海南10种市售灵芝水分及指标成分比较研究

目的:研究海南常见的10种市售灵芝质量差异,为地方药材标准起草奠定基础,为进一步开发灵芝提供参考。方法:购买海南常见的10种市售灵芝共30批,分别进行外观性状描述,再参考中国药典(2020版)灵芝标准项下的检验方法,适当优化后,测定灵芝中的水分、三萜和甾醇含量,作为评价灵芝质量的主要指标。结果:方法精密度RSD为1.9%,低、中、高浓度的加标回收率分别为96.4%、95.2%、98.3%,测定灵芝供试品,有1批水分超过17.0%,有4批三萜及甾醇含量低于0.50%。结论:中国药典标准只收录了紫芝和赤芝,其他市售灵芝品种起草标准时可参考药典标准适当修改限度范围。政府应加强监管,逐步规范灵芝市场,修订完善地方药材质量标准,以便于进一步开发和利用灵芝资源。

紫外-可见分光光度法测定灵芝片中多糖、三萜及甾醇含量

目的建立测定灵芝片中多糖、三萜及甾醇含量的紫外-可见分光光度(UV)法。方法采用硫酸蒽酮显色法和香草醛冰醋酸显色法,分别测定灵芝片中的多糖、三萜及甾醇含量。结果 5批灵芝片多糖含量为0.94%~1.70%,平均1.38%;三萜及甾醇含量为0.58%~0.99%,平均0.73%。结论该方法简单、可行,可用于测定灵芝片中多糖、三萜及甾醇含量,对于提高灵芝片的质量标准有一定意义。

不同菌草基质栽培灵芝多指标质量评价

【目的】以水溶性浸出物、灵芝多糖肽、灵芝酸、灵芝甾醇、单糖组成和分子量特征图谱为指标综合评价不同菌草基质栽培灵芝的品质。【方法】采用HPLC法测定多糖肽、灵芝酸、甾醇含量和单糖组成,运用统计学方法比较不同基质栽培灵芝的差异及其相关性。【结果】不同栽培基质的水溶性浸出物含量为14.21%~17.35%,灵芝多糖肽含量为3.80%~6.63%,灵芝酸总量为0.24%~0.53%,甾醇含量为31.43~69.16μg·g^(-1);主成分分析筛选出2个主成分,累计方差贡献率84.63%;相关性分析显示浸出物与活性成分呈正相关;单糖组成主要是葡萄糖和少量甘露糖;分子量特征图谱标定了6个共有峰,组间相似度大于0.98。【结论】不同基质栽培灵芝的活性物质含量存在显著差异,其中灵芝多糖肽和灵芝酸可作为灵芝质量评价重要指标;类芦、芦竹和五节芒栽培灵芝富含活性成分,这为科学利用菌草栽培灵芝提供参考。

富硒灵芝多糖改善高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝大鼠症状

目的探讨富硒灵芝多糖对非酒精性脂肪肝病大鼠SREBP-1c及ACCα表达的影响。方法 120只SD大鼠随机分为正常组、高脂饮食组、多烯磷脂酰胆碱组、富硒灵芝多糖低、中和高剂量干预组等6组,每组20只,分别于治疗4和8周后处死大鼠各半,测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆固醇(CHOL)和三酰甘油(TG);用Western blot和RT-PCR检测肝脏组织中SREBP-1c及ACCα蛋白和mRNA表达;其余肝脏行病理学检测。结果富硒灵芝多糖可显著减少肝脏组织中的脂肪颗粒,并降低血清中AST、ALT、CHOL和TG含量,中、高剂量的灵芝多糖处理可显著降低肝脏中SREBP-1c、ACCαmRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论富硒灵芝多糖可缓解高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝大鼠症状。

