Gab1蛋白在肝细胞癌组织中的表达及与临床预后的关系

目的探讨生长因子受体相关结合蛋白1(growth factor receptor binding protein-associated binder1,Gab1)蛋白在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及对患者临床预后的影响.方法收集2005年1月至2014年2月邯郸市中心医院存档的70例行根治性手术的HCC患者资料,所有患者均未进行过相关放射治疗或化学治疗.同时选取不典型增生和正常肝组织各30例为研究对象.采用免疫组织化学(EnVisionTM)法检测Gab1蛋白在上述3种组织中的表达,并分析其与HCC临床病理因素及HCC患者4年生存率的关系.结果 Gab1蛋白在正常肝组织、不典型增生及HCC组织中阳性表达率分别为0.00%(0/30)、33.33%(10/30)和58.57%(41/70),差异有统计学意义(χ^2=30.78,P<0.001).Gab1蛋白的阳性表达率与患者年龄、性别、组织分型及病灶形式无关(P>0.05),但与肿瘤直径、淋巴结转移、MCM7蛋白表达及临床TNM分期有关(P<0.05).Gab1阳性表达的HCC患者4年生存率为5.26%,阴性表达者为25.00%,差异有统计学意义(χ^2=3.96,P=0.04).结论 Gab1蛋白的过表达参与了HCC的发生发展,其表达水平可作为预测HCC患者4年生存预后的参考指标.

接头蛋白Gab1的结构及功能研究进展

Gab1蛋白属于接头蛋白Gab家族,该家族蛋白因能与生长因子受体结合蛋白2(Grb2)相结合而得名。作为接头蛋白,Gab1蛋白能被多种受体酪氨酸激酶或非受体酪氨酸激酶激活,接受胞外多种生长因子、细胞因子和一些T/B细胞抗原受体的刺激,介导PI3K/Akt和Ras/MAPK等多条信号转导途径,具有促进细胞生长、迁移、调节免疫等多种生物学功能,与糖尿病、肿瘤、心血管疾病等的发生发展密切相关。

接头蛋白Gab1结构、功能及与肿瘤的关系

肿瘤的发生、侵袭、转移是一个涉及多种基因及其产物的复杂过程,异常的酪氨酸磷酸化在其中发挥了重要作用,研究表明接头蛋白Gab（Grb2-associated binder,Grb2相关结合蛋白）家族正是通过参与异常的酪氨酸磷酸化参与肿瘤过程。

微小RNA-30a诱导人心肌细胞凋亡及其机制研究

目的探讨心力衰竭患者循环中微小RNA(miR)-30a的表达水平及诱导人心肌细胞凋亡的可能分子机制。方法采集心力衰竭患者和健康志愿者的血清用于检测miRNAs的表达水平。体外实验,将人心肌细胞分为3组:空白对照组(MOCK组)、空质粒组(NC组)和转染miR-30a模拟物组(miR-30a组)。用脂质体2000(Lipofectamine2000,Li2)转染miR-30a模拟物(终浓度为100 nmol/L)。采用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组的miR-30a的表达水平。用细胞计数-8试剂盒(CCK-8)检测各组细胞增殖。用流式细胞仪和Tunel法检测各组心肌细胞的凋亡并检测各组细胞的Caspase-3活性。用荧光素酶报告基因检测法检测miR-30a和接头蛋白Gab1(Gab1)的相互作用。用蛋白免疫印记法(WB)检测各组增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki67和核转录因子Kappa B(NF-κB)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、以及Gab1、β-肌动蛋白(β-actin)的表达水平。结果心力衰竭患者血清中的miRNA-30a表达水平显著高于健康志愿者(P<0.05)。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)结果显示miR-30a组的人心肌细胞miR-30a的表达显著增高相对于NC组(P<0.05)。CCK-8结果显示miR-30a组OD值低于MOCK组和NC组(P<0.05)。流式细胞仪和Tunel结果显示miR-30a过度表达的人心肌细胞凋亡高于MOCK组和NC组(P<0.05)。Caspase-3活性检测显示miR-30组Caspase-3活性显著高于MOCK组和NC组(P<0.05)。荧光素酶报告基因检测法报告miR-30a与Gab1有互补配对序列。WB结果显示miR-30a组PCNA、ki67、Bcl-2、Gab1表达下降,NF-κB、Bax表达上升(P<0.05)。结论 miR-30a通过下调Gab1抑制人心肌细胞增殖和诱导人心肌细胞凋亡。