电针对不同时间段局灶性脑缺血大鼠缺血区皮层突触素P38和GAP-43表达的影响

目的 :探讨针刺对缺血性脑损伤保护作用的生化机制。方法 :采用热凝闭大鼠大脑中动脉致局灶性脑缺血模型 ,研究缺血 2周和 5周后缺血区皮层突触素P3 8和GAP 43的变化规律和针刺对其影响。结果 :脑缺血 2周及 5周组大鼠脑缺血区P3 8表达比假手术组显著下降 (P <0 .0 5) ;缺血 +电针 2周组与缺血 2周组相比突触素P3 8表达并无显著性差异 (P >0 .0 5) ;缺血 +电针 5周组与缺血 +电针 2周组和脑缺血 5周组相比 ,突触素P3 8表达明显增加 (P <0 .0 5) ;但仍明显低于假手术 5周组 (P <0 .0 5)。缺血 2周组大鼠在缺血区周围GAP 43表达与假手术组相比增加明显 (P <0 .0 5) ,而缺血 5周组与假手术组相比无显著性差异 (P >0 .0 5) ;缺血 +电针 2周组大鼠脑片GAP 43表达与假手术组相比显著增加 (P <0 .0 5) ,而与缺血 2周组相比无差异 (P >0 .0 5) ;缺血 +电针 5周组大鼠脑片GAP 43表达与假手术 5周组相比有显著性差异 (P <0 .0 5)。结论 :针刺可以通过提高突触素和GAP 43在缺血中心区周围皮层的表达 ,保护缺血性脑损伤 。

电针治疗对MCAO大鼠运动功能及梗死对侧大脑皮层GAP-43、MAP-2表达的影响

目的观察局灶性脑梗死大鼠梗死对侧皮层不同时期生长相关蛋白GAP-43(growth associated protein-43)及微管相关蛋白MAP-2(microtubule associated protein-2)表达的动态变化,探讨电针调节GAP-43和MAP-2表达与神经可塑性及大鼠运动功能改善的可能关系。方法 60只雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=6)、模型组和电针组,模型组和电针组再随机分为3d、7d、14d、28d等4个亚组(剔除耗损或死亡,n=6)。运用Longa改良线栓法制备右侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠模型,电针组取双侧"曲池""足三里"针灸治疗,余两组同一时间捆绑,不做治疗。采用Bederson法评定大鼠神经功能缺损情况、免疫组化法检测梗死对侧皮层GAP-43、MAP-2的表达变化。结果与模型组比较,电针组术后第3天神经功能缺损评分差异无统计学意义(P>0.05),随着治疗时间的延长,术后第7、14、28天神经功能评分逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示,电针组术后第3天GAP-43、MAP-2阳性细胞表达量与模型组比较差异无统计学意义(均P>0.05);术后第7、14天GAP-43、MAP-2阳性细胞表达量明显高于模型组(均P<0.05),术后第28天GAP-43阳性细胞表达量明显高于模型组(P<0.05)。结论电针治疗增加梗死对侧皮层MAP-2、GAP-43的表达,改善了大鼠的运动功能,促进神经功能重塑,可能与加快启动梗死对侧皮层的保护机制、减少病灶对侧的远隔继发性损害有关。

