si-miR-502-3p、miR-502-3p+vector和miR-502-3p+GTPBP2组。用qPCR法检测细胞中miR-502-3p、GTPBP2 mRNA表达水平,MTT法、流式细胞术分别检测细胞增殖率、细胞周期和凋亡率,WB法检测细胞中Ki67、CDK1、Bcl2、BAX和GTPBP2蛋白的表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-502-3p与GTPBP2基因的靶向关系。结果:CD133+CD44+细胞中miR-502-3p表达水平显著低于CD133-CD44-细胞(P<0.01)。与miR-NC组比较,miR-502-3p组细胞增殖率、S期细胞比例显著降低(均P<0.01),凋亡率、G0/G1期细胞比例显著升高(均P<0.01),细胞中Ki67、CDK1、Bcl2蛋白表达均显著下调(均P<0.01)、BAX蛋白表达显著上调(P<0.01)。miR-502-3p靶向调控GTPBP2的表达,过表达GTPBP2可逆转上调miR-502-3p对CCSC增殖、周期和凋亡的作用。结论:上调miR-502-3p表达抑制CCSC增殖和阻滞细胞周期、诱导凋亡,其作用机制可能与过表达GTPBP2有关。