母婴分离对大鼠成年后抑郁行为及海马Gabra6蛋白表达的影响

目的探讨早期母婴分离导致大鼠成年后抑郁的机制及早期应激对成年后海马Gabra6亚基表达的影响。方法将8只Sprague Dawley孕鼠分娩的64只新生鼠随机分为母婴分离(MS)组和对照组。MS组幼鼠出生后第2～15天进行母婴分离,每天固定分离6 h。之后对其进行体重评估,行为学检测包括糖水偏爱、新环境进食抑制、强迫游泳实验,膜片钳实验检测自发动作电位,Western blot实验检测Gabra6蛋白表达。结果与对照组比较,MS组成年后的体重和糖水偏爱度差异无统计学意义(P> 0. 05),而在新环境进食抑制的进食潜伏期和强迫游泳不动时间均明显延长(P <0. 05)。电生理实验显示MS组海马CA1区锥体神经元的自发动作电位发放频率降低(P <0. 05)。Western blot实验显示,MS组海马的Gabra6蛋白表达降低(P <0. 05)。结论生命早期的不良应激可导致成年后出现抑郁样症状,海马区域Gabra6表达的异常可能参与了这一过程。

全面性癫癎伴高热惊厥附加症基因定位及GABRA6基因测序研究

目的 对全面癫伴高热惊厥附加症 (GEFS+ )家系进行基因定位 ,并对候选基因进行测序研究。方法 用连锁分析的方法对GEFS+ 家系进行研究 ;设计GABRA6外显子 内含子交界处全部 9对内含子引物 ,采用Sanger双脱氧链终止法 ,对GABRA6PCR测序。 结果 在 5 q34区域最大LOD值 3.815。GABRA6基因测序显示外显子 8有一C/G多态性。结论 GEFS+ 症致病基因在 5 q34区域取得了肯定的连锁关系。在该研究的两家系未发现GABRA6基因突变 ;

良性家族性婴儿癫痫的致病基因谱研究

目的探讨我国良性家族性婴儿癫痫（BFIE）家系的致病基因谱。 方法收集2006年10月至2017年6月在北京大学第一医院等4家医院就诊的BFIE家系临床资料和外周血DNA，首先采用Sanger测序方法筛查PRRT2基因突变，对于未发现PRRT2基因突变的家系再采用靶向捕获二代测序癫痫基因检测包对其候选致病基因进行突变筛查。 结果共收集71个BFIE家系（包括227例受累者），其中52个家系发现基因突变（52/71，73.2%）。43个家系为PRRT2基因突变（43/71，60.6%），移码突变见于40个家系（热点突变c.649_650insC和c.649delC分别见于29个家系和6个家系），无义突变、终止密码子突变和基因片段缺失各见于1个家系，c.560_561insT和c.679C〉T为未报道的新突变；5个家系为SCN2A基因错义突变（c.668G〉A、c．752T〉C、c.1307T〉C、c.4835C〉G和c.1737C〉G），其中c.752T〉C、c.1307T〉C、c.4835C〉G和c.1737C〉G为未报道的新突变；3个家系为KCNQ2基因错义突变（c.775G〉A、c.237T〉G和c.1510C〉T），其中c.237T〉G和c.1510C〉T为未报道的新突变；1个家系携带未报道的GABRA6基因突变（c.523G〉T）。在71个BFIE家系中，有16个家系出现阵发性运动诱发的运动障碍（PKD）受累者，进一步诊断为婴儿惊厥伴阵发性舞蹈手足徐动症（ICCA）家系，其中15个ICCA家系发现PRRT2基因突变（15/16，93.8%），余ICCA家系未发现致病基因。 结论BFIE家系基因突变检出率高，致病基因包括PRRT2、SCN2A和KCNQ2基因，其中PRRT2是BFIE的主要致病基因。GABRA6可能是BFIE新的致病基因。

1岁前起病的良性家族性癫痫基因突变谱研究

目的 1岁前起病的良性家族性癫痫包括良性家族性新生儿癫痫(Benign familial neonatal epilepsy,BFNE)、良性家族性新生儿-婴儿癫痫(Benign familial neonatal-infantile epilepsy,BFNIE)和良性家族性婴儿癫痫(Benign familial infantile epilepsy,BFIE)。研究对我国1岁前起病的良性家族性癫痫家系进行基因突变分析,探索其基因突变谱。方法收集2006年9月—2018年1月在北京大学第一医院儿科就诊的1岁前起病的良性家族性癫痫家系的临床资料和外周血DNA。对BFIE家系首先采用Sanger测序方法筛查PRRT2基因突变;对于BFNE和BFNIE家系以及Sanger测序方法未发现PRRT2基因突变的BFIE家系,采用靶向捕获二代测序癫痫基因检测包进行基因突变筛查。结果共收集89个1岁前起病的良性家族性癫痫家系,其中包括4个BFNE家系、7个BFNIE家系和78个BFIE家系。基因检测发现68个家系有相关基因突变(76.4%),其中50个家系为PRRT2基因突变(热点突变c.649dup C和c.649del C分别见于32个家系和6个家系),9个家系为KCNQ2基因突变,8个家系为SCN2A基因突变,1个家系为GABRA6基因突变。在4个BFNE家系中,发现3个家系为KCNQ2突变,1个家系未发现致病基因;在7个BFNIE家系中,发现3个家系为KCNQ2突变,3个家系为SCN2A突变,1个家系为PRRT2突变;在78个BFIE家系中,有58个家系发现基因突变(74.4%),其中49个家系为PRRT2突变(62.8%),5个家系为SCN2A突变,3个家系为KCNQ2突变,1个家系携带未报道的GABRA6突变;其余20个BFIE家系未发现致病基因。在78个BFIE家系中,有18个家系进一步诊断为婴儿惊厥伴阵发性舞蹈手足徐动症家系,其中17个发现PRRT2突变(17/18,94.4%),其余1个家系未发现致病基因。结论 KCNQ2、SCN2A和PRRT2基因是我国1岁前起病的良性家族性癫痫的重要致病基因,基因突变检出率高。KCNQ2是BFNE的主要致病基因,PRRT2是BFIE的主要致病基因,KCNQ2和SCN2A基因突变在BFNIE中常见。GABRA6可能是BFIE新发现的致病基因。发现家系致病基因对指导家庭遗传咨询及治疗具有重要作用。