基于液质联用法测定嘧啶核苷类化合物GY005在SD大鼠体内的药代动力学实验研究

建立LC-MS/MS法测定嘧啶核苷类化合物GY005在大鼠血浆中的浓度,并应用于大鼠体内的药代动力学研究。以特非那定为内标,经乙腈-甲醇沉淀蛋白后,采用ACE 5 C4 column(50 mm×2.1 mm,2.5μm)色谱柱,以0.1%甲酸水和0.1%甲酸乙腈为流动相,进行梯度洗脱分离,流速0.7 mL·min^(-1),进样量10μL;采用电喷雾离子源(ESI),正离子扫描方式,MRM扫描,分别以m/z 445.15→270.10和m/z 472.40→436.40作为化合物GY005和内标(特非那定)的质谱检测条件。大鼠灌服2 mg·kg^(-1)化合物GY005后,不同时间点取样测定其血浆浓度,计算药代动力学参数。雌雄SD大鼠单次静脉注射2 mg·kg^(-1)的受试品后,化合物GY005在雄性大鼠体内的暴露量(AUC_(last))为(228±44)h·ng·mL^(-1),消除半衰期(T_(1/2))为(0.30±0.01)h,清除率(CL)为(149±29)mL·min^(-1)·kg^(-1)。化合物GY005在雌性大鼠体内的暴露量(AUC_(last))为(215±158)h·ng·mL^(-1),消除半衰期(T_(1/2))为(0.32±0.03)h,清除率(CL)为(226±162)mL·min^(-1)·kg^(-1)。雌雄间暴露水平相当,没有显著性差异。这个方法具有简便、灵敏、快捷,适用于化合物GY005的药代动力学研究。

黄绿叶水稻光温敏核不育系gy157S的开花习性

【目的】探明水稻黄绿叶光温敏核不育系gy157S的开花习性,为特色水稻不育系在新品种选育中的应用提供理论依据。【方法】以目前应用比较广泛的实用性水稻光温敏两系不育系C815S为对照,对比研究水稻黄绿叶光敏温不育系gy157S的花粉败育程度、开花习性、柱头外露率等开花习性。【结果】gy157S单株和单穗的开花持续期分别为15.9 d和10.2 d,在11:00—13:00有明显的开花高峰期,午前花率达60.86%,开颖角度为34.0°,自然条件下柱头外露率为65.0%,与C815S相似。gy157S的花粉不育度为99.97%~100.00%,优于C815S的99.73%~99.98%。【结论】gy157S开花习性良好,在11:00—13:00期间进行赶粉制种效率较高,在水稻两系杂交种生产中具有较大的应用价值。

水稻光温敏不育系gy157S的叶色表型鉴定与候选基因分析

为探明光温敏不育系gy157S黄绿叶基因gy157S(t)调控水稻叶色的分子机制及应用潜力,本研究对水稻光温敏核不育系gy157S进行不同温度处理,观察其表型、叶绿素含量以及叶肉细胞的变化情况,并对其进行遗传分析、基因定位和候选基因分析。表型鉴定结果发现,与对照C815S相比,20℃条件下gy157S叶片呈现黄绿色表型,光合色素含量极显著降低,叶绿体发育缺陷严重;30℃条件下gy157S叶片呈现淡绿色表型,光合色素含量仍然显著降低,仍有部分叶绿体发育畸形。遗传分析结果表明,gy157S的黄绿叶表型受一对隐性核基因控制;群体分离分析(BSA)和连锁分析结果将该基因定位于第3号染色体RM15678和RM15824之间,物理距离为2.4Mb;候选基因功能分析、测序和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,编码铁氧还蛋白OsFdC2的基因OsR498G0306815500.01在第7外显子上存在单核苷酸多态性(SNP)变异,导致编码氨基酸发生改变,可能是引起黄绿叶突变表型的位点。本研究结果为阐明gy157S(t)基因对叶绿体发育和叶绿素合成的分子调控机制奠定了基础。

