CC类趋化因子受体2、Th1/Th2细胞在IgA肾病大鼠肾间质纤维化中的表达及意义

目的检测IgA肾病大鼠肾间质纤维化中CC类趋化因子受体2(C-C motif chemokine receptor 2,CCR2)的表达和辅助性T细胞1/2(helper T cell 1/2,Th1/Th2)的含量,并观察其在肾脏纤维化中的作用。方法40只SD雄性大鼠,随机分为模型组和对照组,每组20只。采用脂多糖+改良牛血清白蛋白+四氯化碳法构建免疫球蛋白A(IgA)肾病模型。观察大鼠肾组织病理改变和IgA沉淀,计算胶原纤维占肾组织百分比,采用Katafuchi评分标准评估肾小管间质损伤程度。蛋白质印迹测定肾组织CCR2水平。双抗体夹心酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。流式细胞术检测Th1/Th2细胞比例。结果模型组大鼠肾组织胶原纤维面积百分比和Katafuchi评分显著高于对照组(P<0.05);模型组大鼠肾组织CCR2、血清IL-4水平、Th2细胞含量及IL-4/IFN-γ比值显著高于对照组,血清IFN-γ水平、Th1细胞含量显著低于对照组(P<0.05);CCR2和IL-4水平及IL-4/IFN-γ比值与胶原纤维面积百分比、Katafuchi评分呈正相关(P<0.05);IFN-γ水平与胶原纤维面积百分比、Katafuchi评分呈负相关(P<0.05)。结论CCR2和Th1/Th2失衡参与IgA肾病大鼠肾间质纤维化发生和发展,拮抗CCR2和调节Th1/Th2平衡有可能减轻IgA肾病大鼠肾脏纤维化改变。

血清IGFBP-3、Gd-IgA1在儿童紫癜性肾炎早期诊断中的应用价值

目的 探索血清胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)及半乳糖缺乏免疫球蛋白A1(Gd-IgA1)联合检测在儿童紫癜性肾炎(HSPN)早期诊断中的应用价值。方法 选取2021年6月至2023年4月在该院确诊的105例首发过敏性紫癜(HSP)患儿作为研究对象,在入院后按照HSP是否累及肾脏将患儿分为HSPN组及无肾炎组(HSP组),同期选择在该院体检的52例健康儿童作为对照组(NC组)。收集3组临床资料,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对血清及尿液中IGFBP-3、Gd-IgA1表达水平进行检测,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IGFBP-3、Gd-IgA1对HSPN的早期诊断价值,多因素Logistic回归分析HSPN早期发生的影响因素。结果 与NC组相比,HSPN组及HSP组的IgA、IgG、补体C3、IgA/C3、白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血小板计数(PLT)及血清光抑素C(CysC)、血肌酐(sCr)水平显著升高(P<0.05),但HSPN组与HSP组的临床资料差异无统计学意义(P>0.05);HSPN组及HSP组血清IGFBP-3、Gd-IgA1及尿液IGFBP-3/尿肌酐(uCr)、Gd-IgA1/uCr表达水平较NC组显著升高(P<0.05),并且,与HSP组相比,HSPN组血清IGFBP-3、Gd-IgA1及尿液Gd-IgA1/uCr表达水平进一步升高(P<0.05);ROC曲线分析显示,联合IGFBP-3、Gd-IgA1诊断HSPN的曲线下面积(AUC)显著大于IGFBP-3单独诊断的AUC(Z=3.629,P<0.001)和Gd-IgA1单独诊断的AUC(Z=2.274,P=0.023);多因素Logistic回归分析显示,血清CysC、IGFBP-3、Gd-IgA1、尿液Gd-IgA1/uCr是HSPN早期发生的影响因素(P<0.05)。结论 HSPN患儿血清IGFBP-3、Gd-IgA1的表达水平均显著上升,二者是HSPN早期发生的影响因素,血清IGFBP-3、Gd-IgA1水平联合检测对HSPN的早期诊断具有较高的应用价值。

