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MicroRNA miR-2765-3p regulates reproductive diapause by targeting FoxO in Galeruca daurica 被引量:2
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作者 Tian-Feng Duan Ling Li +1 位作者 Hai-Chao Wang Bao-Ping Pang 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2023年第2期279-292,共14页
The forkhead box O(FoxO),as a conserved transcription factor,plays an indispensable role in regulating insect diapause.However,how FoxO is regulated to control diapause in insects remains unknown.In this study,we disc... The forkhead box O(FoxO),as a conserved transcription factor,plays an indispensable role in regulating insect diapause.However,how FoxO is regulated to control diapause in insects remains unknown.In this study,we discovered functional binding sites for miR-2765-3p in the 3′untranslated region of FoxO in Galeruca daurica.The luciferase reporter assay showed that miR-2765-3p targeted FoxO and suppressed its expression.The expression profiles of miR-2765-3p and FoxO displayed opposite patterns during the female developmental process.Overexpression of miR-2765-3p by the injection of the miR-2765-3p agomir into adult females reduced FoxO expression,leading to the suppression of lipid accumulation,promotion of ovarian development,and inhibition of reproductive diapause.This is similar to the phenotype that results from the depletion of FoxO by injecting dsFoxO into adult females.In addition,the repression of miR-2765-3p by injecting the miR-2765-3p antagomir increased the FoxO transcript level,leading to the stimulation of lipid accumulation,depression of ovarian development,and induction of reproductive diapause.A hormone injection assay showed that the juvenile hormone(JH)agonist(methoprene)upregulated miR-2765-3p and downregulated FoxO.Notably,injecting methoprene rescued ovarian development defects associated with miR-2765-3p inhibition.These findings indicate that the JH/miR-2765-3p/FoxO axis plays a vital role in the regulation of reproductive diapause in G.daurica. 展开更多
关键词 DIAPAUSE FOXO galeruca daurica juvenile hormone MICRORNA
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寄主植物代谢物对沙葱萤叶甲取食的影响
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作者 李金蔚 李玲 +1 位作者 李娜 庞保平 《北方农业学报》 2024年第4期84-93,共10页
