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HIV-1 CN54 Gag P55和P24蛋白的高效表达、纯化和鉴定
被引量:
5
1
作者
王道毅
刘勇
+6 位作者
郝彦玲
马民强
傅晶晶
李海山
王贻杰
陈静娴
邵一鸣
《中国输血杂志》
CAS
CSCD
2004年第1期1-4,共4页
目的 探讨HIV 1中国株CN5 4GagP5 5和P2 4重组蛋白的高效表达并纯化 ,为研究HIV疫苗和诊断试剂创造条件。方法 分别将CN5 4GagP5 5和P2 4基因克隆至 pBV2 2 0和 pThioHisC载体 ,构建非融合表达载体 ;将重组质粒转化大肠杆菌BL2 1codon...
目的 探讨HIV 1中国株CN5 4GagP5 5和P2 4重组蛋白的高效表达并纯化 ,为研究HIV疫苗和诊断试剂创造条件。方法 分别将CN5 4GagP5 5和P2 4基因克隆至 pBV2 2 0和 pThioHisC载体 ,构建非融合表达载体 ;将重组质粒转化大肠杆菌BL2 1codonplus RIL ,对工程菌进行诱导表达。Western Blot检测目的蛋白 ,用DEAE SeparoseFF阴离子交换层析柱纯化目的蛋白 ;纯化的P5 5和P2 4抗原蛋白分别包被酶标板作ELISA检测。结果 P5 5以包涵体的形式表达 ,表达量占菌体总蛋白的 30 % ,P2 4实现了可溶性表达 ,表达量占总菌体总蛋白的4 0 % ;纯化后P5 5纯度达到 80 % ,P2 4纯度超过 90 %。Western Blot和ELISA检测均显示了良好的的灵敏度和特异性。结论 HIV 1CN5 4GagP5 5和P2 4抗原蛋白可在大肠杆菌中高效表达 ,纯化的抗原蛋白具有良好抗原性 。
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关键词
HIV-1/CN54
Gag蛋白/P55
Gag蛋白/
p24
表达纯化鉴定
下载PDF
职称材料
题名
HIV-1 CN54 Gag P55和P24蛋白的高效表达、纯化和鉴定
被引量:
5
1
作者
王道毅
刘勇
郝彦玲
马民强
傅晶晶
李海山
王贻杰
陈静娴
邵一鸣
机构
中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心
中国协和医科大学中国医学科学院输血研究所
出处
《中国输血杂志》
CAS
CSCD
2004年第1期1-4,共4页
基金
国家高技术研究发展 ( 863 )计划
卫生部艾滋病防治应用性研究项目资助课题 (编号 2 0 0 3AA2 1910 0 )
文摘
目的 探讨HIV 1中国株CN5 4GagP5 5和P2 4重组蛋白的高效表达并纯化 ,为研究HIV疫苗和诊断试剂创造条件。方法 分别将CN5 4GagP5 5和P2 4基因克隆至 pBV2 2 0和 pThioHisC载体 ,构建非融合表达载体 ;将重组质粒转化大肠杆菌BL2 1codonplus RIL ,对工程菌进行诱导表达。Western Blot检测目的蛋白 ,用DEAE SeparoseFF阴离子交换层析柱纯化目的蛋白 ;纯化的P5 5和P2 4抗原蛋白分别包被酶标板作ELISA检测。结果 P5 5以包涵体的形式表达 ,表达量占菌体总蛋白的 30 % ,P2 4实现了可溶性表达 ,表达量占总菌体总蛋白的4 0 % ;纯化后P5 5纯度达到 80 % ,P2 4纯度超过 90 %。Western Blot和ELISA检测均显示了良好的的灵敏度和特异性。结论 HIV 1CN5 4GagP5 5和P2 4抗原蛋白可在大肠杆菌中高效表达 ,纯化的抗原蛋白具有良好抗原性 。
关键词
HIV-1/CN54
Gag蛋白/P55
Gag蛋白/
p24
表达纯化鉴定
Keywords
HIV 1 CN54
gagp55 p24
expression
purification
identification
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R512.91 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HIV-1 CN54 Gag P55和P24蛋白的高效表达、纯化和鉴定
王道毅
刘勇
郝彦玲
马民强
傅晶晶
李海山
王贻杰
陈静娴
邵一鸣
《中国输血杂志》
CAS
CSCD
2004
5
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