参芪地黄汤联合羟氯喹治疗IgA肾病的疗效观察及对Th1/Th2平衡的影响

目的:观察参芪地黄汤联合羟氯喹(HCQ)治疗气阴两虚型IgA肾病(IgAN)的临床疗效及其对Th1/Th2平衡的影响。方法:将42例气阴两虚型IgA肾病患者随机分成观察组和对照组,各21例,对照组给予口服HCQ,观察组在对照组基础上另予参芪地黄汤,两组均连续干预8周。比较两组患者的临床疗效和治疗前后中医症状评分、常规生化指标[血肌酐(SCr)、白蛋白(Alb)]、24 h尿蛋白定量(24 h-uPQ)、细胞因子[γ干扰素(INF-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)]及辅助性T淋巴细胞(Th)水平。结果:观察组临床总有效率(81.0%)高于对照组(57.1%)(P<0.05);治疗后两组患者各项中医症状评分均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后两组患者SCr、24 h-uPQ、INF-γ、Th1和Th1/Th2水平均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后两组患者Alb、IL-4、IL-10及Th2水平均较治疗前升高,且观察组高于对照组(P<0.05);结论:参芪地黄汤联合HCQ能明显改善气阴两虚型IgAN患者的临床症状,有效控制尿蛋白和延缓肾功能衰竭,调节免疫功能及缓解微炎症状态,临床疗效确切。

小儿IgAN肾小管间质病变程度与血清IgA、IgA/C3比值及尿液MCP-1水平的相关性

目的探究小儿IgA肾病(IgAN)肾小管间质病变与血清免疫球蛋白(Ig)A、IgA/补体C3比值及尿液核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平的关系。方法回顾性分析2020年4月至2023年4月南阳市中心医院收治的60例IgAN患儿的临床资料,根据肾小管间质病变与否分为对照组(无病变)6例和观察组(有病变)54例,同时根据观察组患者的活检病理结果对肾小管间质损害程度进行分级,其中A组(轻度病变)25例、B组(中度病变)19例和C组(重度病变)10例,比较三组患儿的肝功能相关指标及血清IgA、IgA/C3比值和尿液MCP-1水平,采用Spearman相关性分析血清IgA、IgA/C3比值、尿液MCP-1水平与小儿IgA肾病肾小管间质病变的关系。结果观察组患者的N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)和β_(2)微球蛋白(β_(2)-MG)分别为(51.09±21.15)U/L、(667.40±224.89)μg/L,明显高于对照组的(13.15±5.42)U/L、(215.86±81.65)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者的肌酐清除率为(65.82±16.05)mL/min,明显低于对照组的(90.15±11.23)m L/min,差异有统计学意义(P<0.05);随着肾小管间质病变程度的加重,NAG、β_(2)-MG水平随之升高,肌酐清除率随之降低,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组患儿的IgA和IgA/C3比值分别为(2.85±1.66)g/L、3.06±1.55,明显低于观察组的(5.85±2.29)g/L、6.56±2.16,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者的MCP-1水平为(1.02±0.19)ng/L,明显低于对照组的(1.97±0.57),差异有统计学意义(P<0.05);随着肾小管间质病变程度的加重,MCP-1水平随之升高,差异有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性分析结果显示,IgAN患儿肾小管间质病变与NAG、β_(2)-MG、IgA、IgA/C3比值、MCP-1水平呈正相关(P<0.05),与肌酐清除率呈负相关(P<0.05)。结论IgA、IgA/C3比值、MCP-1水平与IgAN患儿肾小管间质病变呈正相关,临床可通过检测IgA、IgA/C3比值、MCP-1水平,以评估IgAN病情和肾小管间质损伤程度。

肾小球半乳糖缺乏型IgA1在IgA异常沉积肾小球疾病中的表达及意义

目的探讨肾小球半乳糖缺乏型IgA1(Gd-IgA1)在IgA异常沉积肾小球疾病中的表达及意义。方法纳入2020年1月至2024年6月天津医科大学总医院收治的IgA异常沉积肾小球疾病患者35例(IgA异常沉积组),包括IgA沉积型感染相关性肾小球肾炎(IgA-IRGN)5例,伴IgA沉积的糖尿病肾病(IgA-DN)8例,伴IgA沉积的ANCA相关性血管炎肾损害(IgA-ANCA-GN)9例,伴IgA沉积的微小病变肾病(IgA-MCD)13例。另选择同期住院的35例性别、年龄匹配的原发性IgA肾病(IgAN)患者作为对照(IgAN组)。分析两组患者临床和病理特征,评估肾活检中肾小球Gd-IgA1染色的强度和分布特点。结果两组患者主要临床表现均为蛋白尿和(或)血尿、血肌酐水平升高。肾病理检查显示,IgAN组患者毛细血管内增生更常见,而IgA异常沉积组患者纤维素样坏死、新月体形成及基底膜增厚较多见。Gd-IgA1抗体KM55免疫组化染色显示,IgAN组患者肾小球KM55主要表达于系膜区,染色强度范围为轻度阳性(+)至强阳性(+++),染色强度显著高于IgA异常沉积组(P<0.05)。电镜检查显示,IgAN组肾小球电子致密物沉积(EDD)位置与IgA免疫荧光及KM55染色一致;IgA异常沉积组肾小球EDD位置与IgA免疫荧光染色一致,但与KM55染色一致性较差。结论在IgA异常沉积肾小球疾病中,肾小球Gd-IgA1沉积明显少于IgA沉积,提示Gd-IgA1在其发病机制中可能不占重要地位。