【目的】揭示寄主植物代谢物对沙葱萤叶甲取食量和取食偏好的影响。【方法】选取沙葱萤叶甲寄主植物的6种代谢物(3种次级代谢物,分别为异槲皮苷、异黄酮和芦丁;3种初级代谢物,分别为D-半乳糖、β-D-葡萄糖和L-鼠李糖),以10%DMSO溶液分... 【目的】揭示寄主植物代谢物对沙葱萤叶甲取食量和取食偏好的影响。【方法】选取沙葱萤叶甲寄主植物的6种代谢物(3种次级代谢物,分别为异槲皮苷、异黄酮和芦丁;3种初级代谢物,分别为D-半乳糖、β-D-葡萄糖和L-鼠李糖),以10%DMSO溶液分别配制0.01 mmol/L(低浓度)、0.10 mmol/L(中浓度)和1.00 mmol/L(高浓度)6种代谢物处理液浸泡韭菜,饲喂沙葱萤叶甲,以饲喂10%DMSO溶液浸泡的韭菜为对照组,测定沙葱萤叶甲(幼虫、成虫)对不同寄主代谢物的取食量;应用二项叶碟选择法研究沙葱萤叶甲对不同代谢物及不同浓度处理组的取食偏好。【结果】沙葱萤叶甲幼虫对高浓度异槲皮苷处理的取食量显著低于对照组(P<0.05),对中、高浓度L-鼠李糖处理的取食量显著高于对照组(P<0.05);沙葱萤叶甲成虫对低、中浓度异黄酮和低、高浓度L-鼠李糖处理的取食量显著高于对照组(P<0.05)。沙葱萤叶甲幼虫对中、高浓度异黄酮,高浓度芦丁和低浓度β-D-葡萄糖处理的取食偏好显著低于对照组(P<0.05),而对低浓度L-鼠李糖处理的取食偏好极显著高于对照组(P<0.01);沙葱萤叶甲成虫对高浓度异槲皮苷处理的取食偏好极显著高于对照组(P<0.01),而对高浓度异黄酮、芦丁和D-半乳糖处理的取食偏好显著低于对照组(P<0.01)。【结论】寄主植物代谢物对沙葱萤叶甲取食的影响与代谢物种类、含量以及沙葱萤叶甲的发育阶段有关。 展开更多
关键词 寄主植物代谢物 沙葱萤叶甲 取食量 取食偏好
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沙葱萤叶甲的过冷却能力与抗寒性 被引量:24
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作者 李浩 周晓榕 +1 位作者 庞保平 常静 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期212-217,共6页
【目的】沙葱萤叶甲Galeruca daurica Joannis于2009年开始在内蒙古草原暴发成灾,发生地区不断扩大,危害日趋严重,严重影响内蒙古草原畜牧业的可持续发展和生态安全。低温是影响昆虫生长发育和存活的关键因子,而昆虫对低温的耐受性决定... 【目的】沙葱萤叶甲Galeruca daurica Joannis于2009年开始在内蒙古草原暴发成灾,发生地区不断扩大,危害日趋严重,严重影响内蒙古草原畜牧业的可持续发展和生态安全。低温是影响昆虫生长发育和存活的关键因子,而昆虫对低温的耐受性决定了其越冬存活率。了解沙葱萤叶甲的过冷却点及抗寒能力有助于预测其分布范围及种群数量动态。【方法】采用热电偶法,在室内测定了沙葱萤叶甲各发育阶段的过冷却点;比较了幼虫在不同低温条件下(-6^-14℃)暴露2 h及在-5℃低温条件下暴露不同时间(0.5~8 d)的存活率。【结果】沙葱萤叶甲不同发育阶段的过冷却点存在显著差异,从低到高依次为卵(-29.8℃)、1龄幼虫(-14.6℃)、2龄幼虫(-13.3℃)、蛹(-12.1℃)、3龄幼虫(-10.2℃)和成虫(-9.0℃);越冬卵12月和1月的过冷却点最低,2月的过冷却点最高。随着处理温度的降低和处理时间的延长,幼虫的存活率降低。1,2和3龄幼虫在-5℃下的半致死时间(Ltime50)分别为3.84,3.80和2.28 d,低温处理2 h后半致死温度(Ltemp50)分别为-10.1,-9.1和-8.5℃,高于其过冷却点。【结论】说明沙葱萤叶甲幼虫为不耐寒冷型(chill-intolerant)。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 抗寒性 过冷却点 存活率 致死温度 致死时间
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绿僵菌与3种杀虫剂混用对沙葱萤叶甲的协同作用 被引量:6
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作者 常静 周晓榕 +1 位作者 李海平 庞保平 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期54-59,共6页
采用点滴法,于室内测定了阿维菌素、茚虫威和鱼藤酮3种杀虫剂单独使用及与绿僵菌混用对沙葱萤叶甲3龄幼虫的协同致死作用,以期为协调使用化学药剂和生防制剂防治沙葱萤叶甲提供参考。3种杀虫剂单独使用时的毒力测定结果表明,阿维菌素对... 采用点滴法,于室内测定了阿维菌素、茚虫威和鱼藤酮3种杀虫剂单独使用及与绿僵菌混用对沙葱萤叶甲3龄幼虫的协同致死作用,以期为协调使用化学药剂和生防制剂防治沙葱萤叶甲提供参考。3种杀虫剂单独使用时的毒力测定结果表明,阿维菌素对沙葱萤叶甲3龄幼虫的毒力最强,LD50值为4.80 ng/头,其次是茚虫威和鱼藤酮,LD50值分别为10.47和53.21 ng/头。采用不同浓度的3种杀虫剂分别处理绿僵菌24和48 h后,发现药剂对绿僵菌分生孢子萌发均有一定的抑制作用,但抑制率低于20%,且抑制率随着药剂浓度的降低和作用时间的延长而降低,其中茚虫威的平均抑制率最小,分别仅为1.89%±0.57%和0.89%±0.39%。将3种杀虫剂分别与绿僵菌孢子悬液混配使用,对防治沙葱萤叶甲3龄幼虫均具有协同增效作用:其中茚虫威与绿僵菌混用增效作用最强,比单独施用绿僵菌时LT50值缩短了8.12 d;阿维菌素与绿僵菌混用时LT50值缩短了7.60 d;鱼藤酮与绿僵菌混用时LT50值缩短了6.45 d。 展开更多
关键词 绿僵菌 阿维菌素 茚虫威 鱼藤酮 沙葱萤叶甲 协同作用
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内蒙古沙葱萤叶甲种群遗传多样性的微卫星分析 被引量:5
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作者 张鹏飞 周晓榕 +3 位作者 庞保平 常静 单艳敏 张卓然 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1005-1011,共7页
