不同灵芝菌丝体水提物对乙醇诱导LO2肝细胞损伤的保护作用

为了探讨不同灵芝菌丝体水提物对乙醇诱导LO2肝细胞损伤的保护作用,本文分析了7种不同灵芝菌株发酵菌丝体水提物对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护作用。利用乙醇诱导LO2细胞建立体外肝损伤模型,并以细胞存活率、谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferase,AST)、活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和丙二醛(Malondiadehyde,MDA)水平为指标考察灵芝菌丝体水提物对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护效果。结果表明,7种灵芝菌株的菌丝体水提物均具有不同程度的保护作用。综合比较,G0119与G0154菌丝体的水提物作用效果较优,相较模型组,LO2细胞存活率显著提高(P<0.05),细胞培养液中的ALT、AST活力显著降低(P<0.05),细胞内ROS水平显著降低(P<0.05),SOD活力、GSH含量显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05)。经相关性分析,发现水提物中多糖组分2的分子量大小与其保肝活性呈正相关,即分子量越大,活性越强。综上,灵芝菌丝体水提物对乙醇诱导的体外肝损伤起到保护作用,并且G0119与G0154菌株的作用效果较优,其保肝作用与提取物中多糖组分的分子量大小相关。

苯酚-硫酸法测定灵芝菌丝多糖含量的研究

目的:建立紫外-可见分光光度法测定灵芝菌丝中多糖含量的方法。方法:以无水葡萄糖为对照品,苯酚和硫酸为显色剂,在485nm波长处测定灵芝菌丝体中多糖含量。结果:灵芝菌丝中多糖含量0~0.11520 mg范围内线性关系良好(R2=0.9992),精密度RSD为1.42%。样品溶液在配制后12 h内稳定性较好,平均加标回收率为100.61%,RSD为0.97%。结论:该方法方便快捷,重现性好,结果可靠,适用于测定灵芝菌丝体中多糖含量。

灵芝子实体和菌丝体的提取物及其各纯化组份生物活性的比较

从不同品种的灵芝中筛选出了多糖含量最高的菌株GL2为材料,利用柱层析技术从子实体和菌丝体提取物中分离得到多个组分。实验发现子实体组分P3,P31及P32对人白血病细胞株K562的生长有明显地抑制作用,这三个组分中只有P32对另一白血病细胞株HL-60有抑制作用。免疫活性测试的结果显示子实体各组分在刺激小鼠脾淋巴细胞,T和B细胞的增殖,提高人外周血中NK细胞杀伤活性方面比菌丝体的作用强;进一步的实验发现子实体与菌丝体相应组分在刺激人外周血中的T和B淋巴细胞增殖方面的活性差异不大。子实体和菌丝体提取物各组份均可剂量依赖型的促进PBMC分泌TNF-α。菌丝体提取物各组分对TNF-释放量的影响在低浓度时与子实体各组份相当,在高浓度时要明显好于赤芝子实体提取物各组分。

灵芝三萜成分分析

目的 建立灵芝子实体、孢子粉、发酵菌丝体三萜成分的HPLC含量测定方法。方法 以赤芝孢子酸A(ganosporericacidA ,1) ,赤芝酸A(lucidenicacidA ,2 ) ,灵芝酸B(ganodericacidB ,3)和灵芝酸C(ganodericacidC ,4 )为对照品 ;色谱柱 :反相C1 8;流动相 :乙腈 水 (37∶6 3) ;流速 :1 0mL·min- 1 ;检测波长 :UV 2 5 4nm。结果 进样量在 0 2～ 1μg有良好的线性关系 ,(1) ,(2 ) ,(3)和 (4)的加样回收率分别为 10 0 9% ,10 1 2 % ,10 1 3%和 10 1 7%。 结论 本法快速、简便、灵敏和分离度好 ,适用于灵芝子实体、孢子粉、发酵菌丝体及相关制剂的三萜类物质检查和含量测定。

灵芝菌丝体发酵条件优化研究

研究灵芝菌丝体发酵中碳源、氮源、pH和时间对菌丝干重的影响来优化灵芝菌丝体的发酵条件。结果表明,培养条件中对灵芝菌丝体生长影响的顺序为:氮源>碳源>时间>pH。通过L9(34)正交优化试验确定的灵芝菌丝体液体最佳发酵条件为:玉米粉2%,菜籽饼粉0.4%,培养时间7 d,pH值7.0。本研究结果为灵芝菌丝体发酵工业化生产提供了理论参考和试验依据。

超声波法提取灵芝菌丝体总三萜的工艺

采用超声波浸提法从灵芝菌丝体中提取总三萜,以熊果酸作为标准品,采用分光光度计法测定其含量。以正交试验设计优化工艺条件,在85%的乙醇溶液中浸泡2h,150W功率下超声提取30min,从灵芝菌丝体中提取的总三萜最多。