探讨固本通络方基于细菌脂多糖介导的肠B细胞激活对Gd-IgA1的影响

目的探讨固本通络方对IgA肾病小鼠肠道细菌脂多糖(LPS)和糖基化缺陷IgA1(Gd-IgA1)的干预及肾保护作用。方法将36只雄性小鼠分为正常对照组、模型组、固本通络方低剂量组、固本通络方中剂量组、固本通络方高剂量组、依立托仑组。实验采用ddY小鼠构建IgA肾病动物模型,将模型组和各药物组进行造模,中药干预各组分别予以固本通络方免煎颗粒低(13.2 g/kg)、中(26.4 g/kg)、高(52.8 g/kg)3种不同剂量药液灌胃给药,正常对照组和模型组小鼠给予0.9%氯化钠溶液灌胃(10 mL/kg),依立托仑组予以腹腔注射依立托仑药液,各药物组每天给予药物1次,连续8周。干预4周、8周后,测定各组24 h尿蛋白定量;8周测定血清及肠道黏膜LPS、IgA、GdIgA1水平,观察肾脏病理染色及右肾IgA沉积情况,实时荧光定量PCR检测Cosmc基因表达,Western blot法测定Cosmc蛋白表达及IgA肠道菌群特异性,流式细胞术检测肠道B淋巴细胞活化率及分泌IgA前体B淋巴细胞比率,对肠道黏膜组织LPS水平与B细胞活化率及IgA前体B细胞比率行相关性分析。结果固本通络方可降低24 h尿蛋白定量水平及血清肌酐水平(P<0.05)。HE染色发现,与模型组相比,固本通络方用药组肾小球系膜细胞、内皮细胞及基质增生显著减少,肾小球系膜区IgA沉积显著改善;血清及肠道黏膜LPS水平检测发现,与模型组比较,各中药干预组均能降低小鼠血清和肠道黏膜组织LPS、Gd-IgA1和IgA水平(P<0.05);降低B细胞活化率及IgA前体B细胞比率(P<0.05),qRT-PCR和Western blot结果显示固本通络方能够显著降低小鼠粪便培养中菌落蛋白表达水平,上调Cosmc蛋白和Cosmc基因表达水平(P<0.05)。LPS水平与B细胞活化率及IgA前体B细胞比率均呈正相关(P<0.05)。结论固本通络方能有效降低IgA肾病小鼠蛋白尿及血清肌酐水平,减轻肾脏病理损伤及肾小球系膜区IgA沉积,其作用可能和固本通络方降低IgA肾病小鼠血清及肠道LPS水平,降低B淋巴细胞活化率,Cosmc表达上调相关。