水稻5.3 kb Gt1启动子克隆以及Gt1启动子引导优质大豆球蛋白Gy7基因表达载体构建

以越光水稻基因组为模板,在成功克隆5.3 kb谷蛋白Gt1基因5’上游和信号肽序列基础上,将其定向插入到pCAMBIA1300质粒中,构建了中间载体p1300-5.3 kb Gt1;再将富含赖氨酸的优质大豆球蛋白Gy7全基因序列及cDNA编码序列分别定向插入p1300-5.3 kb Gt1质粒上Gt1基因信号肽下游,再在2个载体Gy7全基因序列及cDNA编码序列下游都正向插入Gt1 3’UTR,完成由5.3 kb谷蛋白Gt1基因启动子及信号肽引导的大豆球蛋白Gy7基因2种表达载体的构建。此试验为利用转基因技术改良水稻稻米营养品质以及将水稻种子作为生物反应器等方面研究奠定了基础。

南农87C-38大豆优质11S球蛋白Gy7基因克隆及序列分析

大豆种子不仅富含蛋白质,而且赖氨酸含量较高,利用大豆高赖氨酸基因能够弥补谷类作物种子赖氨酸含量的不足。运用现代分子生物学技术,从高蛋白大豆南农87C-38中克隆11S球蛋白Gy7全基因及cDNA序列。经生物公司测序后,利用vectorNTI软件将所克隆的Gy7全基因及cDNA序列与Genbank(AF319776和AF319777)报道的序列进行比对分析,同源性分别为99%和99.6%。序列比对结果显示,Gy7基因cDNA与Genbank报道的序列之间所有的核苷酸差异都位于第3外显子。由此推测,第1、第2和第4外显子编码的氨基酸对于G7多肽形成特定高级结构可能具有非常重要的作用,它们在进化过程中受到的选择压力可能比第3外显子更强。根据遗传密码表推测,克隆的Gy7与Genbank报道的cDNA序列所编码的多肽,两者存在2个氨基酸组成的差异。大豆球蛋白Gy7优质基因的获得为今后利用转基因技术改良水稻、小麦等谷类作物的营养品质奠定了基础。

GY66阴道微生态形态学全自动检测仪临床应用评价

背景阴道微生物形态学检测是阴道感染性疾病的主要检测方法,以人工镜检为主,耗时较长且主观偏倚明显。基于深度学习的全自动阴道微生态检测仪可有效解决现有问题,但投入使用前需要严谨的对照试验进行验证。目的 分析GY66形态学全自动检测仪在阴道微生态检测中的有效性。方法 收集2020年12月1日-2021年7月31日解放军总医院第一医学中心妇产科门诊患者的阴道分泌物样本303例,分别采用全自动GY66阴道微生态检测仪与革兰染色人工镜检进行滴虫、霉菌、线索细胞及清洁度比较。以人工镜检结果为金标准,评价全自动GY66检测仪阴道微生态有形成分检测的性能。结果 全自动GY66检测仪与人工镜检的霉菌、线索细胞、滴虫总体检出率差异无统计学意义(P>0.05)。全自动GY66检测仪的霉菌、滴虫、线索细胞和清洁度检出的总符合率分别为98.68%、99.67%、99.67%和97.69%。全自动GY66检测仪与人工镜检霉菌、线索细胞、滴虫和清洁度的检测结果一致性程度强(Kappa值分别为0.961、0.981、0.939和0.950),差异无统计学意义。抗干扰能力及交叉污染试验中高浓度阳性样本均不会影响下一个空白标本的结果。抽检3份样本各做3次GY66仪器镜检,重复性检测结果一致。结论 GY66全自动阴道微生态检测仪进行阴道分泌物检查具有良好的有效性,可为临床提供可靠准确的镜检结果。