GAP-43治疗大鼠脊髓横断后神经中丝NF200表达的变化

通过制备成年SD大鼠完全性脊髓损伤模型,研究生长相关蛋白(GAP-43)治疗大鼠脊髓损伤后神经中丝(NF200)表达的变化,探讨GAP-43在再生修复中的作用,为临床治疗提供实验依据。实验采用雌性8周龄SD大鼠75只,制成脊髓损伤模型后随机分为三组:GAP-43抗体组、GAP-43抗原组和对照组,每组25只。使用直接注射法将GAP-43抗原和GAP-43多克隆抗体分别注入抗原组和抗体组的大鼠脊髓的断端,对照组仅切断脊髓而不给药,最后观察各组大鼠肢体功能的恢复情况。用BBB评分法对不同时段大鼠的行为学表现进行评分,用HE染色及免疫组化染色观察NF200的表达,并对其进行相关性分析。结果发现对照组在不同的时间段行为学评分最低和抗原组评分最高,脊髓损伤区病理改变明显好转,NF200的表达呈进行性增高,且前角神经元NF200的表达早于后角神经元。抗体组早期恢复出现明显的停滞状态,但停药后能很快恢复。说明GAP-43能促进损伤脊髓的恢复,而抗体对损伤脊髓恢复的影响是可逆的,这对于脊髓再生的研究是一种值得探讨的新方法,对进一步探索脊髓损伤的治疗具有重要的意义。

督脉电针结合游泳训练对大鼠全横断脊髓损伤后GAP-43和Nogo-A表达的影响

目的:通过检测大鼠脊髓损伤后运动功能恢复情况和神经生长相关蛋白-43(GAP-43)、神经轴突生长抑制剂-A(Nogo-A)的表达来探讨督脉电针结合游泳训练干预脊髓损伤的作用机制。方法:选用雌性SD大鼠180只,随机分为正常组、假手术组、模型组、游泳训练组、督脉电针组(督电组)、督脉电针结合游泳训练组(联合组)。用外科手术尖形刀片横切断暴露脊髓的方法致大鼠T9-T10段脊髓全横断模型。术后各时间点对各组大鼠进行BBB评分;免疫组化检测各时间点损伤段脊髓GAP-43和Nogo-A的表达;Western blot检测各时间点损伤段脊髓Nogo-A的表达。结果:与模型组相比,联合组和督电组BBB评分显著增加,联合组在术后第14、21、28、35天较督电组BBB评分显著增加,具有显著性差异(P<0.05)。与模型组相比,督电组和联合组GAP-43的表达显著增加,Nogo-A的表达显著减少,具有显著性差异(P<0.05),联合组在术后第14、21、28、35天较电针组GAP-43的表达显著增加,Nogo-A的表达显著减少,具有显著性差异(P<0.05)。结论:(1)督脉电针和游泳训练都能通过促进脊髓损伤大鼠GAP-43的表达和抑制Nogo-A的表达来促进神经的修复。(2)联合治疗对大鼠运动功能的恢复更为有效。

针康法对脑缺血大鼠运动功能及GAP-43、Nogo-A表达的影响

目的:探讨针康法对脑缺血大鼠运动功能及缺血区皮质GAP-43、Nogo-A表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为5组,即针康组、针刺组、康复组、模型组和假手术组,按3天、7天、14天再分为3个亚组,每组6只。制备永久性脑缺血动物模型。针康组进行针康法干预;针刺组进行头穴丛刺治疗;康复组进行康复训练,假手术组与模型组不做任何干预。采用网屏试验评价各实验组大鼠的运动功能,免疫组化检测各实验组大鼠缺血区皮层GAP-43、Nogo-A的表达。结果:术后7天和14天,与康复组、针刺组比较,针康组网屏实验评分降低,差异有统计学意义(P<0.05);术后7天和14天,针康组缺血区皮层GAP-43阳性细胞表达高于模型组、康复组、针刺组(P<0.05);术后14天,针康组缺血区皮层Nogo-A阳性细胞表达降低,与模型组、康复组、针刺组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针康法能促进脑缺血大鼠运动功能的恢复,其机制可能与其促进脑缺血区皮层GAP-43及降低Nogo-A的表达有关。

