广西黄鸡β-防御素Gal-4基因的克隆和体内诱导表达

采用RT-PCR方法从广西黄鸡骨髓中扩增了β-防御素Gal-4基因的cDNA片段。序列分析结果表明,获得的广西黄鸡Gal-4基因大小为321 bp,推导的Gal-4由63个氨基酸组成,其中N端20个氨基酸为信号肽,C端38个氨基酸组成Gal-4的成熟肽。另外,分析了Gal-4基因在正常广西黄鸡(对照组)和H9N2禽流感病毒感染的广西黄鸡(感染组)的肺、肝、腔上囊、十二指肠、肾、气管组织中的表达情况。分析结果表明,在检测的6个组织中,肺、十二指肠、肾组织Gal-4基因的表达在感染组和对照组之间没有明显的差别,而在肝、气管和腔上囊组织中的表达有明显差异,感染组比对照组的Gal-4阳性样品数多。在肝组织中,对照组的30个样品检测到26个阳性样品,而感染组的30个样品全都是阳性；在气管组织中,对照组30个样品检测到19个阳性样品,而感染组的30个样品检测到24个阳性样品；在腔上囊组织中,Gal-4基因的诱导表达情况非常明显,对照组30个样品中仅有9个阳性,而感染组的30个样品中有21个阳性。

抗菌肽Gal-4体外抑菌活性的初步鉴定

为了鉴定抗菌肽Gal-4的体外抑菌活性,试验采用打孔法和细菌生长曲线法鉴定抗菌肽Gal-4对金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌的抑菌活性。结果表明:抗菌肽Gal-4对两种受试菌均表现出良好抑菌活性,两种受试菌的对照孔均未出现抑菌圈,而试验孔出现了较大的抑菌圈,其对金黄色葡萄球菌的抑菌活性要强于多杀性巴氏杆菌,随着抗菌肽Gal-4浓度的增大其抑菌活性也逐渐增强。说明抗菌肽(Gal-4)对金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌均有抑制效果。

Gal-4蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨Gal-4蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义。方法分别收集83例和31例石蜡包埋的大肠癌和正常大肠组织。免疫组化检测Gal-4蛋白在大肠癌及正常大肠组织中的表达。统计分析Gal-4蛋白表达变化与大肠癌临床参数之间的相关性。结果 Gal-4蛋白在大肠癌中的表达明显下调。此外,下调表达的Gal-4蛋白明显与大肠癌的分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及Duke分期相关。结论 Gal-4表达下调可能是大肠癌进展的一个恶性标志物。

抗菌肽Gal-4对细菌感染小鼠的预防及治疗研究

Gal-4天然存在于鸡体内(主要是骨髓)。笔者将Gal-4成熟肽区基因克隆到原核表达载体pET-30a,成功构建了原核表达质粒pET30a-Gal-4,转化于感受态细胞BL21,诱导表达重组蛋白,经过纯化后得到了一种新型抗菌肽Gal-4。笔者运用新型抗菌肽Gal-4对金黄色葡萄球菌感染的小鼠进行了预防和治疗研究。结果显示,Gal-4在小鼠体内发挥了良好的治疗作用,也有预防效果,不会在小鼠体内被降解而失去药效。Gal-4在临床应用中效果良好。本研究为开发新型的抗菌药物做出了贡献,也为兽医临床方面的应用提供了依据。

TNF-α与β1,4-GalT-Ⅰ在骨关节炎滑膜炎症过程中的关系研究

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)和1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(1,4-Gal T-Ⅰ)在骨关节炎滑膜炎症中的关系。方法选取2013年1月至2014年7月在治疗的骨关节炎患者15例,同时选取15例行膝关节探查未见异常健康者作为健康组,检测两组滑膜组织中TNF-α与β1,4-Gal T-Ⅰ表达水平;采用免疫荧光双标法检测TNF-α与β1,4-Gal T-Ⅰ共定位情况;同时培养成纤维滑膜细胞(FLSs),检测TNF-α刺激后β1,4-Gal T-Ⅰ的表达变化。结果观察组TNF-α和β1,4-Gal T-Ⅰ相对表达量分别为(1.22±0.17)和(0.91±0.14),明显高于健康组的(0.41±0.06)和(0.40±0.11),差异有统计学意义(P<0.05);TNF-α和β1,4-Gal T-Ⅰ在骨关节炎滑膜组织中表达,融合图有明显的共定位;各剂量TNF-α组FLSsβ1,4-Gal T-Ⅰ表达与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),说明TNF-α能够诱导FLSsβ1,4-Gal T-Ⅰ表达增加,从0.1 ng/ml TNF-α时开始增加,在5 ng/ml TNF-α时达到最高(24.18±2.16)×10-4。结论在骨关节炎滑膜炎症过程中,TNF-α可诱导β1,4-Gal T-Ⅰ表达增高。