灵芝甾醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察灵芝甾醇(GS)对局灶性脑缺血再灌注损伤(I/R)大鼠的保护作用,并对其作用原理进行初步探讨。方法复制大鼠大脑中动脉阻断再灌注模型(MCAO/R),分别采用TTC染色法、神经功能评分法观察GS对大鼠大脑梗死体积和行为学评分的影响,同时观察GS对脑组织形态学和MDA水平、SOD活性的影响。结果GS能够降低I/R大鼠脑梗死体积和行为学评分,减轻受损大鼠皮层脑组织的病理改变,抑制脑组织中MDA的生成,提高MnSOD的活性。结论GS对大鼠缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用机制与增强MnSOD活性,减轻I/R中氧化损伤有关。

红芝的甾醇分析

灵芝是我国传统的中药，含有丰富的药用成分，具有许多种药效。本文应用ＧＣ—ＭＳ分析了红芝子实体的提取物，发现其含有麦角甾－５，７，２２－三烯－３－β－醇（ｅｒｇｏｓｔａ－５，７，２２－ｔｒｉｅｎ－３－β－ｏｌ），４－甲基－胆甾－８，２４－二烯－３－醇（４－ｍｅｔｈｙｌ－ｃｈｏｌｅｓｔａ－８，２４－ｄｉｅｎ－３－ｏｌ），麦角甾－７－烯－３－β－醇（５．ｘｉ－ｅｒｇｏｓｔ－７－ｅｎｅ－３－β－ｏｌ）。

灵芝化学成分与质量控制方法的研究综述

综述灵芝活性成分和质量控制方法的研究进展。灵芝化学成分有三萜类化合物,核苷类化合物,呋喃类衍生物,甾醇类化合物,生物碱类化合物,氢醌及其他类化合物,脑苷及多肽、氨基酸类化合物,多糖、糖肽类化合物,以及有机酸、长链烷烃类化合物。其已有的质量控制方法研究包括比色方法测定灵芝总三萜酸含量,HPLC方法测定灵芝三萜酸,灵芝HPLC指纹图谱研究,高效毛细管电泳法测定核苷类化学成分的含量,灵芝中甾醇类化合物分析,灵芝孢子油中脂肪酸含量测定等。

不同来源灵芝孢子粉多指标质量评价

目的以多糖、三萜及甾醇、重金属元素含量为指标评价不同来源灵芝孢子粉质量。方法采用紫外-可见分光光度法及电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分别测定多糖、三萜及甾醇、重金属元素含量。分析不同树种及采收期灵芝孢子粉的含量差异规律。结果桦树样品及八月上旬采收样品中多糖含量较高,桑树样品及九月中下旬采收的样品中三萜及甾醇含量较高,不同树种及采收期样品重金属含量均符合限量要求。结论灵芝孢子粉可考虑采用桑树或白杨树树种进行栽培,于九月中下旬采收。

姜黄素与灵芝孢子对非酒精性脂肪肝SREBP-1c mRNA的影响

目的:分别研究姜黄素与灵芝孢子对非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠肝脏固醇调节元件结合蛋白1c(sterol-regulatory element binding protein-1c,SREBP-1c)表达的影响,从分子水平对比不同中药对于NAFLD的治疗作用。方法:采用RT-PCR方法对比不同分组(正常组、NAFLD模型组、姜黄素干预组、灵芝孢子干预组)小鼠肝脏SREBP-1c的mRNA表达。结果:与正常组对比,SREBP-1c mRNA在模型组表达明显增高,而在姜黄素干预组及灵芝孢子干预组均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。两种中药干预组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NAFLD模型组肝脏中SREBP-1c mRNA的表达明显增高;姜黄素与灵芝孢子对于NAFLD小鼠肝脏SREBP-1c mRNA表达的影响无明显差异。

灵芝子实体适宜采收期研究

为探索吉林地区赤芝子实体的最佳采收期,本研究以吉林地区栽培的3个赤芝(Ganoderma lucidum)菌株为材料,在子实体生长后期,分别对其3个采收时间样品的干鲜重、含水量、多糖和三萜及甾醇含量进行研究。结果表明,随着采收时间的延后,子实体样品干鲜重变化规律不明显,含水量和多糖含量均呈现先升高后降低趋势,三萜及甾醇含量呈现逐渐降低趋势。综合分析表明,吉林地区以收获孢子粉为主的赤芝子实体的最佳采收时间建议为9月22日左右。