GAP-43治疗大鼠完全性脊髓损伤后GFAP表达的变化及意义

目的:通过制备完全性脊髓损伤(SCI)成年SD大鼠模型,研究生长相关蛋白(GAP-43)治疗大鼠SCI后胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的变化,探讨GAP-43在再生修复中的作用,为临床治疗提供实验参考。方法:咬除T7-T8棘突及相应椎板,用剪刀将脊髓完全横断,制成SCI模型。雌性8周龄SD大鼠75只,随机分为三组:GAP-43抗体组、GAP-43抗原组、对照组,每组25只。使用直接注射法将GAP-43抗原和GAP-43多克隆抗体分别注入抗原组和抗体组的大鼠脊髓的断端,观察各组大鼠肢体功能的恢复情况,用BBB评分法进行不同时段的行为学评分、免疫组化染色及图像分析方法观察GFAP的表达变化,并对其进行相关性分析。结果:对照组大鼠在不同时间段的行为学评分最低,抗原组评分最高;抗原组GFAP阳性细胞显著增多,而抗体组晚期则显著减少。结论:GAP-43可促进星形胶质细胞增生,而GAP-43抗体对星形胶质细胞的增生则表现为抑制作用。本实验结果表明GAP-43对脊髓损伤具有较好的治疗作用。

康复训练对脑梗塞偏瘫大鼠的行为学和脊髓GAP-43表达的影响

目的 :研究康复训练对实验性脑梗塞偏瘫大鼠行为学和脊髓生长相关蛋白 (GAP - 43)表达的影响。方法 :采用光化学法制成脑梗塞偏瘫大鼠模型 ,并随意分为康复训练组和制动组 ,每天置于滚筒式网状训练器内转动训练 ,在平衡木、转棒上做行走训练 ;共 30min ;每周 5次。在梗后 2 4h、7d、14d、2 1d、2 8d观察行为学变化和脊髓的GAP- 43的表达 ,同时以正常大鼠作为对照。结果 :Bederson神经功能、平衡木、转棒行走 (7- 2 8d)、网屏实验 (7- 14d)康复组较制动组明显好转 (P <0 .0 5 )。正常组脊髓的GAP - 43较少 ;脑梗塞后 2 4h康复组、制动组大鼠脊髓未瘫痪侧脊髓前角有大量的GAP - 43的表达 ,脑梗塞后 7- 14d康复组瘫痪侧及未瘫痪侧脊髓前角区均有GAP - 43表达 ,制动组阳性染色淡 ;2 1- 2 8d康复组未瘫痪侧脊髓前角较瘫痪侧GAP - 43表达的多 ,而制动组不明显。结论 :脑梗塞后康复训练可促进行为恢复及脊髓前角GAP -

康复训练对脑梗死大鼠脑GAP-43表达的影响

目的 研究康复训练对脑梗死大鼠脑的生长相关蛋白 (GAP- 43)表达的影响 .方法 SD大鼠采用光化学法制成脑梗死模型后 ,随机分康复组、制动组、自由组及正常组 ,每组大鼠在 1,3,7,14,2 1,2 8d取脑组织免疫组化染色 ,以观察脑梗死大鼠各组不同时期脑的 GAP- 43表达 .结果 1,3,7,14d脑梗死周边区可见 GAP- 43阳性细胞 ,2 1,2 8d时梗死周边 GAP- 43阳性细胞逐渐减少 ,康复组较制动组在 7,14d明显增加 ,尤以胼胝体为著 .结论 康复训练可引起损伤周边区 GAP- 43表达的变化 。