基于网络药理学研究玉屏风颗粒调节IgA肾病模型小鼠Th1/Th2平衡的作用机制

目的:基于网络药理学预测玉屏风颗粒治疗IgA肾病(IgAN)的作用机制并进行机制验证。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库检索玉屏风颗粒有效成分;从GeneCards、OMIM、TTD数据库获取IgAN靶点,运用Venny2.1.0、Cytoscape 3.7.2软件分别获取玉屏风颗粒与IgAN两者交集靶点,构建“活性成分-交集靶点-疾病”关系网络;使用String数据库构建蛋白互作网络图,运用DAVID数据库进行GO、KEGG富集分析;通过AutoDock Vina软件对玉屏风颗粒中的主要活性成分与关键靶点进行分子对接验证。选取60只雄性昆明小鼠随机分为正常组10只,造模组50只,造模成功后随机分为玉屏风颗粒高、中、低剂量组及西药对照组,给药8周。免疫荧光法检测IgA在肾组织中的沉积情况;HE染色、糖原染色观察肾组织病理学改变;生化法检测24 h-UTP、BUN、Scr;ELISA法检测血清中IgA,Th1相关因子TNF-α、INF-γ、IL-2表达,以及Th2相关因子IL-4、IL-6表达。结果:网络药理学部分,筛选出玉屏风颗粒活性成分34个,药物靶点222个;疾病靶点1436个;交集靶点102个;主要活性成分为槲皮素、山柰酚、汉黄芩素等;关键靶点有TNF、IL-6、IL-4、IL-2等。分子对接结果表明,主要活性成分与关键靶点均能较好的结合,所有结合能均≤-6.0 kJ/mol;GO富集分析得到生物过程689条、细胞组分54条、分子功能115条;KEGG富集分析得到IL-17、NF-κB等信号通路。动物实验部分,肾组织IgA免疫荧光显示,与正常组比较,模型组肾小球系膜区可见强绿色团块状IgA荧光信号;与模型组比较,各治疗组IgA沉积情况均有所改善,其中玉屏风颗粒高剂量组改善较明显。HE染色显示,与正常组比较,模型组可见肾小球肿胀,系膜细胞、内皮细胞增生,细胞外基质增多,系膜区扩张;与模型组比较,各治疗组肾组织病理损伤均有所减轻;糖原染色显示,与正常组比较,模型组可见系膜细胞增生,细胞外基质增多,给予药物治疗后,各治疗组肾组织病变程度由中重度变为中轻度。与正常组比较,模型组24 h-UTP、BUN、Scr明显升高(P<0.01);与模型组比较,各治疗组肾功能均有所改善(P<0.01或P<0.05)。与正常组比较,模型组血清中IgA表达明显升高,与模型组比较,各治疗组血清中IgA表达均有所降低(P<0.05)。与正常组比较,模型组血清中Th1相关因子TNF-α、INF-γ、IL-2表达水平明显降低(P<0.05),各治疗组血清中Th1相关因子TNF-α、INF-γ、IL-2均有所上调。与正常组比较,模型组血清中Th2相关因子IL-4、IL-6表达水平明显升高(P<0.05),使用药物治疗后,各治疗组血清中Th2相关因子IL-4、IL-6表达水平均有所下调。与正常组比较,模型组血清中Th1/Th2比值明显下降(P<0.05),各治疗组血清中Th1/Th2比值均有所上调(P<0.05)。结论:玉屏风颗粒对IgAN模型小鼠具有较好的治疗作用,其机制可能与纠正Th1/Th2失衡有关。

黄芪甲苷Ⅳ通过抑制TIM-1信号通路增加Th1/Th2细胞比率减轻IgA肾病小鼠肾损伤

目的探讨黄芪甲苷Ⅳ(AS-Ⅳ)对IgA肾病(IgAN)小鼠1型辅助T(Th1)细胞/Th2细胞平衡的影响及其可能作用机制。方法建立BALB/c小鼠IgAN模型,造模成功小鼠随机分为模型组、AS-Ⅳ低、中和高剂量组各10只,另设对照组10只。AS-Ⅳ低、中和高剂量组小鼠灌胃(12.5、25、50)mg/kg AS-Ⅳ混悬液(生理盐水配制),对照组及模型组给予等量生理盐水。测定各组小鼠24 h尿蛋白(24 hUPr)含量和尿红细胞计数;测定小鼠血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)和白蛋白(ALB)水平;ELISA检测各组小鼠血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和IL-10水平;流式细胞术检测小鼠外周血Th1/Th2细胞比率;HE染色观察小鼠肾组织病理学变化;反转录PCR和Western blot法分别检测小鼠肾组织中T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域1(TIM-1)、Toll样受体4(TLR4)的mRNA和蛋白表达。结果与模型组比较,AS-Ⅳ低、中和高剂量组小鼠第12周和第15周尿红细胞计数、24 h UPr、BUN、Scr、IL-4、IL-10水平、Th2细胞比例、TIM-1与TLR4 mRNA和蛋白表达水平均明显降低,ALB、IFN-γ水平、Th1细胞比例和Th1/Th2细胞比率升高,且以AS-Ⅳ高剂量组效果最佳。结论AS-Ⅳ通过抑制TIM-1信号通路,增加Th1/Th2细胞比率,抑制炎症反应,减轻IgAN小鼠肾损伤。

