灵芝菌发酵培养基的优化及灵芝胞外多糖的分离纯化

用正交法研究了不同条件对灵芝菌生长影响，从中选出了灵芝 菌液体深层发酵的优化 培养基：葡萄糖 3.6%，蛋白胨 0.4%，pH 6.0，酵母膏 0.2%，KH2PO40.1%，MgSO 4· 7H2O 0.05%，Vit B1 0.005%，每升发酵液产干菌丝体 15.6 g，粗多糖 0.72 g。 经葡 聚糖凝胶层析对灵芝胞外多糖进行了分离纯化，共有 5 个组分，并用红外光谱、紫外光谱 ，气相色谱等手段进一步分析了灵芝胞外多糖的组成，结果表明灵芝胞外多糖系由甘露糖、 果糖、葡萄糖通过糖 β-D 糖苷键构成。

灵芝多糖的分离与纯化

对灵芝多糖的提取工艺进行研究，采用冷、热水、冷、热碱液分别从灵芝菌丝体和子实体中提取灵芝多糖，使多糖获得初步分级。还比较了浸提温度、加水比、浸提次数、提取时间等因素对粗提的影响，选定了适宜的提取工艺，并选用层析法纯化了多糖，使多糖纯度达到９６％以上。

灵芝多糖分离鉴定及抗肿瘤活性的研究

目的探讨灵芝多糖的分离纯化、理化性质及初步抗肿瘤活性。方法采用热水提取 ,乙醇分级沉淀 ,DEAE 32离子交换柱色谱等方法从灵芝子实体中分离得到灵芝多糖。用SephadexG 10 0凝胶柱色谱法测定其纯度和平均分子量。用薄层色谱及气相色谱法测定其单糖组成。溴化四唑蓝法测定其初步体外抗肿瘤活性。结果从灵芝子实体中分离得到 4种均一多糖 (GLPL1 ～GLPL4 ) ,其中GLPL1 和GLPL3为主要成分 ,其分子量为 4 10 0和 5 70 0。GLPL1 由葡萄糖组成 ;GLPL3由葡萄糖和半乳糖组成。GLPL1 和GLPL3对人鼻咽癌细胞增殖有显著的抑制作用 ,GLPL3还对人胃癌细胞、人结肠癌细胞增殖有一定的抑制作用。结论灵芝多糖GLPL1 。

灵芝子实体和孢子粉纯化多糖体外抗氧化活性研究

为研究同源灵芝子实体和灵芝孢子粉纯化多糖的体外抗氧化活性,利用DEAE-650离子交换树脂,对提取获得灵芝子实体粗多糖(GLP)和灵芝孢子粉粗多糖(GLSP)进行分离纯化,GLP水洗脱得到GLP-1,0.2 mol/L NaCl洗脱得到GLP-2,GLSP水洗脱得到GLSP-1,0.2 mol/L NaCl洗脱得到GLSP-2。分别考察了4种纯化多糖的ABTS+自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和还原能力,结果表明,不同灵芝纯化多糖的抗氧化能力不同,GLP-2的4种抗氧化活性均最高,四种抗氧化能力最高,分别为98.09%、75.88%、81.55%和0.728。

紫芝多糖的纯化及组分分析

紫芝(GanodermaSinense)多糖是紫芝抗肿瘤的主要成分.不同浓缩方法对多糖提取率及结构有较大影响,以超滤法浓缩为最佳.三氯乙酸法除蛋白比常用的Sevage法效果更好.利用DEAE纤维素离子交换层析和SephadexG-100凝胶层析对粗多糖分离纯化得到5种不同的多糖组分PW1,PW2,PJ,PW3,PS,并对各组分的组成、分子量和溶解性进行了测定.

灵芝多糖的提取纯化及GLP_2抗血液凝固和抗血栓形成作用

目的 从人工培养的灵芝菌丝体中分离灵芝多糖精制品 ,作抗血液凝固和抗血栓形成的药理学研究。 方法 人工培养的灵芝菌丝体经沸水提取、三氯醋酸 -正丁醇去蛋白、乙醇沉淀得到的灵芝多糖粗品用 DEAE- 5 2柱层析分离纯化。将得到的多糖成分作抗血液凝固实验 ,并对抗凝多糖成分作抗血栓形成的实验。 结果 从灵芝菌丝体水提液中得到 4个含有多糖的成分 (GL P1 ～ GL P4 )。小鼠静脉注射 (iv) GL P2 2 0 ,30 ,4 0 mg/kg,能显著延长血液凝固时间和出血时间。家兔 iv GL P2 5 ,8mg/kg,能显著对抗血栓形成 ,减少血栓湿重 ,缩短血栓长度 ;降低血小板的聚集率 ,但对血小板数无影响 ;延长部分凝血活酶时间 ;大剂量组还有降低纤维蛋白原含量 ,缩短凝血酶和凝血活酶时间的作用。 结论 GL P2 具有抗血液凝固和抗血栓形成的作用 。

SeGLP-1的分离纯化及硒活性结构分析

灵芝 (Ganodermalucidum)加硒深层培养后的菌丝 (含Se 16 0 0 μg/ g)分别经水及碱水提取、醇析、透析、Sevage法脱蛋白、DEAE cellulose柱层析纯化 ,得SeGLP 1。经SephadexG 10 0、聚丙烯酰胺凝胶电泳和紫外光谱分析鉴定 ,SeGLP 1为均一级分。GC与TLC分析表明 ,SeGLP 1含Gal、Glu、Xyl、Rha、Man ,其单糖摩尔比为Gal∶Glu∶Xyl∶Rha∶Man =0 .2 3∶1.0 0∶0 .72∶ 0 .2 5∶ 0 .0 9。SeGLP 1硒含量 16 42 μg/g。SeGLP 1中Se活性中心的结构可能为O =Se =O ,即Se取代了灵芝多糖GLP 1中 -OCH3结构上的CH3。