【目的】沙葱萤叶甲Galeruca daurica(Joannis)是一种近年来在内蒙古草原上猖獗成灾的新害虫,本研究旨在明确内蒙古沙葱萤叶甲不同地理种群间的遗传分化和基因交流程度。【方法】应用5对微卫星引物分析了沙葱萤叶甲8个地理种群的遗传... 【目的】沙葱萤叶甲Galeruca daurica(Joannis)是一种近年来在内蒙古草原上猖獗成灾的新害虫,本研究旨在明确内蒙古沙葱萤叶甲不同地理种群间的遗传分化和基因交流程度。【方法】应用5对微卫星引物分析了沙葱萤叶甲8个地理种群的遗传多样性、基因流和遗传分化。【结果】5个位点等位基因数为10~18,有效等位基因数为9.2796~16.0388,多态信息含量值为0.6760~0.8985,期望杂合度为0.3430~0.5284,说明所选5个微卫星位点均为高度多态性位点。8个种群的期望杂合度为0.2216~0.3701,平均值为0.2680;种群间遗传分化系数为0.1244~0.4116,平均值为0.2521;种群间基因流为0.3574~1.7596,平均值为0.9622。8个地理种群根据遗传距离聚为3个分支,遗传距离与地理距离呈显著的正相关关系(r=0.4854,P=0.0180)。【结论】沙葱萤叶甲种群遗传多样性低,不同地理种群之间基因流较小,遗传分化程度高;沙葱萤叶甲迁移能力弱和地理阻碍可能是限制其基因交流和导致遗传高度分化的主要原因。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 微卫星标记 遗传多样性 遗传分化 基因流 内蒙古
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基于线粒体COI基因序列的内蒙古沙葱萤叶甲种群遗传多样性及遗传分化 被引量:4
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作者 张鹏飞 周晓榕 +2 位作者 庞保平 谭瑶 田帅 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期332-341,共10页
沙葱萤叶甲Galeruca daurica(Joannis)是一种近年来在内蒙古草原上猖獗发生为害的新害虫,为明确内蒙古沙葱萤叶甲不同地理种群间的遗传多样性及遗传分化,本研究测定了内蒙古8个地理种群的197头沙葱萤叶甲的线粒体COI基因417 bp序列,利用... 沙葱萤叶甲Galeruca daurica(Joannis)是一种近年来在内蒙古草原上猖獗发生为害的新害虫,为明确内蒙古沙葱萤叶甲不同地理种群间的遗传多样性及遗传分化,本研究测定了内蒙古8个地理种群的197头沙葱萤叶甲的线粒体COI基因417 bp序列,利用Dna SP 5.0、Arlequin 3.11和Network 4.6.1.0等软件对沙葱萤叶甲种群间的遗传多样性、遗传分化、分子变异等进行分析。在所分析的197个COI序列中,共有43个变异位点和62个单倍型,其中2个单倍型为各种群共享,每个种群具有3个及以上的独享单倍型。总种群的单倍型多态度指数Hd为0.9466,不同地理种群单倍型多态度Hd在0.8889-0.9600。总群体固定系数Fst为0.0315,基因流Nm为15.37。中性检验结果不显著(Tajima's D=-1.6300,0.10>P>0.05),说明内蒙古沙葱萤叶甲在较近的历史时期内没有出现种群扩张现象。分子变异分析(AMOVA)结果表明,沙葱萤叶甲的遗传分化主要来自种群内部(96.34%),而种群间未发生明显的遗传分化。各种群间遗传分化程度与地理距离无显著相关性。不同地理种群的单倍型在中介网络图上散布在不同的分布群中,未形成明显的地理分布格局。结果表明沙葱萤叶甲不同地理种群遗传多样性高,基因交流程度高,遗传分化不明显且与地理距离无显著相关性。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 线粒体COI 遗传多样性 遗传分化 基因流 单倍型
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草原沙葱萤叶甲发生趋势及植物源农药田间防治效果 被引量:3
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作者 杜桂林 马崇勇 +3 位作者 洪军 张卓然 李新一 于成 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期253-256,共4页
为分析沙葱萤叶甲发生趋势,筛选出具有较好防治效果的药剂,对沙葱萤叶甲在内蒙古草原的为害进行了监测,并以幼虫为试虫,采用大型喷雾机械对3种常用植物源农药进行了防效试验。结果表明,0.3%印楝素乳油、1.3%苦参碱水剂及1.2%烟碱·... 为分析沙葱萤叶甲发生趋势,筛选出具有较好防治效果的药剂,对沙葱萤叶甲在内蒙古草原的为害进行了监测,并以幼虫为试虫,采用大型喷雾机械对3种常用植物源农药进行了防效试验。结果表明,0.3%印楝素乳油、1.3%苦参碱水剂及1.2%烟碱·苦参碱乳油在制剂用量30mL/667m2条件下,药后3、5d及10d对沙葱萤叶甲的防治效果为85.5%~100.0%,与4.5%高效氯氰菊酯水乳剂相比差异不显著(P〉0.05)。沙葱萤叶甲在内蒙古的为害呈加重趋势,在甘肃、宁夏、新疆等地发生可能性大,应加强实时监测。印楝素、苦参碱和烟碱·苦参碱对沙葱萤叶甲防治效果好,在草原沙葱萤叶甲绿色防控上具有很高的推广价值。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 发生趋势 印楝素 苦参碱 烟碱·苦参碱 植物源农药 绿色防控