Adams-Oliver综合征5型合并IgA肾病1例并文献复习

报道1例Adams-Oliver综合征5型合并IgA肾病患儿的临床资料,并进行文献复习。

非增强T1-mapping、DKI、BOLD-MRI在评估IgA肾病患者肾功能中的应用价值研究

目的:探讨非增强T1-mapping磁共振,扩散峰度成像(diffusion kurtosis imaging,DKI)及血氧饱和水平依赖成像(blood oxygenation level-dependent MRI,BOLD-MRI)在IgA肾病(immunoglobulin A nephropathy,IgAN)患者的肾功能评估中的应用价值,并对各项MRI参数的评估效用进行比较。方法:纳入经肾活检确诊的57例IgAN患者以及19名健康志愿者,根据肾功能不全严重程度[肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)水平]将IgAN患者分为轻度损害组[≥60 mL/(min·1.73 m^(2))]、中度损害组[30~<60 mL/(min·1.73 m^(2))]、重度损害组[<30 mL/(min·1.73 m^(2))],比较对照组与IgAN组各亚组间的肾脏MRI参数,分析T1-mapping(T1值)、DKI(Fak、MK、MD值)、BOLD-MRI(R2*值)与肾功能评估指标如eGFR、血清肌酐(serum creatinine,Scr)及胱抑素C(cystatin C,CysC)等的相关性,探索3种肾脏MRI在评估IgAN患者肾功能中的应用价值。结果:对照组与IgAN组T1值差异有统计学意义[(1592.15±89.91)ms vs(1776.30±172.08)ms,P<0.001];IgAN各肾功能不全亚组间T1值两两比较,差异均有统计学意义[轻度损害组(1684.86±103.57)ms、中度损害组(1888.99±182.01)ms、重度损害组(1969.14±133.74)ms,均P<0.001]。对照组与IgAN组Fak值差异有统计学意义[0.15(0.08~0.20)vs 0.19(0.11~0.32),P<0.05],轻度损害组与重度损害组间差异有统计学意义[0.17(0.11~0.25)vs 0.35(0.28~0.40),P<0.01];各组R2*值差异均无统计学意义。IgAN组T1值与eGFR、血红蛋白(hemoglobin,Hb)、红细胞压积(hematocrit,HCT)呈负相关(r=-0.620、-0.679、-0.629,均P<0.001),与Scr、CysC呈正相关(r=0.559、0.604,均P<0.001);Fak值与eGFR呈负相关(r=-4.004,P<0.05),与Scr、CysC呈正相关(r=0.366、0.378,P<0.05,P<0.01);MD值与Hb、HCT呈正相关(r=0.472、0.498,P<0.001);R2*值与各项临床指标皆无相关性;T1值预测IgAN肾功能轻、中、重度的AUC分别为0.791(95%CI:0.660~0.922,P<0.01)、0.972(95%CI:0.914~1.000,P<0.01)、0.988(95%CI:0.958~1.000,P<0.01);Fak值预测IgAN重度肾功能损害的AUC为0.883(95%CI:0.678~1.000,P<0.01)。结论:非增强T1-mapping、DKI对IgAN患者的肾功能状态具有预测价值,且非增强T1-mapping的预测价值优于DKI。

中医药基于TGF-β1/Smad信号通路治疗IgA肾病的研究进展

免疫球蛋白A(IgA)肾病是一种最常见的肾小球肾炎,是导致终末期肾衰竭的主要原因之一。IgA肾病的发生、发展与肾脏纤维化的进展存在紧密的关联性,因此针对性治疗肾脏纤维化,对于延缓IgA肾病的进展有重大的意义。TGF-β1/Smad信号通路在肾脏纤维化的病理发展中发挥着重要的作用。近些年来,中医药在防治IgA肾病中有着独特的优势,为明确中医药调控TGF-β1/Smad信号通路来治疗IgA肾病作用靶标,文章借鉴了国内、国外近十余年的文献,借助中医药的研究,从中药单体、中药复方几个方面,对治疗IgA肾病的作用进行了系统化的研究,旨在为临床上防治IgA肾病提供有效的依据。