高压超临界CO_2提取灵芝三萜和甾醇成分的研究

为了研究常温高压超临界CO_2提取法提取灵芝三萜和甾醇成分的效果,采用不同高压的超临界CO_2提取法提取灵芝细粉中灵芝三萜和甾醇成分,通过高效液相色谱(HPLC)测定灵芝三萜和甾醇的含量,并与传统的乙醇回流提取法进行比较。研究表明,高压超临界CO_2提取工艺条件为:提取压力85 MPa,提取温度50℃,提取时间4 h,在此条件下灵芝三萜含量为1.35%,麦角甾醇含量为0.32%,而采用乙醇回流提取法提取的灵芝三萜含量为0.92%,麦角甾醇含量为0.2%。与传统乙醇回流提取法相比,采用高压超临界CO_2提取法,灵芝三萜含量提高了46.7%,麦角甾醇含量提高了60%。HPLC图谱表明,高压超临界CO_2提取法的提取物中三萜和甾醇不仅含量高,而且成分种类多。因此高压超临界CO_2提取法具有得率高、提取温度低、提取时间短等优点,为灵芝成分的提取提供了新技术。

富硒灵芝调控大鼠乙酰辅酶A羧化酶α表达治疗非酒精性脂肪肝病的研究

60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、富硒灵芝治疗组。非酒精性脂肪肝病(Non-Alcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)模型建立成功后富硒灵芝治疗组给予富硒灵芝水灌胃治疗,模型对照组给予生理盐水灌胃辅助对比,空白对照组不加以任何干涉,分别于6周和12周处死大鼠各半。大鼠肝脏HE染色显示,治疗6周后富硒灵芝组脂肪变性程度及细胞肿胀相较于模型组明显减轻,炎性细胞浸润及坏死灶较模型对照组明显减少,富硒灵芝12周组大鼠比富硒灵芝6周组肝脏改善效果更佳;治疗6周后,富硒灵芝治疗组与模型对照组相比,血清中乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA),肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、MDA和GSH,差异显著(P<0.05);SERBF-1mRNA和蛋白表达:富硒灵芝6周组与模型对照6周组相比,只有微小差异(P>0.05),12周富硒灵芝组与模型对照组相比,差距则具有统计学意义(P<0.05);ACCαmRNA和蛋白表达:富硒灵芝6周组与模型对照6周组相比,差别具有统计学意义(P<0.05);12周时差异更加显著;胰岛素抵抗指数6周时没有改善,12周时呈现出统计学意义(P<0.05)。因而推测,富硒灵芝可通过调控大鼠ACCα的表达、以提高抗氧化能力及改善肝功能来治疗NAFLD,但药效疗程较长,可能需长期服用。

不同品种灵芝多指标的质量评价研究

目的:以浸出物、灵芝多糖、三萜及甾醇和铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、铜(Cu)、砷(As)为指标综合评价紫芝、赤芝、薄树芝的质量。方法:分别从贵州、安徽、海南收集18批紫芝、35批赤芝、14批薄树芝样品,建立测定灵芝多糖、三萜及甾醇的紫外分光光度法和测定5种重金属元素含量的ICP-MS法,测定其中的含量,运用ANVON单因素方差分析法、主成分分析法、曲线估计法综合比较这3种灵芝的差异,并研究其相关性。结果:浸出物的含量大小顺序为薄树芝>赤芝>紫芝,灵芝多糖含量大小顺序为赤芝>薄树芝>紫芝,三萜及甾醇含量大小为赤芝=薄树芝>紫芝。浸出物、灵芝多糖、三萜及甾醇的主成分分析综合得分为薄树芝>赤芝>紫芝。灵芝中5种重金属元素的含量大多数符合相关规定。结论:从化学成分的角度来看,紫芝的质量最差,而赤芝和薄树芝的质量较好,且二者之间的差异不明显;浸出物与综合指标的一致性较好。从安全性的角度考虑,赤芝的安全性最高,其次是薄树芝,最后是紫芝,其中Cd对重金属安全性方面的影响最大。