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变温和恒温对沙葱萤叶甲发育速率的影响 被引量:3
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作者 周晓榕 韩凤阳 +3 位作者 昊翔 庞保平 杨晓东 张鹏 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2016年第5期931-935,共5页
沙葱萤叶甲为近年来在内蒙古草原猖獗成灾的新害虫,为明确温度对其发育速率的影响,分别设置5个变温组合(8/20℃,11/23℃,14/26℃,17/29℃和20/32℃)和6个恒温(13℃,17℃,21℃,25℃,29℃和33℃),比较了变温和恒温对沙葱萤叶甲幼虫和蛹发... 沙葱萤叶甲为近年来在内蒙古草原猖獗成灾的新害虫,为明确温度对其发育速率的影响,分别设置5个变温组合(8/20℃,11/23℃,14/26℃,17/29℃和20/32℃)和6个恒温(13℃,17℃,21℃,25℃,29℃和33℃),比较了变温和恒温对沙葱萤叶甲幼虫和蛹发育速率的影响。结果表明,不同变温组合和恒温对沙葱萤叶甲幼虫和蛹的发育速率有显著的影响。发育历期随温度的升高而缩短,在变温条件下,1龄幼虫期、2龄幼虫期、3龄幼虫期、总幼虫期和蛹期分别从最低温度组合(8/20℃,平均15℃)的11.00,13.44,23.18,46.42和16.89 d,缩短至最高温度组合(20/32℃,平均27℃)的4.92,4.63,9.17,17.83和5.83 d;在恒温条件下,13℃下幼虫不能发育和存活,1龄幼虫期、2龄幼虫期、3龄幼虫期、总幼虫期和蛹期分别从17℃的14.50,10.75,20.63,45.50和11.00 d,缩短至33℃的6.10,5.47,10.60,22.17和5.33 d。在变温条件下,幼虫和蛹的发育起点温度分别为7.44℃和8.48℃,有效积温分别为344.82日度和113.52日度;在恒温条件下,幼虫和蛹的发育起点温度分别为0.64℃和5.11℃,有效积温分别为714.28日度和147.06日度。变温促进了沙葱萤叶甲幼虫和蛹的发育,本研究结果为沙葱萤叶甲的预测预报及综合防控提供了科学依据。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 变温 恒温 发育速率 发育起点温度 有效积温
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韭萤叶甲为害中药薤白的观察 被引量:3
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作者 杨春清 丁万隆 《昆虫知识》 CSCD 1999年第5期275-277,共3页
韭萤叶甲是为害中药薤白的重要害虫,本文初步研究了韭萤叶甲的生物学特征及生活史,并提出了相应的防治措施。
关键词 中药薤白 韭萤叶甲 形态学 防治
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寄主植物对沙葱萤叶甲幼虫生长发育及取食的影响 被引量:19
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作者 昊翔 周晓榕 +2 位作者 庞保平 张卓然 马崇勇 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期854-858,共5页
沙葱萤叶甲(Galeruca daurica Joannis)为近年来严重危害内蒙古草原的重要害虫,为揭示其成灾机制,在室内测定了13种内蒙古草原常见牧草对沙葱萤叶甲幼虫生长发育、存活和取食的影响.结果表明:沙葱萤叶甲幼虫食性窄,主要取食沙葱(All... 沙葱萤叶甲(Galeruca daurica Joannis)为近年来严重危害内蒙古草原的重要害虫,为揭示其成灾机制,在室内测定了13种内蒙古草原常见牧草对沙葱萤叶甲幼虫生长发育、存活和取食的影响.结果表明:沙葱萤叶甲幼虫食性窄,主要取食沙葱(Allium mongolium)、野韭(A.ramosum)及多根葱(A.polyrhizum)等百合科葱属植物,其他供试植物基本无取食现象.沙葱、野韭及多根葱对沙葱萤叶甲幼虫期、蛹期和取食量有显著影响,而对其存活率影响不显著.幼虫取食沙葱、野韭和多根葱时,幼虫期和蛹期分别为24.27,27.87,33.13 d和6.61,7.40,8.43d,取食量分别为393.76,442.51和496.09 mg(鲜重),3龄幼虫食量最大,占幼虫期总食量的63.45%~67.46%,约为2龄幼虫的3倍、1龄幼虫的5倍.因此,沙葱是沙葱萤叶甲幼虫的最适寄主植物,其次为野韭,然后是多根葱;化学防治时,应在幼虫3龄以前进行. 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 寄主植物 发育历期 存活率 取食量
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沙葱萤叶甲的形态特征和生物学特性研究 被引量:18
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作者 昊翔 周晓榕 +2 位作者 庞保平 张卓然 包祥 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1106-1108,共3页