海洋假单胞菌GY-1菌株的抗菌作用及其胞外抗菌蛋白的分离纯化

采用对峙培养法和牛津杯法测定海洋假单胞杆菌(Pseudomonas)GY-1菌株和发酵液的抑菌作用。结果表明:GY-1菌株和发酵液对小麦根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)、禾谷镰刀病菌(Fusarium graminearum)、菠菜早疫病菌(Alternaria solania)、斑点落叶病菌(Alternaria alternata)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)和小麦叶枯病菌(Alternaria tenuis Nees)等植物病原真菌有较强的抑制作用。发酵液采用硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow柱层析、Sephadex G-75凝胶层析,以小麦根腐病菌为指示菌进行活性追踪和SDS-PAGE电泳纯度跟踪检测,纯化出一种对小麦根腐病菌具有明显抗菌作用的抗菌蛋白,其分子质量约为70.9kD。

烤烟新品系GY8的选育及其特征特性

为选育高产优质烤烟新品种(品系)应用于生产,推动新老品种的更替,促进烤烟高产优质发展,以MSK326为母本,自育花培株系GDH88为父本组配选育出细胞质雄性不育杂种一代GY8。该品系早期生长势强,田间整齐一致,上部叶开片好,农艺性状整体明显优于对照K326,经济性状显著高于对照。该品系对气候斑点病抗性好,抗黑胫病,中抗赤星病。烟叶各主要成分含量适宜,内在化学成分协调;外观质量、物理特性和吸食品质与对照K326相当,能较好兼顾产量和质量,2011年已通过相关部门的农业评审和工业评价。

珠江水体系中鞘氨醇单胞菌GY2B降解菲的特性研究

生物降解是多环芳烃从环境中去除的主要途径,鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)GY2B在实验室的人工环境中对多环芳烃菲有较高的降解效率,考察了鞘氨醇单胞菌GY2B在珠江水体系中对菲的降解特性。结果表明:GY2B对菲能起到很好的降解效果,灭菌珠江水对GY2B降解菲的促进作用明显;在无机盐体系中添加适量未灭菌的天然珠江水(10%)能促进GY2B对菲的降解;但当添加的天然珠江水过多时,对GY2B降解菲有一定的抑制作用。秸秆固定化GY2B菌能有效解除天然珠江水中土著菌对GY2B降解菲的抑制作用,18 h能降解天然珠江水中绝大部分的菲,秸秆固定化菌GY2B能多次重复投加使用并保持较好的降解效果,重复使用6次的平均菲降解率在96%以上,可实际应用于多环芳烃污染水体的治理和修复。

GY油田储层成岩储集相分类及测井响应特征

针对GY油田长6和长4+5油层组特低渗储层成岩过程中压实和胶结作用强烈,成岩阶段和成岩作用复杂的特点,通过研究其储层成岩过程中岩性和物性特征、孔隙演化的基本规律以及孔隙类型、孔隙结构特征等,在研究区划分出了4种类型的成岩储集相,并确定了各类成岩储集相测井曲线响应特征。通过实例分析了特低渗储层不同成岩储集相的测井曲线异常差异,并有效划分了成岩储集相类别,为油田有利含油区块筛选及后期的高效开发提供了依据。

Streptomyces venezuelae GY1产聚乙烯醇降解酶的培养条件

放线菌StreptomycesvenezuelaeGY1产生的聚乙烯醇(PVA)降解酶是一种诱导酶.以4种不同类型的PVA为唯一碳源时,该菌株单位质量细胞产酶能力比以糖类物质为唯一碳源时提高10倍以上.聚合度和醇解度最高的PVA1799是该菌株产生PVA降解酶的适宜底物,其浓度为1gL-1时,PVA降解酶的产量为120u/g(细胞).培养基中PVA1799浓度由1gL-1上升到5gL-1时,该菌株单位质量细胞产酶能力下降73%,表明PVA1799浓度过高会抑制产酶.GY1菌株产酶的最适温度和pH分别为30℃和7.0.在GY1菌株生长过程中控制以下条件有利于产生PVA降解酶:(1)保持培养体系中较高的溶氧水平;(2)在氮源中补充NO-3;(3)在一定浓度范围内添加MgSO4·7H2O、CaCl2、MnSO4、BaCl2、ZnSO4、FeSO4·7H2O和CuSO4等金属盐.Pseudomonassp.产生的PVA降解酶能够作用伯醇或仲醇类化合物,以这些伯醇或仲醇类化合物代替培养基中的PVA,不能诱导GY1菌株产生PVA降解酶;而在培养基中有PVA存在时,再添加0.5gL-1的3戊醇和环己醇能够明显促进PVA降解酶的产生(单位质量细胞产酶能力分别提高了21%和32%).