姜黄素对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的 :探讨姜黄素对肝脏损伤的保护作用。方法 :分别建立四氯化碳、D 半乳糖胺及卡介苗加脂多糖诱导小鼠肝脏损伤模型 ,以测定血清谷丙氨酸转换酶 (ALT)、谷草氨基酸转换酶 (AST)、一氧化氮 (NO)和肝匀浆丙二醛 (MDA)含量为指标观察姜黄素对肝脏损伤的保护作用。结果 :姜黄素与阳性对照药联苯双酯相仿 ,均能明显降低动物模型的血清ALT ,AST ,NO和肝匀浆MDA含量。结论

丙肝宁对动物实验性肝损伤的保护作用

目的 研究中药复方丙肝宁的保肝作用。方法 采用D Gal造成大鼠的急性肝损伤模型和CCl4 所致慢性肝损伤模型。结果 丙肝宁 2个剂量组对D Gal造成大鼠的急性肝损伤模型和CCl4 所致慢性肝损伤模型的血清酶活性均具有明显的抑制作用 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,病理检查结果表明 ,丙肝宁 2个剂量组对D Gal造成大鼠的急性肝损伤模型和CCl4 所致慢性肝损伤模型的肝脏病理形态的改变具有明显的改善作用。

载硒酵母对小鼠化学性肝损伤的影响

观察不同剂量（３０，６０，９０ｍｇ／ｋｇ）载硒酵母（ｓｅｌｍｉｎｍ－ｅｎｒｉｃｈｅｄｙｅａｓｔ，ＳＥＹ）ｉｇ７天对ＣＣｌ４和Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ引起的化学性肝损伤的保护作用。结果发现：ＳＥＹ６０ｍｇ／ｋｇ可降低ＣＣｌ４所致血清ＡＬＴ的升高，各剂量组均可降低Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ所致血清ＡＬＴ和ＡＳＴ的升高，ＳＥＹ３０ｍｇ／ｋｇ可减轻Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ所致肝病理损伤，各剂量组ＳＥＹ均可降低Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ所致肝匀浆ＭＤＡ含量升高。提示ＳＥＹ在一定程度上可减轻ＣＣｌ４和Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ的化学性损伤，其作用机制可能与抗氧化作用有关。

基于FPGA的全局异步局部同步四相单轨握手协议实现

在常规FPGA中设计了基于LUT的异步状态保持单元,实现了全局异步局部同步系统的接口电路、时钟暂停电路,进一步完成四相单轨握手协议。基于Quartus软件的逻辑锁定技术,采用Verilog HDL进行行为描述,构建了无冒险C单元库。在Altera CycloneⅡEP2C35F672C6器件上,完成了GALS系统的时序仿真,证明了四相单轨握手的正确性。

人类天然抗α-Gal抗体抑制肽的筛选

人类天然抗体可以与猪细胞抗原表位Gal α1,3 Gal结合 ,触发超急性排斥反应 (HAR) ,HAR是猪器官移植至人体时的首要障碍 .阻断人的天然抗体 ,阻止其与猪细胞表面特异性抗原的结合 ,是防止超急性排斥的有效措施 .利用噬菌体展示技术 ,从XCX15随机肽库中筛选与西非单叶豆凝集素 (GS I B4)特异性结合的噬菌体展示肽 .得到一个小肽序列为SCTALSFPSFAFLARGT ,其与人血清中天然抗体的结合可以被蜜二糖(melibiose)竞争性地抑制 ,同时该小肽还能抑制人类天然抗体介导的猪红细胞的凝集反应 .因此 ,筛选到的小肽能作为人天然抗α

葡萄糖-β-(1→4)-半乳糖二糖片段的合成

目的利用化学方法高效合成葡萄糖-β-(1→4)-半乳糖二糖片段。方法以4,6位苄叉保护的葡萄糖硫苷11为原料通过4步反应以39%的产率合成了硫苷供体15,再以TMSOTf与NIS作为促进剂,硫苷供体15与低活性的半乳糖受体18进行糖苷化反应合成葡萄糖-β-(1→4)-半乳糖二糖2。结果糖苷化反应以81%的产率得到葡萄糖-β-(1→4)-半乳糖二糖2,为新型海洋天然产物Ancorinoside A的合成提供物质基础和技术保障。

产胞外多糖干酪乳杆菌的筛选鉴定及galU基因克隆与分析

乳酸菌胞外多糖具有良好的功能特性。从泡菜中分离乳酸菌,初筛到11株产胞外多糖的乳酸菌。经黏度及EPS产量测定,复筛出1株高产EPS的乳酸菌,其产量为771.97μg/m L。采用CTAB法提取该菌株基因组,测定其16S r RNA序列,在NCBI上进行同源序列比对,建立系统发育树。结果初步确定该菌株为干酪乳杆菌ZJ-4(Lactobacillus casei ZJ-4)。以该菌株基因组为模板,参照干酪乳杆菌BL23(HM162415)的gal U序列设计引物。采用Touch-down PCR扩增得到大约900 bp的gal U序列,经TA克隆、测序,与干酪乳杆菌BL23(HM162415)的gal U序列同源率为98%,表明克隆正确。