采用野外调查和室内饲养相结合的方法,明确了沙葱萤叶甲(Galeruca daurica)的生活史和主要生物学特性,以期为该虫的预测预报和防治提供必要的基础。在锡林郭勒草原,沙葱萤叶甲1年发生1代,以卵在牛粪、石块及草丛下越冬,越冬卵最早于4月... 采用野外调查和室内饲养相结合的方法,明确了沙葱萤叶甲(Galeruca daurica)的生活史和主要生物学特性,以期为该虫的预测预报和防治提供必要的基础。在锡林郭勒草原,沙葱萤叶甲1年发生1代,以卵在牛粪、石块及草丛下越冬,越冬卵最早于4月上旬开始孵化,4月下旬为孵化盛期。幼虫大量取食新鲜的沙葱(Allium mongolium)、多根葱(Allium polyrhizum)及野韭(Allium ramosum)等葱属植物。5月中旬老熟幼虫开始化蛹,6月上旬成虫开始羽化,随后进入越夏蛰伏期。8月下旬雌雄成虫开始交尾产卵。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 生活史 生物学特性 形态特征
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低温对沙葱萤叶甲越冬卵存活和发育的影响 被引量:15
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作者 高靖淳 周晓榕 +3 位作者 庞保平 包祥 罗建平 额尔登其木格 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期881-886,共6页
【目的】沙葱萤叶甲Galeruca daurica(Joannis)是近年来在内蒙古草原暴发成灾的一种新害虫,以卵在牛粪、石块及草丛下越冬,了解其越冬卵的抗寒能力有助于预测其分布范围及种群数量动态。【方法】在室内测定了沙葱萤叶甲越冬卵在不同低... 【目的】沙葱萤叶甲Galeruca daurica(Joannis)是近年来在内蒙古草原暴发成灾的一种新害虫,以卵在牛粪、石块及草丛下越冬,了解其越冬卵的抗寒能力有助于预测其分布范围及种群数量动态。【方法】在室内测定了沙葱萤叶甲越冬卵在不同低温条件下(-18^-39℃)暴露12和24 h及在-30℃低温条件下暴露不同时间(0~60 d)的存活率以及存活卵的发育历期。【结果】低温强度和暴露时间对沙葱萤叶甲越冬卵的存活率有显著影响,随着温度的降低和暴露时间的延长,越冬卵的存活率降低。当温度≤-33℃暴露12 h或≤-30℃暴露24 h,越冬卵存活率显著低于其相应的对照(25℃)。越冬卵低温暴露12和24 h的致死中温度(LT50)分别为-33.08和-32.13℃,在-30℃下的致死中时间(Lt50)为33.33 d。经-36℃低温暴露12 h或≤-33℃低温暴露24 h后,存活的越冬卵发育历期显著延长,而-30℃低温暴露30 d内差异不显著。【结论】沙葱萤叶甲越冬卵抗寒能力强,冬季低温通常不会造成越冬卵的大量死亡。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 抗寒性 越冬卵 存活率 致死温度 致死时间 发育历期
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萤叶甲属一新种(鞘翅目,叶甲科,萤叶甲亚科)(英文) 被引量:1
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作者 Ron Beenen 杨星科 《动物分类学报》 CSCD 北大核心 2007年第1期67-69,共3页
记述采自我国四川贡嘎山的萤叶甲属1新种:匀刻萤叶甲Galeruca regularissp.nov.。模式标本中正模保存在中国科学院动物研究所标本馆,副模由荷兰Ron Beenen博士个人收藏。
关键词 鞘翅目 叶甲科 萤叶甲亚科 萤叶甲属 新种
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沙葱萤叶甲成虫越夏期间糖类、蛋白及脂肪含量的变化 被引量:13
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作者 陈龙 周晓榕 +2 位作者 高利军 谭瑶 庞保平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期808-814,共7页
【目的】明确沙葱萤叶甲Galeruca daurica成虫在越夏不同阶段主要生理生化指标变化的特点,为进一步揭示其越夏的机理提供基础。【方法】分别采用蒽酮硫酸法和氯仿-甲醇法测定越夏不同阶段(越夏前、越夏期和越夏后)的沙葱萤叶甲成虫体内... 【目的】明确沙葱萤叶甲Galeruca daurica成虫在越夏不同阶段主要生理生化指标变化的特点,为进一步揭示其越夏的机理提供基础。【方法】分别采用蒽酮硫酸法和氯仿-甲醇法测定越夏不同阶段(越夏前、越夏期和越夏后)的沙葱萤叶甲成虫体内总糖、海藻糖、糖原、脂肪及水分含量;采用考马斯亮蓝G-250染色法测定总蛋白含量。【结果】总糖、水分和总蛋白含量在沙葱萤叶甲成虫越夏前(分别为26.81μg/mg,77.47%和63.17μg/mg)和越夏后(分别为26.41~26.85μg/mg,75.29%~76.65%和59.53~64.93μg/mg)显著高于越夏期(分别为18.77~21.14μg/mg,61.50%~67.20%和39.82~52.54μg/mg),而糖原含量变化趋势正好相反(越夏前:8.43μg/mg;越夏后:5.91~6.14μg/mg;越夏期:10.18~11.58μg/mg),脂肪含量在越夏后(11.48%~11.65%)显著低于越夏前(42.48%)和越夏期(36.05%~64.79%);脂肪和总蛋白含量在越夏期间逐渐下降,而水分、总糖和糖原含量变化不明显;海藻糖含量在越夏不同阶段波动较大(2.66~25.31μg/mg)。【结论】脂肪和糖原是沙葱萤叶甲成虫越夏的主要能源物质。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 越夏 滞育 糖类 糖原 海藻糖 蛋白 脂肪