丁苯酞改善血管性痴呆大鼠认知功能及其对海马区GAP-43和突触素表达的影响

目的探讨丁苯酞对血管性痴呆(VD)大鼠认知功能及对海马区GAP-43和突触素P38表达的影响。方法选取雄性Wistar大鼠90只,随机分为观察组、对照组、空白组各30只。空白组不采取任何操作;对照组大鼠制成VD模型,并予以生理盐水;观察组大鼠制成VD模型后,予以丁苯肽注射液。治疗1个月后,采取MG-Y-型迷宫检测其认知功能以及采用Western印迹和RT-PCR分别检测大鼠海马区内GAP-43和突触素P38的表达。结果观察组和空白组大鼠的错误反应次数均明显低于对照组(P均<0.05),且空白组大鼠降低更明显(P<0.05)。对照组和观察组的GAP-43在大鼠海马区内的mRNA中表达较空白组高(P均<0.05),且观察组表达程度较对照组更高(P<0.05);观察组的突触素P38在大鼠海马区内的mRNA中表达较空白组和对照组均提高(P均<0.05),而对照组和空白组之间表达无差异(P>0.05);观察组GAP-43在大鼠海马区内的蛋白中表达较对照组和空白组均提高(P均<0.05),对照组和空白组之间表达无差异(P>0.05);对照组和观察组的突触素P38在大鼠海马区内的蛋白中表达较空白组均提高(P均<0.05),且观察组表达程度较对照组更高(P<0.05)。结论对于VD大鼠,可予以丁苯酞注射液治疗,其可促进神经元的修复及再生,改善VD大鼠海马区GAP-43及突触素P38的表达,从而提供其认知功能,改善其预后。

参芎葡萄糖注射液对脊髓损伤后运动功能恢复及GAP-43和NF200表达的影响

目的探讨参芎葡萄糖注射液对急性脊髓损伤后运动功能恢复的影响和可能机制。方法应用改良的Allen’s法复制大鼠脊髓损伤模型60只,随机分为对照组(30只)和治疗组(30只),在建模后1、7、14、21和28 d用BBB评分和斜板试验评定脊髓损伤后后肢运动功能恢复并获取损伤段脊髓标本,用免疫组织化学方法和免疫印迹法检测两组脊髓在损伤后不同时段生长相关蛋白(GAP-43)和神经丝蛋白(NF200)的表达,对BBB评分、GAP-43、NF200进行相关分析。结果 BBB评分和斜板试验结果提示,治疗组大鼠7、14、21、28 d时的神经功能恢复较对照组明显提高(P<0.05);免疫组织化学方法和免疫印迹法提示,与对照组相比治疗组在一定时间段能上调损伤脊髓区GAP-43和NF200的表达(P<0.05);在术后7 d和14 d,BBB评分与GAP-43、NF200的表达正相关,在术后7、14、21、28 d GAP-43与NF200的表达正相关。结论参芎葡萄糖注射液能促进损伤脊髓的功能恢复,其机制可能与参芎葡萄糖注射液上调损伤区脊髓GAP-43、NF200的表达有关。

神经损伤与再生中GAP-43mRNA表达和蛋白合成的实验研究

目的 研究周围神经损伤与再生过程中生长相关蛋白 (Growth associatedprotein ,GAP 43 )mRNA表达和蛋白质合成的变化规律。方法 建立大鼠坐骨神经中段钳夹损伤模型 ,用原位杂交和免疫组化技术观察大鼠腰髓和背根神经节的GAP 43mRNA表达和蛋白质合成变化。结果 大鼠坐骨神经损伤后 ,腰髓腹角运动神经元和背根节感觉神经元GAP 43mRNA表达和蛋白质合成增强。结论 周围神经损伤与再生中GAP 43mRNA表达显著增强 ,神经再生完成后表达减弱 ,表明GAP

GAP-43在锦鲤荒漠沙蜥和雉鸡视网膜内分布的免疫组化研究

GAP-43具有多种功能,主要与神经元轴突的生长、再生、神经递质的释放及膜泡的吞噬有关.本研究用免疫组织化学的方法观察了正常成年锦鲤、荒漠沙蜥和雉鸡视网膜内GAP-43分布.结果显示GAP-43主要分布在内网层,另外,在内核层、外网层、光感受器细胞层因动物不同也呈现不同的分布特点,而在节细胞层中3种动物均未发现GAP-43阳性染色.在锦鲤视网膜中GAP-43主要分布在内网层和内核层的无长突细胞;在荒漠沙蜥视网膜中GAP-43主要分布在内网层和外网层,在雉鸡视网膜中GAP-43主要分布在内网层、外网层、外核层和光感受器外节,其中在雉鸡视网膜外核层和光感受器外节中发现阳性分布是在脊椎动物此层发现GAP-43的首次报道.