lncRNA TUG1在IgA肾病患者血清中的表达分析及生物信息学预测

目的:明确lncRNA TUG1在IgAN中差异表达,并预测lncRNA TUG1下游参与IgAN的调控网络。方法:选取2021年9月—2021年12月黑龙江省中医药科学院门诊及住院IgAN患者10例作为试验组,同期健康体检者10例为对照组,清晨抽取受试者空腹静脉血,qRT-PCR法对外周血清lncRNA TUG1进行检测。通过GEO数据库获得IgAN符合要求的miRNA表达数据库GSE25590和mRNA表达数据库GSE73953。利用GEO2R在线分析工具寻找差异表达基因,利用NPlnter V4.0、StarBase V2.0数据库收集TUG1可能结合的下游的miRNA、mRNA靶点。将GSE25590数据集获取的差异表达miRNA与TUG1结合的下游的miRNA靶点进行合并处理,找到共同差异表达miRNAs(DEmiRs),进一步利用miRDB数据进行可能结合的下游的mRNA的预测。再将GSE73953数据集获取的差异表达mRNA、TUG1可能结合的下游的mRNA及GSE25590数据集与TUG1下游共表达miRNA获得mRNA等3组数据集进行合并取交集。最终获得共同差异表达基因(DEGs)。应用DAVID数据库对筛选DEGs进行GO和KEGG分析,最终选取排名前20的GO分析与KEGG通路,OmicShare平台绘制气泡图,Cytoscape 3.6.0软件构建TUG1-DEmiRs-DEGs-KEGG通路多维网络图。结果:(1)与健康对照组相比,IgAN患者外周血样本中lncRNA TUG1极显著低表达(P<0.01);(2)获得TUG1下游结合的221个DEmiRs,GSE25590数据集获取182个DEmiRs,交叉合并获得15个DEmiRs;(3)获取TUG1下游结合的294个DEGs,GSE73953数据集获取14657个DEGs,对TUG1下游结合的15个DEmiRs进行预测,获得6947个DEGs,对以上三组数据进行交叉合并获得90个DEGs;(4)对共同DEGs进行GO和KEGG富集分析,包括细胞对热应激的反应、衰减阶段、Notch信号通路、剪接体等。结论:lncRNA TUG1在IgAN中低表达,TUG1可能通过miR-107、ATXN1L调控的Notch信号通路参与IgAN中发生、发展。

基于lncRNA TUG1介导miR-320调控PTEN/Cosmc通路探讨肾炎止血丸治疗IgA肾病的作用机制

目的:观察肾炎止血丸对IgA肾病(IgAN)模型大鼠的治疗作用及其对lncRNA TUG1介导miR-320-5p调控PTEN/Cosmc通路的影响。方法:采用“牛血清白蛋白+四氯化碳+脂多糖”联用法构建IgAN大鼠模型,32只大鼠随机分为正常对照组、模型组、氯沙坦钾片组[20 mg/(kg·d)]、肾炎止血丸组[3.6 g/(kg·d)],每组8只,均连续给药6周。留取血液、肠黏膜及肾组织标本,分别应用ELISA法检测血清磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、核心1β1,3半乳糖基转移酶伴侣蛋白(Cosmc)、半乳糖缺陷型IgA1(Gd-IgA1)水平;采用Real-time PCR、Western blot检测肠黏膜组织、肾脏组织lncRNA TUG1、miR-320、PTEN、Cosmc mRNA及蛋白表达。结果:①血清PTEN、Cosmc、Gd-IgA1:与模型组比较,各给药组PTEN、Cosmc升高明显(均P<0.01)、Gd-IgA1减少明显(P<0.01),与氯沙坦钾片组比较,肾炎止血丸PTEN、Cosmc升高及Gd-IgA1减少明显(均P<0.01)。②RT-PCR法检测肠黏膜组织、肾组织lncRNA TUG1、miR-320、PTEN、Cosmc mRNA表达:与模型组比较,氯沙坦钾片组肠黏膜组织及肾组织TUG1升高明显(均P<0.01),miR-320减少明显(P<0.01);与氯沙坦钾片组比较,肾炎止血丸肠黏膜组织及肾组织TUG1、PTEN升高明显,肠黏膜组织Cosmc升高明显(均P<0.01),肾组织miR-320减少明显(P<0.01)。③Western blot检测肠黏膜组织、肾组织PTEN、Cosmc蛋白表达:与模型组比较,各给药组肠黏膜组织PTEN蛋白表达升高(P<0.05),肾炎止血丸组Cosmc表达升高明显(P<0.05);与氯沙坦钾片组比较,肾炎止血丸PTEN升高有显著差异(P<0.05),Cosmc表达升高无显著差异(P>0.05)。各给药组肾组织Cosmc表达升高有极显著差异(P<0.01),与氯沙坦钾片组比较,肾炎止血丸肾组织PTEN升高有显著差异(P<0.05),Cosmc表达升高有极显著性差异(P<0.01)。结论:肾炎止血丸能够改善IgAN大鼠肾损伤;其作用机制可能与参与lncRNA TUG1介导miR-320调控PTEN/Cosmc通路有关。