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沙葱萤叶甲热激蛋白基因GdHsp70的克隆与表达模式分析 被引量:13
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作者 谭瑶 张玉 +3 位作者 霍志家 周晓榕 单艳敏 庞保平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期865-875,共11页
【目的】本研究旨在克隆沙葱萤叶甲Galeruca daurica热激蛋白Hsp70基因,并对其进行序列和表达模式分析,探讨该基因在沙葱萤叶甲生长发育及响应温度胁迫方面的作用。【方法】采用RT-PCR和RACE技术从沙葱萤叶甲2龄幼虫中克隆Hsp70基因,并... 【目的】本研究旨在克隆沙葱萤叶甲Galeruca daurica热激蛋白Hsp70基因,并对其进行序列和表达模式分析,探讨该基因在沙葱萤叶甲生长发育及响应温度胁迫方面的作用。【方法】采用RT-PCR和RACE技术从沙葱萤叶甲2龄幼虫中克隆Hsp70基因,并进行生物信息学分析;用Wo LF PSORT在线软件进行亚细胞定位预测;采用实时荧光定量PCR检测该基因在沙葱萤叶甲成虫不同组织(头、胸和腹)中、不同发育阶段(卵、1-3龄幼虫、蛹、雌雄成虫)、不同温度(-14,-10,-5,0,5,10,15,20,25和30℃)处理1 h的2龄幼虫及0℃下分别处理0 min,15 min,30min,1 h,1.5 h,2 h和3 h时卵中的相对表达量。【结果】克隆获得一个沙葱萤叶甲Hsp70基因并命名为GdHsp70(GenBank登录号:KY460462),该基因全长2 340 bp,开放阅读框(ORF)1 899 bp,编码632个氨基酸,预测蛋白质分子量为70.12 k D,等电点(p I)为4.79,无跨膜区,无信号肽。蛋白质亚细胞定位预测该蛋白主要位于细胞质内。蛋白质结构域分析表明,GdHsp70有3个功能保守区。同源比对与系统进化分析表明,GdHsp70与分类学关系上较为接近的昆虫的同源蛋白间有较高的相似度。组织特异性和不同发育阶段表达分析表明,GdHsp70在沙葱萤叶甲成虫胸部和卵期表达量最高;高温和低温胁迫均能诱导沙葱萤叶甲2龄幼虫体内GdHsp70的表达,其中-10℃处理1 h表达量最高;0℃低温处理卵15 min至3 h后均能诱导GdHsp70不同程度的表达上调,其中处理1 h上调幅度最大。【结论】沙葱萤叶甲GdHsp70与该虫的生长发育相关,并对高低温胁迫的响应有重要作用。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 热激蛋白70 基因克隆 表达分析 温度胁迫
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沙葱萤叶甲海藻糖酶基因GdTre1的克隆、分子特性和表达分析 被引量:9
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作者 陈龙 谭瑶 +3 位作者 周晓榕 庞保平 格希格都仁 孙志鹏 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期271-281,共11页
【目的】海藻糖酶(trehalase,Tre)作为昆虫体内海藻糖代谢的关键性酶,在昆虫能量调节和生长发育中具有重要作用。本研究旨在克隆获得沙葱萤叶甲Galeruca daurica海藻糖酶基因,并对其表达模式进行定量分析,以期探究海藻糖酶在沙葱萤叶甲... 【目的】海藻糖酶(trehalase,Tre)作为昆虫体内海藻糖代谢的关键性酶,在昆虫能量调节和生长发育中具有重要作用。本研究旨在克隆获得沙葱萤叶甲Galeruca daurica海藻糖酶基因,并对其表达模式进行定量分析,以期探究海藻糖酶在沙葱萤叶甲生长发育和成虫夏滞育中的作用。【方法】根据沙葱萤叶甲转录组数据,采用RACE技术,克隆得到Tre基因的c DNA全长,并进行生物信息学分析;应用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)技术检测其在沙葱萤叶甲不同发育阶段[卵、1-3龄幼虫、预蛹、蛹、成虫(羽化后3,7,10,15,25,40,60,80和100 d)]、成虫不同组织(头、胸和腹)以及3日龄成虫在不同温度(15,20,25,30,35和40℃)胁迫下的表达水平;采用3,5-二硝基水杨酸法测定不同日龄成虫体内海藻糖酶活性。【结果】克隆获得了沙葱萤叶甲可溶性海藻糖酶基因,并命名为Gd Tre1(Gen Bank登录号:KY697913),该基因全长1 933 bp,开放阅读框1 704bp,编码567个氨基酸;蛋白预测分子量为66.56 k D,等电点为6.62;编码蛋白具有海藻糖酶超基因家族典型的功能结构域,包含1条信号肽,不具有跨膜结构。同源序列比对和系统发育分析表明,Gd Tre1与马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata Tre1b的同源性最高,氨基酸序列一致性达70.25%。RT-q PCR检测结果表明,Gd Tre1在沙葱萤叶甲各发育阶段均有表达,其中在卵期和成虫滞育期间高表达,而在幼虫、预蛹、蛹及成虫滞育前低表达;在成虫不同组织中,通常在腹部中表达量最高,其次为胸部,最低为头部;Gd Tre1表达量随着温度升高而上升,30℃达最高值,而后随温度升高略有下降。沙葱萤叶甲不同日龄成虫体内Gd Tre1表达量及Tre活性存在显著差异,且Gd Tre1表达量与Tre活性变化趋势一致。【结论】海藻糖酶与沙葱萤叶甲生长发育和成虫夏滞育有密切的关系。该结果为进一步揭示该虫的夏滞育分子机理提供了必要的基础。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 海藻糖酶 基因克隆 夏滞育 RT-QPCR