破壁灵芝孢子粉甾醇类HPLC指纹图谱的建立及其抗肿瘤活性“谱效”关系

建立了破壁灵芝孢子粉甾醇类高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的分析方法,采集了10批不同产地破壁灵芝孢子粉HPLC图谱,运用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004版"软件建立破壁灵芝孢子粉标准图谱。并利用生物细胞模型技术得到了10批破壁灵芝孢子粉样品粗甾醇提取物的抗人恶性乳腺癌细胞(MT-1)抑制率曲线及半数有效剂量(IC50),运用多元线性回归统计方法,将抗肿瘤活性参数IC50与HPLC指纹图谱共有峰的标准化峰面积比值关联。结果表明:方法的稳定性、精密度、重现性符合方法学要求;建立的甾醇类HPLC指纹图谱共得到15个共有峰,各样品图谱与标准指纹图谱的相似度均在0.9以上。经抗人恶性乳腺癌细胞活性参数IC50研究及统计分析表明,指纹图谱中与抗人恶性乳腺癌细胞活性关系密切的峰为1、3、6、8、9、14号,即麦角甾醇等6个成分是其主要活性成分。

灵芝菌丝体中三萜及甾醇含量测定方法研究

目的:建立紫外-可见分光光度法测定灵芝菌丝体中三萜及甾醇含量的方法。方法:以齐墩果酸为对照品,5%香草醛-冰醋酸和高氯酸为显色剂,以546nm波长测定灵芝菌丝体中三萜及甾醇含量。结果:灵芝菌丝体中三萜及甾醇质量在0~0.169 12mg范围内线性关系良好(R^(2)=0.999 3),精密度RSD为0.73%。样品溶液在配制后1h内稳定性较好,平均加标回收率为101.99%,RSD为1.44%。结论:该方法方便快捷,重现性好,结果可靠,可用于测定灵芝菌丝体中三萜及甾醇含量。

灵芝甾醇的影响因素、研究工艺及药理作用研究进展

甾醇类物质是灵芝中重要的次生代谢产物,研究表明其在药理活性方面起到了重要作用。近年来灵芝主要的次生代谢产物灵芝多糖和灵芝三萜的相关研究被不断报道,但对于灵芝甾醇类次生代谢产物的系统研究相对较少。本文对近年来灵芝甾醇类成分的影响因素、研究工艺和药理作用进行综述,以期为灵芝甾醇研究和发展灵芝健康产业提供帮助。

分光光度法测定破壁灵芝孢子粉中三萜类化合物的含量

目的:建立破壁灵芝孢子粉中三萜及甾醇含量的测定方法。方法:以齐墩果酸为对照品,用5%香草醛冰醋酸、高氯酸显色,在546 nm波长处测定样品吸光度。结果:齐墩果酸在0.01834~0.0917 mg·mL^(-1)线性关系良好,回归方程为y=7.54560x-0.01161,相关系数R^(2)=0.99954,回收率为95.52%~101.29%,均值为98.55%,RSD为2.5%,方法重复性试验测定样品含量值范围为3.66%~3.85%,均值为3.76%,RSD为1.9%。结论:该方法操作简便、快速,结果稳定,重现性好,适用于破壁灵芝孢子粉中三萜及甾醇含量的测定。

灵芝化学成分及防治肿瘤的研究进展

灵芝是我国传统中药之一,具有良好的免疫调节作用。灵芝中主要含有灵芝三萜、灵芝多糖、甾体、蛋白质、核苷等多类化合物。灵芝具有调节免疫功能、抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡和自噬、抑制肿瘤细胞侵袭和转移、抑制肿瘤血管生成、辅助化疗药物增效减毒,以及诱导肿瘤细胞分化等作用,能多途径、多靶点抑制肿瘤的发展,有效防治肿瘤。笔者就灵芝的化学成分、防治肿瘤机制及临床应用研究进展进行综述,有助于筛选寻找灵芝防治肿瘤的潜在活性组分,推进研发具有我国自主知识产权的肿瘤防治新药。