大蒜素激活Notch信号靶向诱导sGC转录预防大鼠高血压的机制研究

目的:探讨大蒜素预防大鼠高血压的分子机制。方法:将60只大鼠进行分组和药物处理,分别为假手术组(Sham)、原发性高血压组(SHR)和大蒜素处理的高血压组(SHR+Allicin),各20只。采用无创血压测量仪测量各组大鼠的血管收缩压,再采用不同浓度的乙酰胆碱和去氧肾上腺素分别评估各组大鼠的内皮功能和血管反应性。采用实时荧光定量核酸扩增检测系统(QPCR)和western blot方法检测各组大鼠尾动脉血管组织和人主动脉血管平滑肌细胞T/G HA-VSMCs中Notch信号通路相关基因、sGC编码基因及血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)的表达。采用染色质免疫共沉淀技术和荧光素酶报告系统鉴定Notch3与GUCY1A1启动子的结合位点和GUCY1A1启动子的转录活性。结果:大蒜素处理后的7 d和14 d,SHR+Allicin组大鼠的尾动脉血管收缩压和血管反应性明显低于SHR组(P<0.01),而内皮功能则显著高于SHR组(P<0.01)。大蒜素能够诱导高血压大鼠血管中的Notch3和sGC编码基因GUCY1A1的表达(P<0.01),且两者在SHR和SHR+Allicin大鼠血管中表达均呈显著正相关(SHR:r=0.507 6,P=0.022 3;SHR+Allicin:r=0.467 2,P=0.037 8)。大蒜素处理T/GHA-VSMCs细胞导致Notch3、GUCY1A1、VEGR和VEGFR的表达升高(P<0.01),而干扰Notch3则抑制这种升高现象(P<0.01)。大蒜素能够诱导GUCY1A1启动子-944 bp位点和Notch3-RBPJ转录复合物结合,并增强GUCY1A1启动子活性,而干扰Notch3或缺失突变-944 bp处的结合位点均会阻遏大蒜素对Notch3和GUCY1A1启动子结合的诱导作用。结论:大蒜素可能通过诱导Notch3信号、促进其与GUCY1A1启动子的结合并增强其转录活性,最终提高sGC表达并保护血管内皮从而发挥降血压的作用,为大蒜素治疗高血压提供新的理论依据。

不同绵羊品种的产羔数候选基因遗传效应分析

【目的】研究不同绵羊品种产羔数候选基因的遗传效应。【方法】以4个绵羊品种(多浪羊468只、德国美利奴羊152只、萨福克羊157只、湖羊600只)为样本,利用扩增受阻突变体系PCR技术(ARMS-PCR)、限制性内切酶片段长度多态性技术(RFLP)等方法,检测4个繁殖力候选基因COIL、FSHR、GUCY1A1、BMPRIB遗传多态性,并分析其多态性与产羔数相关性。【结果】COIL基因g.7321466G>C位点在多浪、德国美利奴、萨福克、湖羊上突变纯合GG基因型频率在0.3左右,在多浪羊中CC基因型极显著高于CG、GG,CG基因型极显著高于GG;德国美利奴羊中GG基因型显著高于CG、CC,CG基因型显著高于GG;在萨福克、湖羊中GG、CG基因型极显著高于CC。BMPRIB基因在湖羊中BB、B+基因型产羔数极显著高于++,但其他品种效果不理想。FSHR基因g.75320741C>T位点、CUCY基因g.43266624G>A位点对绵羊产羔数影响较低。【结论】COIL基因g.7321466G>C位点有望替代BMPRIB基因成为新的产羔数性状选育的分子标记。