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沙葱萤叶甲成虫触角感器超微结构及对沙葱挥发物的触角电位反应 被引量:6
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作者 李玲 李娜 庞保平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期333-342,共10页
【目的】明确沙葱萤叶甲Galeruca daurica成虫触角感器类型及对寄主植物挥发物的电生理反应,为进一步研究沙葱萤叶甲的化学感受机理奠定基础。【方法】使用扫描电子显微镜观察沙葱萤叶甲成虫触角上的感器类型;采用顶空动态吸附收集法采... 【目的】明确沙葱萤叶甲Galeruca daurica成虫触角感器类型及对寄主植物挥发物的电生理反应,为进一步研究沙葱萤叶甲的化学感受机理奠定基础。【方法】使用扫描电子显微镜观察沙葱萤叶甲成虫触角上的感器类型;采用顶空动态吸附收集法采集寄主植物沙葱Allium mongolium的挥发物,利用气质联用仪测定沙葱主要挥发物组分,并利用触角电位技术(electroantennogram,EAG)测定沙葱萤叶甲成虫对这一寄主植物主要挥发物成分的电生理反应。【结果】沙葱萤叶甲成虫触角上分布的感器主要有5种类型,分别是毛形感器(sensilla trichodea,ST)、刺形感器(sensilla chaetica,SC)、锥形感器(sensilla basiconica,SB)、钟形感器(sensilla campaniformia,SCa)和Böhm氏鬃毛(Böhm bristles,BB)。沙葱挥发物主要由32种化合物组成,其中,含硫化合物占总量的49.3%。雌成虫对二烯丙基硫醚、二烯丙基二硫、顺-2-己烯-1-醇、2-己烯醛、苯甲酸甲酯和己醛6种化合物表现出较强的触角电位反应,雄成虫仅对二烯丙基二硫和2-己烯醛表现出较强的触角电位反应,雌成虫对多数气味化合物的触角电位反应均强于雄成虫。当浓度为1 mol/L时,测试的6种化合物(除2-己烯醛外)均能激发沙葱萤叶甲成虫产生最强的触角电位反应。【结论】沙葱释放的6种化合物二烯丙基硫醚、二烯丙基二硫、顺-2-己烯-1-醇、2-己烯醛、苯甲酸甲酯和己醛能引起沙葱萤叶甲成虫强烈的触角电位反应,且除2-己烯醛外,沙葱萤叶甲对各化合物的EAG反应随着浓度的上升而增强。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 触角感器 沙葱 挥发物 触角电位
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沙葱萤叶甲化学感受蛋白基因的鉴定及表达谱分析(英文) 被引量:5
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作者 李玲 周渊涛 +2 位作者 谭瑶 周晓榕 庞保平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期646-656,共11页
【目的】沙葱萤叶甲Galeruca daurica是一种在内蒙古草原上爆发成灾的新害虫。昆虫的化学感受蛋白(CSPs)是一类水溶性小分子蛋白,其主要功能是识别和传导环境中的化学刺激至受体,参与众多昆虫行为。本研究旨在鉴定沙葱萤叶甲化学感受蛋... 【目的】沙葱萤叶甲Galeruca daurica是一种在内蒙古草原上爆发成灾的新害虫。昆虫的化学感受蛋白(CSPs)是一类水溶性小分子蛋白,其主要功能是识别和传导环境中的化学刺激至受体,参与众多昆虫行为。本研究旨在鉴定沙葱萤叶甲化学感受蛋白基因,并对其表达谱进行分析。【方法】通过筛选本实验室组装的沙葱萤叶甲转录组鉴定沙葱萤叶甲化学感受蛋白基因;采用实时荧光定量PCR方法分析其在沙葱萤叶甲不同发育阶段(卵、1-3龄幼虫、蛹和成虫)和成虫组织[触角、头(去触角)、胸、腹、足和翅]中的表达水平。【结果】鉴定出10个化学感受蛋白基因,将其命名为Gdau CSP1-10(Gen Bank登录号:KY885471-KY885480)。10条编码蛋白的氨基酸序列一致性范围为17.27%~62.79%,彼此间分化程度较高。通过NCBI的Blast比对结果显示,Gdau CSPs与榆黄毛萤叶甲Pyrrhalta maculicollis的Pmac CSP氨基酸序列一致性最高,为90%。系统发育分析表明,4种Gdau CSPs首先与榆黄毛萤叶甲的Pmac CSPs聚为一支。实时荧光定量PCR结果显示,Gd CSPs在不同发育阶段中的表达量有显著差异,Gdau CSP4-5,Gdau CSP7-8和Gdau CSP10 5个Gd CSPs在成虫中的表达量显著高于其他发育阶段,而Gd CSP2在卵中的表达量显著高于其他发育阶段;Gd CSPs不仅表达于成虫触角中,在头(去触角)、胸、腹、足、翅等其他部位也有表达,且10个Gd CSPs在沙葱萤叶甲成虫各组织中有着不同的表达谱,其中Gdau CSP2,Gdau CSP4,Gdau CSP5,Gdau CSP8和Gdau CSP9 5个Gd CSPs在雌成虫触角中的表达量显著高于其他组织。【结论】结果提示化学感受蛋白在沙葱萤叶甲的生长发育和化学感受过程中可能起着不同的作用。本研究为进一步研究沙葱萤叶甲化学感受蛋白的生理功能及化学通讯的分子机理奠定了必要的基础。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 化学感受蛋白 表达谱 系统发育分析 qPCR