电针对脊髓损伤后神经生长相关蛋白GAP-43表达的影响

目的探讨电针治疗对脊髓损伤(SCI)组织GAP-43表达水平的影响。方法用Allen氏改良撞击法制作鼠脊髓损伤模型。44只成年Wistar鼠随机分为11组:正常对照组、SCI后第2,4,7,14,28天组和电针(SCI后电针治疗)第2,4,7,14,28天治疗组,每组4只。用HE染色观察损伤脊髓组织病理变化,免疫组化染色检测GAP-43阳性细胞,用免疫印记(western blot)检测脊髓损伤中GAP-43的变化。结果GAP-43在正常成年鼠脊髓中微量表达,SCI后表达增加,且电针治疗组较SCI组表达差异有显著性(P<0.01)。术后7d时,SCI组的GAP-43表达达到高峰,14d时降至接近初始水平,但电针治疗组GAP-43表达仍维持较高水平。结论电针可增强损伤脊髓组织GAP-43表达水平,促进损伤脊髓神经元再生和修复,对脊髓损伤起保护作用。

抗BDNF血清对小鼠坐骨神经损伤后脊髓前角运动神经元内GAP-43表达的影响

小鼠坐骨神经压榨损伤后 ,腹腔注射抗 BDNF血清 ,动物存活 2周。用组织原位杂交技术与免疫组织化学方法观察生长相关蛋白 ( GAP-4 3)在脊髓腰骶膨大部前角运动神经元的表达 ,并对实验结果进行图像分析。结果发现 ,注射抗 BDNF血清后坐骨神经损伤侧脊髓前角 GAP-4 3m RNA的阳性神经元与 GAP-4 3免疫反应阳性神经元的数目减少 ,阳性神经元的光密度也降低 ,上述改变在统计学上均有显著意义。结果提示 ,小鼠坐骨神经损伤后内源性 BDNF可能参与脊髓前角运动神经元 GAP-4

针药结合治疗对大鼠脊髓损伤后GAP-43mRNA和BDNFmRNA表达的影响

目的:探讨电针治疗脊髓损伤的作用机理。方法:以Wistar大鼠为研究对象,将其分为对照组、电针治疗组(简称电针组)、针灸加中药治疗组(简称针药组)及假手术组。采用改良的Allen′s撞击法致大鼠T10脊髓损伤,用CBS联合运动评分判定大鼠脊髓损伤后运动、感觉功能的恢复情况,并应用原位杂交方法观察脊髓损伤后1、3、7、14天GAP-43mRNA和BDNFmRNA的表达变化。结果:针药组和电针组CBS评分明显高于对照组(P<0.05);14天时针药组明显高于电针组(P<0.05);而3、7、14天时两治疗组GAP-43mRNA和BDNFmRNA的表达呈逐渐增高趋势且明显高于对照组(P<0.05)。14天时针药组表达明显高于电针组,差别具有统计学意义(P<0.05)。结论:针灸结合中药治疗能促进大鼠脊髓损伤后运动、感觉功能的恢复,并通过对神经生长因子的表达干预促进脊髓神经的再生及修复。