树舌多糖的分离纯化、理化性质及抗炎镇痛活性研究

目的:分离纯化树舌多糖,获得均一多糖,并对其理化性质进行研究。对树舌多糖抗炎镇痛活性进行研究。方法:分离纯化采用DEAE离子交换色谱法和葡聚糖凝胶色谱法;纯度鉴定及分子量测定采用高效液相色谱法,示差折光检测器;单糖组成采用气相色谱质谱联用法测定。抗炎实验采用小鼠二甲苯性耳廓水肿法及大鼠角叉菜胶足肿胀法,镇痛实验采用小鼠醋酸扭体法。结果:获得三种均一多糖(GapsⅠ、GapsⅡ、GapsⅢ),峰位分子量分别为6 221、5 535、3 518D。红外光谱证实GapsⅢ结构中有β构型异头碳,核磁共振氢谱和碳谱均证实GapsⅢ结构中有α、β构型异头碳。树舌多糖明显减轻二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和角叉菜致大鼠足肿胀,并减少小鼠扭体次数。结论:三种多糖分子量分布及单糖组成均不同,均主要由葡萄糖组成。

紫芝多糖的初步分析

液体静置培养的紫芝菌丝体,经热水抽提,乙醇沉淀后得紫芝粗多糖,粗多糖去除蛋白质后经葡聚糖凝胶过滤得到分子量不同的二种多糖,一种为高分子量多糖,另一种为低分子量多糖。高分子量多糖经薄板层析鉴定证实由葡萄糖、甘露糖和果糖组成;低分子量多糖则由葡萄糖和甘露糖组成。对两种多糖提纯物作红外光谱分析,发现虽有某些差异,但在几个主要的波长处有共同的吸收,并且从总体上看与其它真菌多糖极为相似,证实担子菌多糖在化学结构上所具有的某种相似性。

树舌多糖的分离提纯和结构研究

从长自山树舌中提取的水溶性粗多糖经甲醇、乙醇,DEAE-纤维素柱(CI^-),Cetavlon等分级得到四个组分。四个组分的结构分析采用高碘酸氧化、Smith降解,部分酸水解,甲基化分析,刚果红试验,IR,NMR分析方法、甲基化产物经水解,还原乙酰化后用GC与GC-MS联机鉴定分析,推测出了四个组分的结构。

树舌多糖的分离纯化、分子量分布及单糖组成研究

目的分离、纯化树舌总多糖,获得均一多糖。对均一多糖的分子量、重均分子量及组成糖进行分析。方法分离纯化采用DEAE离子交换色谱法;高效液相色谱法、示差折光检测器测定多糖组分的重均分子量(Mw);气-质联用法测定单糖组成。结果得到组分Ⅰ、组分Ⅱ、组分Ⅲ三种组分。其分子量分布及单糖组成不同,含有8种单糖,组分Ⅰ、Ⅲ主要由葡萄糖组成。

灵芝-黄芪双向发酵菌质多糖的分离纯化及生物活性研究

本文旨在探究灵芝-黄芪双向固体发酵体系对灵芝多糖生物活性的增效作用。分别以灵芝-黄芪双向发酵菌质和未添加黄芪的灵芝菌发酵菌质为原材料提取多糖,采用热水浸提和离子交换色谱对粗多糖进行分离,得到PG-1和PG-2,添加黄芪发酵的菌质多糖中的PG-1组分相较于未添加黄芪发酵的菌质多糖中的PG-2组分增加了325%的产量。对PG-1和PG-2进行初步的结构鉴定和免疫活性、抗肿瘤活性的研究。运用排阻色谱法测定其分子量,高效液相色谱、紫外光谱和红外光谱等方法分析其单糖组成、官能团、糖苷键构型以及糖分子链链型。PG-1和PG-2都由葡萄糖醛酸、葡萄糖、木糖和阿拉伯糖4种组成,单糖组分摩尔比分别为12∶58∶21∶9和16∶41∶32∶11。分子量分别为9.2×10^4和8.9×10^4。PG-1和PG-2均由β-糖苷键连接,二者糖链间有—O—连接。PG-1和PG-2均是具有三螺旋空间构象的分子量相对均一的多糖。体外细胞实验结果显示:加入PG-1和PG-2后,巨噬细胞的增殖作用、巨噬细胞对中性红的吞噬作用、巨噬细胞的保护作用和对肿瘤细胞增殖的抑制作用都显著地提高。在细胞实验中,PG-1显示出比PG-2更强的免疫增强活性和对肿瘤细胞增殖的抑制作用,说明添加黄芪促进了灵芝菌质多糖的分泌,使灵芝多糖的免疫增强活性和抗肿瘤活性增强。

灵芝多糖的提取、分离及分析方法的研究进展

灵芝多糖是灵芝的有效成分之一,具有多方面的药理活性,已成为目前中药研究的一大热点。综述了目前在灵芝多糖的提取、分离、纯化以及分析方法方面的研究进展,以期为灵芝多糖的研究提供一些参考。