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沙葱萤叶甲气味结合蛋白GdauOBP20的基因克隆、原核表达及其结合特性 被引量:6
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作者 李玲 谭瑶 +1 位作者 周晓榕 庞保平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期3705-3712,共8页
【目的】沙葱萤叶甲(Galeruca daurica)是近年来在内蒙古草原上暴发成灾的新害虫,本文旨在克隆沙葱萤叶甲气味结合蛋白基因GdauOBP20的cDNA全长序列,明确其重组蛋白与寄主植物挥发物的结合特性,为揭示沙葱萤叶甲嗅觉的分子机理打下基础... 【目的】沙葱萤叶甲(Galeruca daurica)是近年来在内蒙古草原上暴发成灾的新害虫,本文旨在克隆沙葱萤叶甲气味结合蛋白基因GdauOBP20的cDNA全长序列,明确其重组蛋白与寄主植物挥发物的结合特性,为揭示沙葱萤叶甲嗅觉的分子机理打下基础。【方法】基于沙葱萤叶甲转录组数据,利用RACE技术对沙葱萤叶甲气味结合蛋白基因GdauOBP20进行cDNA全长克隆;利用生物信息学软件预测分析其编码蛋白的理化特性和结构特征;通过原核表达系统表达目的蛋白,并使用Ni-NTA Agarose亲和层析柱进行重组蛋白纯化。最后采用荧光竞争结合的方法,以N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)为荧光探针,检测GdauOBP20重组蛋白与13种主要寄主挥发物的结合情况。【结果】GdauOBP20的cDNA全长序列为567 bp(GenBank登录号MK250532),其中5′末端非编码区长24 bp,3′末端非编码区长123 bp,具有ployA尾结构;开放阅读框(ORF)全长为420 bp,编码139个氨基酸。氨基酸序列中含有4个保守的半胱氨酸位点,属于Minus-C OBP亚家族。预测蛋白三级结构中含有6个α螺旋和两对由半胱氨酸形成的二硫键。成功构建了重组表达载体并获得了高纯度的重组蛋白。重组蛋白GdauOBP20与荧光探针1-NPN的结合常数为12.8μmol·L^-1,结合能力较好,可作为本试验的荧光报告子。在所测的13种主要寄主植物挥发物中,除与二烯丙基三硫醚无结合能力外,GdauOBP20重组蛋白与其他12种寄主植物挥发物均有不同程度的结合能力,其中与对二甲苯和环庚三烯的结合能力最强,解离常数分别为22.91和26.55μmol·L^-1,而与月桂烯结合能力最弱,解离常数为116.29μmol·L^-1。【结论】沙葱萤叶甲GdauOBP20能与寄主植物的多种主要挥发性物质结合,推测其可能在沙葱萤叶甲对寄主植物的定位过程中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 气味结合蛋白 RACE克隆 原核表达 荧光竞争结合试验
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沙葱萤叶甲海藻糖合成酶基因GdTPS的克隆及对温度胁迫的响应 被引量:6
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作者 路标 谭瑶 +2 位作者 周晓榕 邢莉 庞保平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1384-1393,共10页
【目的】海藻糖合成酶(trealose-6-phosphate synthase,TPS)是海藻糖合成过程中的关键酶之一。本研究旨在克隆沙葱萤叶甲Galeruca daurica海藻糖合成酶基因,分析其对不同温度胁迫的响应,以期进一步揭示沙葱萤叶甲耐温性的分子调控机制... 【目的】海藻糖合成酶(trealose-6-phosphate synthase,TPS)是海藻糖合成过程中的关键酶之一。本研究旨在克隆沙葱萤叶甲Galeruca daurica海藻糖合成酶基因,分析其对不同温度胁迫的响应,以期进一步揭示沙葱萤叶甲耐温性的分子调控机制。【方法】通过RACE技术克隆沙葱萤叶甲TPS基因的全长cDNA序列,并对该基因进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR方法检测TPS基因在不同温度下沙葱萤叶甲2龄幼虫中的表达量变化。【结果】克隆获得沙葱萤叶甲TPS基因,将其命名为GdTPS(Gen Bank登录号:KY460114),该基因全长2 706 bp,开放阅读框(ORF)长2 496 bp,编码831个氨基酸;蛋白预测分子量为94.05 kD,等电点为6.82,无信号肽和跨膜结构,包含3个N-糖基化位点。GdTPS有两个保守功能区,与其他昆虫TPS具有较高的同源性,其中与马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata TPS亲缘关系最近,氨基酸序列一致性为88%。实时荧光定量PCR结果表明,温度低于25℃(对照)时,GdTPS表达量随着温度下降而上升,-10℃时达到最高值;高于25℃时,GdTPS表达量随着温度上升而上升,40℃时达到最高值。【结论】沙葱萤叶甲幼虫通过上调GdTPS的表达来应对高温和低温胁迫,该结果为揭示TPS在昆虫应对温度胁迫过程中作用的分子机制提供了基础。 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 海藻糖合成酶 基因克隆 温度胁迫 实时荧光定量PCR
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