营养干预对高+Gy暴露小鼠脑功能及相关生化指标的影响

目的研究高 +Gy暴露对小鼠迷宫行为和脑功能相关生化指标的影响和营养干预的效果。 方法昆明种雄性小鼠经迷宫训练后分为对照组 (A组 )、+Gy组 (B组 )、+Gy营养干预组 (C组 ) ;A组不予 +Gy暴露 ;B组、C组均给予 + 1 0Gy暴露 8min ,B组暴露前 3h蒸馏水灌胃 ;C组实验前 1d给予强化VitB6 的饮水 ,暴露前 3h混合氨基酸液灌胃 ;3组动物均记录迷宫实验成绩 ,检测血清氨基酸f、脑组织单胺类递质含量和γ 谷氨酰转移酶活性。结果 +Gy暴露后迷宫实验成绩下降 ,并有行为异常 ,脑内NE明显降低 ,其他单胺类递质均显著升高 (P <0 0 5 ) ,表明脑功能受影响 ;营养干预后迷宫行为改善 ,生化指标改变有所缓解。结论高 +Gy暴露会引起中枢递质相关的生化营养物质代谢紊乱并影响脑功能 。

利用硅酸盐细菌(GY03)制备煤矸石肥料的研究

针对贵州存在大量废弃的煤矸石造成了严重的环境污染,研究了利用硅酸盐细菌(GY03)作用于煤矸石将其中难溶于水的磷、钾转化为能被植物吸收的有效磷、速效钾来制备煤矸石肥料,并研究了煤矸石粒径、体系pH、培养时间、培养温度及体系湿度对制备煤矸石肥料的影响。研究发现:当煤矸石的粒径在160目、体系pH为7.0～8.0、最佳培养时间为40d、最佳培养温度为28～32℃和体系在湿润或淹水情况下煤矸石肥料中速效钾、有效磷含量分别比原煤矸石增加275%和395%。

GY法浮钨新工艺在柿竹园选厂的工业实践

对ＧＹ法浮钨新工艺在柿竹园１０００ｔ／ｄ选厂一年多工业实践作了简要回顾。对影响黑白钨粗选、加温精选、黑钨细泥浮选等作业的主要工艺因素如改性水玻璃、ＧＹ药剂、水玻璃混合剂、精选次数、矿浆浓度等的作用进行初步探讨，提出几点建议。

中等剂量(20Gy)辐照对大鼠脑内c-fos表达的早期影响

目的 探讨电离辐射对大鼠脑内Fos蛋白表达的早期影响。 方法 应用大鼠半脑 2 0Gy照射模型 ,免疫组织化学方法 ,观察Fos蛋白在脑内的表达及分布情况。 结果 受照射后 2 4h、1周大鼠脑内各部位Fos蛋白表达均明显减少 ,随着时间的延长 ,其Fos免疫反应性细胞数量逐渐增加 ,照射后 4周 ,延髓、脑桥内Fos免疫阳性细胞数量恢复并超过正常对照组水平 ,但中脑、间脑及端脑内未恢复到正常对照组水平。 结论 结果提示 :中等剂量辐射后早期 ,脑内许多核团的神经细胞功能活动可能受到抑制 。