灵芝菌生物活性多糖与总糖的测定

以75%乙醇水溶液分离可溶性单糖和低聚糖,在3.5mol/LH2SO4溶液中和100℃下水解90min,使活性多糖(β-D-聚葡萄糖)水解成葡萄糖,然后用兰-埃农氧化还原滴定法滴定,终点颜色为浅棕色。较液相色谱法,不仅精密度明显高,而且测定值高出约四个百分点,更吻合实际组成。该方法生产商采用为生产工艺控制和产品质量认定的分析方法。

深层发酵用高产灵芝胞内多糖菌株的筛选

对41个杂交灵芝(Ganoderma lucidum)菌株进行深层发酵培养,评价其菌丝体干重、胞内多糖含量和得率,及胞内多糖分子量分布特征和刺激巨噬细胞释放NO的活性,结果表明:杂交菌株的菌丝体干重、胞内多糖含量和得率与亲本相比有不同程度的差异,与两个亲本相比,菌丝体干重提高的有29个菌株,胞内多糖含量显著增加的有3个菌株,胞内多糖得率显著提高的有7个菌株;不同菌株胞内多糖均主要含有两个组分,且含量差异较大;不同菌株的胞内多糖在200μg·mL^(-1)时均有明显的刺激巨噬细胞释放NO的活性。综合考虑最终筛选出深层发酵用菌株GZ02,其胞内多糖得率最高,为1.34 g·L^(-1)比亲本G0130和G0154分别提高120%和103%,在50 L发酵罐中对GZ02进行小试,发酵168 h后,菌丝体干重达23.14 g·L^(-1),胞内多糖得率达1.43 g·L^(-1)。

富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵条件优化

以富硒大豆为原料,采用液体发酵技术对富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵条件进行研究。富硒大豆经浸泡、磨浆、过滤、煮沸后接种灵芝菌种发酵,以水解度为指标,通过单因素和正交试验对温度、初始pH值、摇瓶转速及豆浆质量分数等发酵条件进行优化。结果表明:富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵最佳条件为发酵温度28℃、培养基初始pH5.8、摇瓶转速160r/min、豆浆质量分数5%、发酵时间132h。在最佳发酵条件下,大豆蛋白的水解度达27.8%、大豆多肽产量7.0178mg/L、多糖产量1.75mg/L、灵芝酸产量0.66mg/L。

超声波提取灵芝菌丝体中灵芝酸的研究

目的:利用超声波对灵芝菌丝体中灵芝酸的提取工艺进行研究。方法:以单位灵芝菌丝体中灵芝酸的提取量为指标,采用单因素分析和正交实验,对影响灵芝菌丝体中灵芝酸提取的乙醇浓度、超声波浸提时间、浸提pH和料液比四个因素进行研究。结果:乙醇浓度100%,超声波浸提时间90min,pH2·5,加12倍量乙醇浸提为最佳工艺条件,所提取灵芝酸含量达46·7mg·g-1。结论:采用超声波提取技术可以较大幅度提高灵芝酸的提取得率,大大缩短提取时间。

超声波法提取灵芝菌丝体总三萜

采用超声波浸提法从灵芝菌丝体中提取总三萜,以熊果酸作为标准品,采用分光光度计法测定其含量。以正交试验设计优化工艺条件,在85%的乙醇溶液中浸泡2h,150W功率下超声提取30min,从灵芝菌丝体中提取的总三萜最多。

赤芝菌丝体活性多糖的分离、纯化及结构研究

赤芝(Ganoderma lucidum)固体发酵菌丝体经水堤、乙醇沉淀得总菌丝体多糖,药理实验表明,总多糖具有明显的增强免疫和抗肿瘤活性。总多糖经DEAE-Sephadex柱层析分离、脱色、脱盐得多糖 GLMB_0。总多糖经硼酸型DEAE-Cellulose柱层析分离、脱色、脱盐得多糖GLMB_1。Sephadex柱层析法和旋光法测定了两多糖的纯度。GLMB_0为肽杂多糖,GLMB_1为杂多糖。笔者通过IR、完全酸水解、GC、Smith降解、酶解、β-消除反应、CNMR对GLMB_1、GLMB_0进行了结构研究。

