重型再生障碍性贫血患者免疫抑制治疗后骨髓造血祖细胞水平的变化及其意义

为更好地评价重型再生障碍性贫血(SAA)患者免疫抑制治疗(IST)后骨髓造血功能恢复程度,采用造血祖细胞体外培养技术,动态观察了48例接受IBT的SAA患者及20例正常对照者骨髓晚期红系爆式集落形成单位(mBFU-E)及粒-巨噬系集落形成单位(CFU-GM)的水平变化。结果表明,IST前所有SAA患者骨髓mBFU-E及CFU-GM水平均显著低于正常对照组(P<0.001);IST后1年,29例有效者骨髓mBFU-E及CFU-GM水平显著增高,增高程度与其临床疗效相关;12例mBFU-E及10例CFU-GM水平恢复正常,其中8例患者mBFU-E及CFU-GM水平同时恢复正常。这表明SAA确是一组异质性疾病,其造血功能衰竭与异常免疫关系密切,若去除这种异常,造血功能可获得部分甚至完全重建。

AMD3100对apoE^-/-小鼠骨髓源性内皮祖细胞增殖、迁移和黏附的影响

探讨AMD3100对apoE-/-小鼠骨髓内皮祖细胞的动员作用及其增殖、迁移和黏附的影响.12只8周龄雄性apoE-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/(kg·2d))和对照组(PBS0.1ml/2d),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,差速贴壁法结合微孔法分离培养小鼠骨髓细胞,免疫荧光鉴定CD133/VEGFR-2双阳性细胞为内皮祖细胞;MTT比色法、Transwell、黏附试验分别检测细胞的增殖、迁移和黏附能力;通过计数典型内皮祖细胞克隆形成单位,观察次级集落单位的大小及细胞密度,检测各组内皮祖细胞的克隆形成能力;RT-PCR和Westernblot检测内皮祖细胞上CXCR4mRNA和蛋白质表达水平.与对照组比较,AMD3100组骨髓源性内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附和克隆形成能力均显著低于对照组,其CXCR4mRNA和蛋白质表达均显著低于对照组.结果表明:持续注射AMD3100可抑制骨髓源内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附和克隆形成能力,并下调CXCR4的表达.

ST段抬高性心肌梗死蛇毒纤溶酶治疗过程内皮祖细胞的变化

目的研究ST段抬高性心肌梗死患者经蛇毒纤溶酶治疗过程中外周血中循环内皮祖细胞(EPCs)形态、数量的变化。方法选择ST段抬高性心肌梗死(STEMI)患者60例和对照组20例,分别在蛇毒纤溶酶给药前,给药3d用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,用加入血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的RPMI-1640培养基培养细胞。用激光共聚焦显微镜初步鉴定DiL标记的乙酰化低密度脂蛋白和FITC标记的荆豆凝集素I双染色阳性细胞为EPCs;相差显微镜分析细胞形态数量变化和集落形成单位的数量。结果ST段抬高性心肌梗死患者给予蛇毒纤溶酶治疗3d后EPCs数目较治疗前明显增加,7d有所下降,但仍高于对照组,但给药前后细胞集落形成单位的数量并无变化。结论ST段抬高性心肌梗死患者给予蛇毒纤溶酶治疗后,可引起EPCs数量的增加。

AMD3100促进载脂蛋白E^(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成

目的探讨AMD3100对载脂蛋白E-/-小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块形成的影响及其可能机制。方法12只8周龄雄性载脂蛋白E-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/kg,隔天注射)和对照组(PBS 0.1mL,隔天注射),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,获取组织标本和骨髓细胞,石蜡切片HE染色检测小鼠主动脉根部动脉粥样硬化病变;通过计数典型内皮祖细胞克隆形成单位和观察次级集落单位的大小与细胞密度检测内皮祖细胞的克隆形成能力;逆转录聚合酶链反应和Western blotting检测内皮祖细胞CXCR4 mRNA和蛋白的表达。结果AMD3100组小鼠主动脉窦横切面粥样斑块面积与管腔面积之比与对照组比较增加了38.8%(37.2%±3.6%比26.8%±2.5%,P<0.05);AMD3100组小鼠骨髓源内皮祖细胞的克隆形成能力显著低于对照组(初级内皮祖细胞集落单位个数为9.67±2.16比21.83±2.64,次级内皮祖细胞集落单位个数为1.67±0.31比4.11±0.65,P<0.01);AMD3100组CXCR4 mRNA和蛋白的表达均显著低于对照组(P<0.01)。结论AMD3100促进载脂蛋白E-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成,可能与抑制骨髓源内皮祖细胞的克隆形成并下调CXCR4表达相关。

