抗IL-2受体γ链抗体抑制T细胞表达survivin的研究

目的 探讨体外封闭IL-27链抑制T细胞表达survivin的机制。方法 分离Balb／C、C57BL／6小鼠脾细胞进行双向混合淋巴细胞培养（MLR）及conA刺激试验。通过免疫细胞化学染色方法检测survivin表达及其规律。不同天数内加入抗γ公共链抗体，流式细胞术检测细胞凋亡（PEcy5-CD3，FTTE—Annexin-V）、细胞周期（PI）及CD25、survivin表达。结果 同种抗原及ConA刺激后脾细胞可检测到survivin、CD25表达。活化淋巴细胞表达survivin，加抗γ公共链抗体后，不能检测到survivin的表达，而CD3^＋ Annexin-V^＋细胞数增加，M期细胞数下降，凋亡细胞（前G1期）增加；但在MLR后第1～2天，抗γ公共链抗体加入并不能使凋亡细胞增加。结论 抗IL-2γ链抗体可诱导活化的T细胞凋亡，间接抑制活化的T细胞的survivin表达。

外显子测序联合Sanger测序行X-连锁重症联合免疫缺陷家系分析及产前诊断1例报告

目的探讨外显子测序联合Sanger测序应用于X-连锁重症联合免疫缺陷(X-SCID)家系分析及产前诊断的可行性。方法回顾性分析1例X-SCID先证者病史及家族史。用外显子测序技术对先证者免疫缺陷相关基因的外显子进行测序,捕获致病基因后,提取其父母外周血DNA,采用Sanger测序技术进行验证。确定先证者该致病基因遗传于其母亲后,其母亲再次妊娠9周时绒毛取样提取DNA并采用Sanger测序行产前诊断。结果外显子测序结果提示先证者X染色体白细胞介素2受体的γ共用链(IL2RG)基因存在错义突变(c.713G>A,p.Ser238Asn)。Sanger测序结果显示,先证者母亲该位点存在杂合突变,其父亲该位点未见异常。先证者母亲再次妊娠时胚胎绒毛组织X染色体IL2RG基因存在错义突变,诊断胎儿为X-SCID。结论应用外显子测序法捕获X-SCID的相关致病基因,再使用Sanger测序验证并行孕早期产前诊断,可有效预防X-SCID患儿出生。

基因突变致X-连锁重症联合免疫缺陷病1例并文献复习

重症联合免疫缺陷病(SCID)是一组以T细胞发育和功能严重破坏为特征、可导致机体发生免疫缺陷的疾病。X-连锁SCID(X-SCID)是SCID最常见的一种形式,占全部病例的50%~60%。X-SCID患儿发病早期无典型表现,若诊治不及时预后较差。本文回顾性分析贵州医科大学附属医院收治的1例X-SCID患儿的临床资料并复习相关文献,总结白细胞介素2受体共同γ链基因突变所致X-SCID的临床特征及诊疗重点供临床参考。同时也希望临床医师深入认识并掌握该疾病相关特点,对可疑患者尽早进行基因检测明确诊断并行免疫重建治疗,以提高其生存率、改善预后。

抗γ公共链抗体抑制T淋巴细胞增殖的试验

目的探讨抗γ公共链抗体体外抑制T细胞增殖的机理。方法分离BALBc、C57BL6脾细胞进行双向混合淋巴细胞培养(MLC)。第1组于MLC同时加入抗γ公共链抗体;第2组于MLC第3天加入抗γ公共链抗体。MLC为阳性对照,单独BALBc小鼠脾细胞培养为阴性对照。1～5d取培养细胞,检测培养细胞的增殖(羧基荧光素乙酰乙酸CFSE染色)、细胞凋亡(PECD3,FITCannexinⅤ)、细胞周期(PI)。脾细胞survivin表达通过免疫细胞染色方法检测。结果阳性对照在第3天开始检测到明显的分裂峰而第1、2组都未出现分裂峰。第1、2组在第1～2天未发现细胞凋亡增加,分别于第3、4天检测到部分T细胞凋亡、M期细胞数下降及凋亡细胞数增加;第2组与阳性对照组M期细胞的百分比例差异有统计学意义[(25.97±12.85)%vs(6.36±4.81)%,P=0.008)]。MLC第3天后,在阳性对照组检测到survivin表达;阴性组及试验组均未检测到survivin,其中阳性对照组与第1组的survivin阳性细胞数百分比差异有统计学意义[(18.00±14.13)%vs(1.57±1.61)%,P=0.043]。结论阻断γ公共链可以通过诱导同种反应性T细胞凋亡途径从而抑制T细胞增殖。