GABRB2基因启动子区单核苷酸多态性与精神分裂症的关联

目的精神分裂症是一种多基因遗传性重型精神病。我们前期工作已经发现γ-氨基丁酸(GABA)A型受体β2亚基基因(GABRB2)内含子8和9内多个单核苷酸多态性(SNPs)与精神分裂症相关。本项研究探GABRB2基因启动子区的多态性与精神分裂症的相关性。方法采用特异性PCR引物扩增GABRB2基因启动子区(包含多个SNPs),并采用Sanger DNA测法对扩增的PCR产物进行序列测定,以获得待检SNPs的基因型;采用SHEsis软件进行Hardy-Weinberg平衡分析和SPSS软件进行SNPs基因型和等位基因频率在对照组和疾病组之间的差异分析。结果对172例精神分裂症患者和167例正常人对照分析结果发现rs3811996与疾病显著相关:其杂合基因型(A/G)频率在疾病组显著低于对照组;在男性样本中,其A/G基因型和次要等位基因G频率均显著低于对照组。结论本项研究表明GABRB2基因启动子区SNP rs3811996可能为男性偏执型精神分裂症的保护因子,支持了GABRB2基因对精神分裂症的易感性。

GABRB2基因启动子区DNA甲基化与精神分裂症及其治疗的关系

目的探讨γ-氨基丁酸A型受体β2亚基(gamma-aminobutyric acid type A receptor beta2 subunit,GABRB2)基因启动子区DNA甲基化水平与精神分裂症及其药物治疗的关系。方法纳入精神分裂症患者53例和正常对照53名,采用Mass ARRY Epi TYPER DNA甲基化分析技术检测所有受试者外周血GABRB2基因启动子区DNA甲基化水平。患者组中12例在药物治疗8周后再次检测该基因启动子区DNA甲基化水平。结果患者组与对照组外周血GABRB2基因启动子区总甲基化和各Cp G位点的甲基化水平组间差异无统计学意义(P>0.05)。经性别分层分析,患者组男性Cp G_28位点的甲基化水平较对照组男性降低[(0.215±0.084)vs.(0.264±0.103),P<0.05]。治疗后患者组外周血GABRB2基因启动子区总DNA甲基化水平较治疗前降低[(0.088±0.037)vs.(0.121±0.063),P<0.01],治疗前后各Cp G位点甲基化水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论抗精神病药物治疗可降低精神分裂症患者外周血中GABRB2基因启动子区DNA甲基化水平,提示基因启动子区DNA甲基化可能参与抗精神病药物治疗的作用机制。

全面性癫癎伴热性惊厥附加症家系GABRB2基因测序研究

目的对全面性癫伴热性惊厥附加症(GEFS+)侯选基因GABRB2进行测序研究。方法设计GABRB2外显子-内含子交界处内含子引物,采用PCR直接测序法,对一GEFS+家系GABRB2编码区全部11个外显子进行测序分析。结果患儿GABRB2基因外显子2,mRNA第133个碱基发现一新的C/G多态性。结论该家系未发现GABRB2基因编码区的突变;所显示的mRNA的单个碱基多态性对以后其他癫家系的连锁分析及GABRB2 mRNA、基因功能研究均有重要意义。

GABRB2基因rs194072和rs187269位点遗传多态性与首发精神分裂症及利培酮疗效的关联性研究

目的探讨γ-氨基丁酸β2受体(GABRB2)基因多态性与首发精神分裂症及其利培酮疗效的相关性。方法采用SYBR Green I荧光等位基因特异性实时PCR基因分型法完成277例精神分裂症患者(研究组)和315例正常对照者(对照组)的GABRB2基因rs194072和rs187269两个位点多态性的测定。研究组采用利培酮治疗8周,于治疗前及治疗后第8周末用阳性和阴性综合征量表(PANSS)评估疗效。结果两组rs194072(T/C)和rs187269(T/C)位点的基因型与等位基因频率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组CC单倍型频率高于对照组(P=0.003),TT单倍型频率低于对照组(P=0.004)。rs187269位点利培酮治疗有效组与无效组在基因型(P=0.003)与等位基因(P=0.004)频率的差异有统计学意义。结论 GABRB2基因rs194072和rs187269多态性可能与首发精神分裂症有关联,rs187269与利培酮片治疗的个体化差异有关联。

GABRB2基因变异相关癫痫的临床特点

目的分析GABRB2基因变异相关癫痫的临床表型特点。方法回顾性研究,以2016年4月至2018年12月北京大学第一医院儿科诊治的8例GABRB2基因变异阳性的癫痫患儿为研究对象,对其临床表现、脑电图、头颅影像学特点、治疗及随访结果进行总结。结果8例均携带不同的GABRB2基因杂合变异,其中2例为遗传性变异,6例为新生变异。7例患儿携带国际未报道的新变异。8例患儿(男4例、女4例)起病年龄为1日龄~22月龄,中位起病年龄为6月龄,其中0~<1月龄2例,1~6月龄2例,7月龄~1岁2例,>1岁2例。癫痫发作类型多样,其中局灶性发作6例,全面强直阵挛发作4例,肌阵挛发作3例,痉挛发作2例。8例患儿中6例有发育落后。8例患儿中,3例为Dravet综合征,2例为热性惊厥附加症,2例为婴儿痉挛症,1例为大田原综合征。6例患儿发作有热敏感特点,且病程中均有癫痫持续状态史。末次随访年龄为8月龄~11岁,其中5例癫痫发作已缓解,2例仍有发作,1例因反复癫痫持续状态合并真菌感染已死亡。结论GABRB2基因变异导致的癫痫多数在婴儿期起病,癫痫发作类型多样,表型轻重不一,多数患儿发作有热敏感特点,易发生癫痫持续状态,且有不同程度的发育落后。