血清IgA型抗鼠科肉瘤病毒癌基因同源物B1抗体在类风湿关节炎中的意义

目的:检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清中IgA型抗鼠科肉瘤病毒癌基因同源物B1(v-raf murine sarcoma viral oncogene homologue B1,BRAF)抗体水平,探讨IgA型抗BRAF抗体在RA血清中的表达及其与临床指标的相关性。方法:纳入RA患者61例、干燥综合征(Sjogren’s syndrome,SS)患者16例、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者16例、痛风患者16例、骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者21例、健康对照22例,以重组的BRAF蛋白为抗原,应用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测所有患者血清中IgA型抗BRAF抗体水平,分析IgA型抗BRAF抗体与RA患者的临床和实验室指标的关系。采用SPSS 19.0进行统计学分析。结果:RA组患者血清中IgA型抗BRAF抗体滴度明显高于SLE组(P=0.011)、痛风组(P<0.001)、OA组(P<0.001)和健康对照组(P<0.001)。RA组与SS组相比,IgA型抗BRAF抗体水平差异无统计学意义(P=0.762)。在类风湿因子、抗环瓜氨酸多肽(cyclic citrullinated peptide,CCP)抗体、抗角蛋白抗体阴性的RA患者中仍可以检测到IgA型抗BRAF抗体。RA患者血清中IgA型抗BRAF抗体水平与临床及实验室指标无相关性。将RA患者分为IgA型抗BRAF抗体升高组及正常组进行比较,结果显示两组在临床及实验室指标上差异均无统计学意义。结论:RA患者血清中IgA型抗BRAF抗体水平显著高于SLE、痛风、OA及健康对照组,且可在类风湿因子、抗CCP抗体及抗角蛋白抗体阴性的RA患者中升高,提示IgA型抗BRAF抗体可能参与RA的发病过程,且可能有助于血清阴性RA患者的诊断。

IgA肾病研究的现状、问题与对策

IgA肾病是全球范围内最常见的原发性肾小球肾炎,是终末期肾脏病的主要病因之一。种族和地域差异及家族聚集性均提示遗传因素在IgA肾病的发病中起着一定的作用,同时免疫系统异常及糖基化缺失IgA1的产生也与IgA肾病的发病密切相关。研究IgA肾病的病因及发病机制对IgA肾病的诊断、治疗和预后有重要意义。本文对IgA肾病的遗传学研究、发病机制、微生物及代谢物组学及靶向药物等方面进行了相关的综述。

转化生长因子β1通路在IgA肾病中作用机制的研究进展

IgA肾病的发生、发展与机体异常免疫、肾脏炎症反应、足细胞及肾小管上皮细胞的流失、细胞外基质的形成密切相关。转化生长因子β1(TGF-β1)作为一种多功能细胞因子,不仅在维持免疫耐受、调节免疫应答方面发挥重要作用,还能够调节多种类型细胞的生长、趋化、分化和凋亡,它的表达和活化与IgA肾病的发生、发展密切相关,对疾病后期肾纤维化的形成有重要作用,是影响患者预后的关键因素。通过TGF-β1信号通路寻找治疗IgA肾病的分子生物学靶点成为IgA肾病治疗的新方向。现对TGF-β1通路在IgA肾病中的分子生物学机制进行综述。

益气养阴活血方对IgA肾病小鼠外周血B淋巴细胞C1β-3-GaLT11、Cosmc表达及肠黏膜免疫反应的影响

目的:探究益气养阴活血方对IgA肾病小鼠外周血B淋巴细胞核心1β1,3-半乳糖基转移酶(C1β-3GaLT11)及其伴侣蛋白(Cosmc)表达和肠道黏膜免疫反应的影响。方法:小鼠随机分为空白组、模型组、中药(益气养阴活血方)低、中、高剂量组,每组15只。除空白组外,其余各组建立小鼠IgA肾病模型。检测血清白蛋白(Alb)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平;检测血清Gd-IgA1水平及肾小球系膜区Gd-IgA1荧光强度;HE染色及PAS染色观察肾组织病理改变;HE染色观察结肠组织病理变化;qRT-PCR法检测外周血B淋巴细胞Cosmc mRNA、C1β-3-GaLT11 mRNA表达;Western Blot法检测结肠组织中Cosmc、C1β-3-GaLT11、B细胞活化因子(Baff)、TGF-β表达及肾组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素17(IL-17)、TGF-β蛋白表达水平。结果:与空白组相比,模型组小鼠Gd-IgA1沉积、蛋白尿和血尿症状增加,肾功能降低,肾小球系膜增生及肾小管炎症浸润明显,肠黏膜炎症浸润等病理损伤严重,肠道及外周血B淋巴细胞表面的Cosmc及C1β-3-GaLT11活性降低,Gd-IgA1生成增多(P<0.05)。益气养阴活血方可降低Gd-IgA1沉积,改善IgA肾病小鼠蛋白尿和血尿症状,促进肾功能恢复,缓解肾小球系膜增生及肾小管炎症浸润,缓解肠黏膜炎症浸润,提高肠道及外周血B淋巴细胞表面的Cosmc、C1β-3-GaLT11活性,抑制Gd-IgA1生成(P<0.05)。结论:益气养阴活血方可改善肠黏膜损伤、提高肠道及外周血B淋巴细胞表面的Cosmc、C1β-3-GaLT11活性,使其催化IgA糖基化能力增强,减少Gd-IgA1生成及沉积,缓解Gd-IgA1诱发的IgA肾病肾损伤。