运动训练对大鼠脑梗死后肢体功能和GAP-43、MAP-2表达水平的影响

目的:研究运动训练能否促进大鼠局部脑缺血再灌注后的功能恢复并从神经可塑性角度探讨其机理。方法:线栓法制作Wistar大鼠大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO)模型,随机分为运动组、对照组、假手术组及正常组,运动组术后24h起每天游泳10min,采用行为测试试验评分观察肢体功能恢复情况,免疫组化法观察脑缺血周边区生长相关蛋白-43(GAP-43)和微管相关蛋白-2(MAP-2)的免疫活性强度。结果:大鼠局部脑缺血再灌注后,运动组前肢放置试验和平衡试验评分优于对照组,前肢放置试验在第9、11、13、15、17、19、21、23、25天差异具有显著性(P均<0.01),平衡试验在第7、9、11、13、17、19天差异具有显著性(P<0.01—0.05)。运动组皮层缺血周边区GAP-43和MAP-2表达水平高于对照组,前者在第7天、14天、28天差异有显著性(P<0.05),后者在第14天、28天差异有显著性(P<0.05)。结论:运动训练能促进大鼠MCAO后的肢体功能恢复,其机制可能与缺血周边区GAP-43和MAP-2的表达上调有关。

大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后GAP-43及IGF-1促进神经元再生表达的实验研究

目的探讨Wistar大鼠脑缺血再灌注损伤后生长相关蛋白GAP-43抑制神经元凋亡和胰岛素样生长因子-I（IGF-1），促进神经元再生的可塑性表达机制。方法将80只成年健康雄性Wistar大鼠，分为GAP-43组和IGF-1组，每组各40只，并随机分为正常对照组、假手术组和缺血1h再灌注2h、6h、12h、24h、48h、3d、7d、14d组，每组4只（n=4）。应用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注动物模型，并采用免疫组织化学方法检测GAP-43与IGF-1在神经元凋亡中的表达情况，并进行图像分析。结果GAP-43组：缺血再灌注2h，海马、皮质区及纹状体区神经元GAP-43呈基础表达，6-48h表达逐渐增高，7d达高峰，14d达最低，P〈0.05。与假手术组比较有显著性差异，P〈0.05。IGF-1组：正常对照组及假手术组在海马区、皮质区及纹状体区IGF-1阳性标记出芽细胞呈基础表达。缺血再灌2h IGF-1表达明显增高，24h达高峰，P〈0.05。48h恒定表达。3-14d仍维持高值表达，P〈0.05。结论GAP-43与IGF-1参与抑制并促进神经元轴突再生的表达。

GAP-43免疫反应神经纤维在小鼠脾脏的分布及其性质的研究

用免疫组化方法研究了GAP－43免疫反应阳性神经纤维在成年小鼠脾脏的分布及其性质。结果显示，GAP43样免疫反应阳性纤维不仅广泛分布于脾内血管周围，还存在于白髓、红髓的淋巴细胞之间。应用6-羟多巴（6－OHDA）损毁儿茶酚胺能神经后，TH、NPY免疫组化染色不能显示任何阳性神经纤维，而GAP－43免疫反应阳性神经纤维尚有部分存留．它们多位于较大的血管周围，较直且平滑、膨体少。此结果表明，成熟小鼠脾内绝大部分单胺能神经纤维和少部分非单胺能神经纤维含有GAP－43，是具有可塑性的神经纤维。

大鼠自体移植脾组织GAP-43^+神经再生的实验研究

目的 研究大鼠自体脾组织移植术后移植脾组织GAP 43 + 神经纤维再生及分布规律。方法 健康Wistar大鼠 10 5只 ,随机分为自体脾组织移植组和对照组 ,于术后 7、15、3 0、60、90、12 0、180d取移植脾组织标本 ,应用免疫组化方法显示GAP 43 + 神经纤维 ,并用图像分析系统 ,对不同时相点免疫组化GAP 43 + 染色区域进行图像定量分析。结果 自体脾组织移植术后 3 0d ,移植脾组织周围大网膜内可见GAP 43 + 神经纤维 ,并向移植脾组织内伸展 ;自体脾组织移植术后 60～ 12 0d ,移植脾组织内再生神经纤维逐渐增多 ;术后 180d ,移植脾组织中GAP 43 + 神经纤维分布及密度接近正常。结论 GAP 43 + 神经纤维于脾移植术后 60d开始出现 ,术后 180dGAP 43 +