围绝经期小鼠抑郁样行为及相关脑区GABA_A受体的改变

目的研究围绝经期小鼠抑郁样行为及相关脑区GABAA受体的改变。方法采用2、8、12m雌性C57BL/6小鼠,采用悬尾实验、强迫游泳实验检测小鼠不动时间的变化,研究小鼠抑郁样行为的改变。进一步,采用实时定量PCR方法检测海马,前额叶皮质中GABAA受体Gabra1、Gabrb2及Gabrg2的mRNA改变。结果三组小鼠在悬尾实验、强迫游泳实验中不动时间无明显差异(P>0.05);海马、前额叶皮质中Gabra1、Gabrb2在12m组小鼠明显降低(P<0.05);海马中Gabra1水平在3组之间呈逐渐下降,而前额叶皮质中Gabra1,海马、前额叶皮质中Gabrb2在8m组呈一定程度上升,至12m时明显下降(P<0.05);海马及前额叶皮质中Gabrg2在3组之间无明显差异(P>0.05)。结论无应激状态下,围绝经期小鼠抑郁样行为无明显变化;小鼠海马及前额叶皮质中Gabrg2可能参与该行为过程;海马、前额叶皮质中Gabra1,Gabrb2在围绝经期明显下降,可能参与应激诱导的围绝经期抑郁易感性。

文拉法辛临床疗效与γ-氨基丁酸β2受体基因的相关分析

目的探索γ-氨基丁酸β2受体(GABRB2)基因多态性与五羟色胺-去甲肾上腺素重吸收抑制剂(Serotonin and Norepinephrine Reuptake Inhibitor,SNRI)文拉法辛抗抑郁疗效差异的相关性。方法对151例抑郁症患者采用文拉法辛治疗6周,以治疗后17项汉密尔顿抑郁量表(Hamilton Depression Scale,HAMD)总分≤7为临床痊愈。检测5号染色体上的GABRB2基因的29个标签单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNP)位点。运用Plink 1.07和Haploview4.2软件进行29个SNP位点及其构成的单倍型与药物疗效的相关分析。结果 GABRB2基因的rs10071312和rs4426954位点的等位基因频率在痊愈组和非痊愈组之间的差异有统计学意义(均P=0.02),rs10071312位点的A等位基因携带者的治疗痊愈率高于G等位基因携带者(OR=4.43),而rs4426954位点的A等位基因携带者的治疗痊愈率低于G等位基因携带者(OR=0.44)。有3种单倍型在痊愈组和非痊愈组之间的分布差异有统计学意义,分别是A-A-A-A-G-A(rs7724146-rs10051667-rs2964773-rs12153421-rs2962402-rs4426954,P=0.01),A-A-A-G-A(rs10051667-rs2964773-rs12153421-rs2962402-rs442695,P=0.02)和A-A-A-G-A-G(rs10051667-rs2964773-rs12153421-rs2962402-rs4426954-rs3816596,P=0.03)。结论 GABRB2基因多态性可能与文拉法辛治疗的个体化差异有关联。

加味人参乌梅汤调控腹泻大鼠GABA能信号通路的系统效应

目的:研究加味人参乌梅汤对腹泻模型大鼠结肠组织中γ-氨基丁酸(GABA)能信号通路相关调控因子的影响,进一步揭示加味人参乌梅汤益气生津止泻的作用机制。方法:从48只SD幼龄大鼠中随机抽取12只作为正常组,其余大鼠以番泻叶泻下、劳倦力竭及饮食失宜等复合因素造模14 d。造模成功后,随机分为模型组、西药组及中药组,每组12只。正常组与模型组给予生理盐水灌胃(20 mL·kg^(-1)),西药组给予妈咪爱灌胃(0.7 g·kg^(-1)),中药组给予加味人参乌梅汤灌胃(35 g·kg^(-1)),均1次/d,连续干预7 d。每日观测记录大鼠一般情况、稀便率及腹泻指数。获取大鼠结肠标本,采用免疫组化法(IHC)检测大鼠结肠GABA蛋白积分吸光度表达;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B2(Akt2)、磷酸化(p-)Akt及白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠结肠PI3K、Akt2及γ-氨基丁酸A型受体β2亚基(GABRB2)mRNA和蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠一般情况明显变差,稀便率及腹泻指数差异无统计学意义,GABA蛋白表达明显升高(P<0.05),PI3K、Akt2、p-Akt及IL-1β表达含量明显升高(P<0.05,P<0.01),PI3K、Akt2、GABRB2 mRNA及蛋白表达均极显著升高(P<0.01)。与模型组比较,中药组、西药组大鼠一般情况明显好转,稀便率及腹泻指数显著下调(P<0.01),中药组、西药组PI3K、Akt2、p-Akt及IL-1β含量均明显下调(P<0.05),中药组PI3K、Akt2、GABRB2 mRNA均明显下调(P<0.05,P<0.01),GABA、PI3K及GABRB2蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01);西药组PI3K及Akt2 mRNA和PI3K蛋白表达均明显下降(P<0.05)。结论:加味人参乌梅汤能通过调节腹泻大鼠结肠GABA能信号通路,减少肠上皮细胞中Cl-向肠腔流动,改善腹泻模型大鼠结肠水液代谢失衡状态,进而发挥其益气生津止泻效应。