IgA血管炎发病机制及治疗的研究进展

IgA血管炎(IgAV)是儿童常见的全身性小血管炎疾病,它有IgA1免疫复合物沉着、中性粒细胞和补体因子浸润的特征,其发病机制仍不明。IgAV常累及皮肤小血管、消化道、关节及肾脏。症状有一定自限性,但小部分患者会进展成类似IgA肾病的肾炎,出现血尿、蛋白尿,继而发展为终末期肾病。含有半乳糖缺乏IgA1(Gd-IgA1)的免疫复合物在IgAV的病理生理过程中起着关键作用;通过Fc受体(CD89),诱导血管周围的中性粒细胞炎症和肾小球系膜增生和炎症。本文就IgA、IgA受体、中性粒细胞以及补体系统、遗传和感染等因素在IgAV发病机制中的作用及新疗法的发现作一综述。

IgA肾病及IgA血管炎肾损害严重程度与血清C1GalT1、Cosmc表达的关系

目的探讨IgA肾病(IgAN)及IgA血管炎肾损害(IgAVN)严重程度与血清C1GalT1、Cosmc表达的关系。方法选取浙江省温州市中西医结合医院2020年2月~2023年2月收治的IgAN及IgAVN患者各60例,根据病情严重程度分别将其分为轻度组、中度组和重度组,观察不同病情程度IgA肾病及IgAVN患者血清C1GalT1、Cosmc表达水平,并采用Spearman进行相关性分析。结果IgAN及IgAVN重度组血清C1GalT1、Cosmo相对表达量均明显低于中度组和轻度组,中度组血清C1GalT1、Cosmo相对表达量明显低于轻度组,其差异均具有统计学意义(P<0.05)。经Spearman相关性分析,血清C1GalT1、Cosmo表达与IgAN及IgAVN病情严重程度均呈现负相关。结论血清C1GalT1、Cosmo表达与IgAN及IgAVN病情严重程度均呈负相关,检测患者血清C1GalT1、Cosmo的表达可以辅助判断IgAN及IgAVN病情严重程度。

维生素D受体在IgA肾病患者肾脏中的表达及其与肾纤维化的关系

目的:探讨维生素D受体(VDR)在IgA肾病患者肾脏中的表达及其与肾纤维化的关系。方法:收集42例肾穿刺活检病理证实为IgA肾病患者的血清、尿液及肾组织标本,根据IgA肾病牛津分型,按照肾小管萎缩/间质纤维化程度分为轻度纤维化组(T0组)及中重度纤维化组(T1组),采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清维生素D水平,运用免疫组化技术检测肾组织维生素D受体、纤连蛋白(FN)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))的表达。结果:(1)T1组患者24 h尿蛋白定量、血肌酐、血尿素氮、血尿酸水平显著高于T0组患者,血白蛋白、估算肾小球滤过率(eGFR)水平、血维生素D水平显著低于T0组患者;(2)T1组患者肾组织VDR的表达显著低于T0组,FN、TGF-β_(1)的表达显著高于T0组;(3)相关性分析显示:血维生素D水平与eGFR、VDR呈显著正相关,与24 h尿蛋白定量、TGF-β_(1)、血尿素氮呈显著负相关;肾组织VDR与血维生素D水平、eGFR呈显著正相关,与FN、TGF-β_(1)呈显著负相关;肾组织FN与TGF-β_(1)、24 h尿蛋白定量、血肌酐、血尿素氮呈显著正相关,与VDR、eGFR呈显著负相关。结论:IgA肾病患者肾组织中VDR表达与肾纤维化程度有关,使用维生素D受体激动剂可能是改善IgA肾病肾纤维化的有效措施,其改善IgA肾病肾间质纤维化的机制之一是其对TGF-β_(1)信号通路的调控作用。