鲜菌草与灵芝菌丝发酵菌质对奶牛产奶品质和血液生理生化指标的影响

研究旨在观察鲜菌草与灵芝菌丝发酵菌质对奶牛产奶品质和血液生理生化指标的影响。选取产奶量相近,胎次(1~2)胎,泌乳中期,体重无显著性差异,遗传组成基本相似的荷斯坦奶牛10头,按统计学原理,随机分为试验组和对照组,每组各5头。试验组每天每头添加3.0 kg鲜菌草与灵芝菌丝发酵菌质替代等量的青贮,对照组饲喂基础日粮。试验组除饲喂日粮不同外,其余条件都与对照组保持一致。结果表明:试验组牛奶中乳脂率、乳蛋白率、乳糖率比CK分别提高了2.24%、0.99%、0.42%,体细胞数降低了4.46%,但差异不显著(P>0.05);菌质对奶牛血清中的总蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三脂、总胆固醇、葡萄糖、尿素、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、磷等生化指标基本无影响,虽然试验组中Ca含量比CK含量高0.23 mmol/l,差异显著(P<0.05),但试验前后两组血清Ca含量均在正常范围内。鲜菌草与灵芝菌丝发酵后,菌草中的纤维素和半纤维素等被大量降解,而蛋白质、脂肪的含量却提高了,并同时产生了大量的代谢产物(如氨基酸),提高了奶牛的采食积极性和消化率;同时,灵芝菌丝体含有大量的菌丝多糖和三萜,可以提高奶牛免疫力,进而提高其产奶品质。

灵芝发酵菌丝三萜类化合物含量的测定

建立了灵芝发酵菌丝三萜类化合物含量的检测方法。方法以齐墩果酸作为标准品,用香草醛-高氯酸发色体系进行比色,确定灵芝发酵菌丝三萜含量测定的实验条件。结果三萜类在20-140ug范围内有很好的线性关系,y=0.005x-0.019 r=0.998结论本法简便、准确、重复性好,可用于灵芝发酵菌丝三萜类含量的检测,以鉴定灵芝的品质及其产品的三萜含量。

昆嵛山野生灵芝发酵条件的研究

灵芝自古是我国的著名药用真菌,其含有多种生理调节因子。本研究通过单因素和正交试验,优化液体深层培养的营养搭配与环境条件,研究其对昆嵛山灵芝菌丝体生物量的综合影响。结果表明,适宜的培养基配方为:可溶性淀粉5.00%、牛肉膏2.00%、KH2PO40.10%、MgSO40.01%;适宜的环境条件为:初始pH5.5,发酵周期6d,搅拌转速150r/min,装液量30%。

灵芝菌丝提取物对小鼠呼吸系统炎症防治作用的研究

以小鼠为试验动物 ,进行灵芝菌丝提取物 (GLME)防治呼吸系统炎症试验。结果表明 ,GLME(40mL·kg-1)对由氨水诱发的咳嗽的抑制率为 5 2 .16 % ,而阳性对照药 (可待因 10mL·kg-1)的抑制率为 79.33% ;GLME (40mL·kg-1)使具有祛痰作用的酚红排泌量较对照提高4 19.30 % ,而阳性对照药 (祛痰止咳冲剂 10mL·kg-1)仅使酚红排泌量较对照提高 85 .96 % ;GLME(40mL·kg-1)可显著增强小鼠由二硝基氯苯 (DNCB)所致迟发型皮肤超敏反应 ,其OD值比对照提高 4 0 .14 %。由此可见 ,GLME具有止咳、祛痰和增强免疫力的作用 。

灵芝菌丝体转化无机锗为有机锗的研究

用加入无机锗(GeO_2)的固体和液体培养基培养灵芝菌丝体,可把部分无机锗转化为有机锗。结果表明,用2N NaOH提取锗,提取率较高,从固体菌丝体培养物和液体菌丝体中提取的锗含量随加入无机钻(GeO_2)量的增加而提高。

灵芝菌丝体多糖含量比较及提取工艺研究

对8个灵芝菌株菌丝体多糖含量进行了比较,结果表明,灵芝B菌株菌丝体多糖含量较高;通过单因素试验和正交试验,从提取温度、料液比、提取次数、提取时间4个因素研究该菌株菌丝体多糖提取条件,得出最优提取条件为水提温度85℃,料液比1∶10(g/mL),水提时间2 h,提取次数2次;在此条件下,灵芝菌丝体多糖得率为57.82%。

灵芝袋装栽培物料配方的筛选

筛选适合灵芝低成本袋料栽培物料配方,为灵芝生产提供参考,以枯枝落叶和玉米秸秆等园林和农业生产废弃物为材料,在实验室采用袋料培养方法研究不同袋料栽培对灵芝菌丝体生长长度和密度的影响,以筛选易于形成灵芝子实体原基的合适物料配方。结果表明:用57%枯枝落叶、40%玉米秸秆、1.5%蔗糖和1.5%石膏配方袋料栽培灵芝,在生长环境温度为25~28℃、空气相对湿度为80%~90%和散射光照条件下,易形成灵芝子实体,且菌丝体的生长速度最快、密度最大、颜色洁白和生长状态最佳。

珠海优良灵芝品种的筛选研究

采用代料栽培方式,在珠海对26个灵芝品种进行筛选品比试验。结果表明,美国灵芝类C1和C8菌株的菌丝生长快,产量较其他品种高,菌盖和子实体等综合性状良好;另外,C8子实体的多糖、三萜和有机锗等药效成分含量比C1高。综合来看,美国灵芝C8菌株在生长特性、商品性状和药效成分含量等方面均优于其他灵芝品种,是适合珠海栽培种植的优良灵芝品种。