300Gy^60Coγ辐射处理对三色堇开花期和花朵性状的影响

通过对三色堇6个品种种子进行300 Gy60Coγ辐射处理。结果表明,在M1对不同品种三色堇的开花期和花朵性状有不同程度的影响。纯黄、玫红、笑语中度蓝色、阿特拉斯绯红色4个品种处理后的开花时间均比对照迟,笑语中度蓝色推迟了15 d,而黄斑、宾哥纯黄2个品种则比对照早10多d;多数品种的株高、花冠直径和花柄长均表现为处理大于对照,而冠幅则表现为处理比对照小。从M1看,300 Gy60Coγ辐射处理对黄斑、宾哥纯黄2个品种变异效果比较好。

养殖环境中耐氟喹诺酮类药物大肠杆菌gyrA基因的检测与序列分析

该文探讨从养殖场动物、环境、饲养员等分离的大肠杆菌耐氟喹诺酮类药物的靶位基因gyrA突变特征.对养殖环境中分离的8株大肠杆菌进行临床常用氟喹诺酮类药物的耐药性分析、PCR扩增gyrA基因并测序,并采用DNASTAR软件对gyrA基因的氟喹诺酮耐药决定区进行生物信息学分析.结果表明:养殖场环境中分离的菌株编号为1,6和8的3株大肠杆菌对环丙沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星敏感,菌株2,3,4,5和7的5株大肠杆菌对环丙沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星耐药;氨基酸序列分析发现,敏感菌株氨基酸位点未发生突变或83位发生单突变;耐药菌株的突变发生在83位Ser→Leu替代和87位Asp→Asn替代,且发生氨基酸双替代的菌株均为高度耐药菌株.表明不同来源的耐氟喹诺酮类药物的大肠杆菌gyrA基因的氨基酸变异具有多种类型,该研究将更好地诠释养殖场大肠杆菌的氟喹诺酮类耐药机制.

GY70型机械密封基本性能试验及其分析

对GY70型机械密封的基本性能进行了试验研究,得出了弹簧比压、介质压力以及转速对机械密封泄漏量和摩擦功耗的影响规律。试验研究发现,运行中的机械密封存在一个最佳的密封工况点,通过对弹簧比压的调节与控制,可以实现这一工况。

大柴胡汤对8Gy照射大鼠小肠移行性肌电复合波（MMC）的影响

正常大鼠小肠移行性肌电复合波（ＭＭＣ）由Ⅰ～Ⅳ个时相组成，它们分别持续３．０～４．０、８．０～１２．０、３．０～４．０、和０．５～１．０ｍｉｎ，周期为１０～１５ｍｉｎ。大鼠在８Ｇｙ照射后１ｈ至７天大多数大鼠小肠ＭＭＣ消失，仅有Ⅰ或Ⅱ时相、并有分节律。在照后１ｈ至３天少数大鼠小肠出现ＭＭＣ周期，其中Ⅱ时相明显缩短（Ｐ＜０．０１～０．００１）或延长（Ｐ＜０．０５），Ⅲ相或周期缩短（Ｐ＜０．０５～０．０１）。大柴胡汤能促使８Ｇｙ照射大鼠小肠ＭＭＣ各时相及周期基本恢复正常。提示大柴胡汤具有调节小肠运动紊乱的作用，这可能是减轻８Ｇｙ照射引起大鼠腹泻的原因之一。

吸附剂GY-1对牛舍内NH_3吸附性能的研究

在春、夏、秋、冬4季的密闭牛舍内均匀铺撒10kg(8m2)的吸附剂GY-1,用便携式氨气检测仪测定各季节连续8hNH3浓度的变化,并与无吸附剂的对照试验进行比较,研究了不同季节下吸附剂GY-1对NH38h的吸附性能。结果表明,各季节10kg GY-1吸附8h可极显著降低牛舍中NH3的浓度(P<0.01)。在春、夏、秋、冬4个季节,1kg GY-1 8h分别可以吸附NH32.12,3.14,1.09,0.69g。吸附总量随着季节间平均浓度和平均室温的增加而增加,随着吸附时间的增加而迅速降低,平均浓度对吸附总量的影响要高于平均温度对吸附总量的影响。