Ⅱ型登革病毒对人骨髓巨核祖细胞集落生长的影响

采用人骨髓巨核祖细胞体外半固体培养技术,观察14例次Ⅱ型登革病毒(D_2V)对巨核祖细胞集落(CFU-MK)生长的影响,与对照组进行比较,显示D_2感染组CFU-MK产率明显减少,经统计学处理差别有非常显著意义,从而证实在体外D_2V能抑制巨核祖细胞增殖。这提示登革出血热病人的出血和血小板减少与巨核细胞受该病毒抑制有关。

大蒜油对人CFu－L与CFu－GM集落形成能力的影响

本研究用体外细胞培养技术观察了大蒜油对人白血病细胞集落（ＣＦｕ－Ｌ）及骨髓粒单细胞集落（ＣＦｕ－ＧＭ）形成能力的影响。结果证明大蒜油对白血病细胞集落生长有明显的抑制作用，而相同浓度的大蒜油对正常人骨髓（ＢＭ）粒单细胞集落的形成能力亦有一定程度的抑制作用，但抑制作用较弱。

姬松茸对正常小鼠骨髓造血干、祖细胞的影响

采用干、祖细胞培养等技术,观察姬松茸粗多糖(ABPS)对正常小鼠骨髓造血的影响。结果表明,ABPS 0.1、0.4g/kg/d×5d,ip能显著促进正常小鼠骨髓粒—单系祖细胞、成纤维祖细胞和多能造血干细胞的增殖(P<0.01),且0.4g/kg的作用较0.1g/kg更显著(P<0.05或0.01);ABPS 0.1g/kg亦能促进正常小鼠骨髓红系祖细胞的增殖(P<0.05),但0.4g/kg则使CFU—E产率有下降趋势(P>0.05)。

rhIL-2对人骨髓CFU-GM与CFU-E和BFU-E的影响

目的:为了探索rhIL-2对人骨髓造血干祖细胞体外增殖的影响。方法:本文采用甲基纤维素体外半固体培养法。结果:证明了50～1000U/ml rhIL-2单用时对人骨髓造血祖细胞的CFU-GM、CFU-E及BFU-E无直接刺激增生作用,当与GM-CSF联合应用时,100～400U/ml rhIL-2其CFU-GM集落形成率明显高于单用GM-CSF(100U/ml)的对照组(P<0.05),当与EPO(2U/mi)联合应用时其CFU-E,及BFU-E集落形成率也明显高于单用EPO对照组(P<0.05),而1000U/ml rhIL-2其三种集落形成数目呈下降趋势,可能有抑制作用。结论:以上结果说明100～400U/ml rhIL-2可应用于协同GM-CSF及EPO体外扩增骨髓干/祖细胞来进行骨髓移植。

用小鼠骨髓内皮细胞条件培养液代替造血刺激因子培养CFU-GM和HPP-CFC

利用大于 10kD组分的小鼠骨髓内皮细胞条件培养液 (mBMEC CM)作刺激物体外琼脂培养CFU GM ,与rmGM CSF合用培养HPP CFC获得成功。就培养CFU GM和HPP CFC而言 ,用细胞因子作刺激物与并用大于 10kD组分的mBMEC CM作刺激物相比较 ,以后者的CFU GM及HPP

多发性硬化患者骨髓造血干(祖)细胞体外集落培养及其意义

目的:探讨多发性硬化(M S)患者骨髓造血干(祖)细胞体外培养的增殖分化功能及其临床应用意义。方法:采用体外胶原半固体培养法观察19例M S患者骨髓造血干(祖)细胞巨核系集落形成情况,甲基纤维素半固体培养法观察粒—单系和红系集落形成情况。并将各系集落形成单位按复发期和缓解期分组及按病程≤3年和病程>3年分组与健康对照组分别进行比较分析。结果:①M S复发期组的粒—单系集落形成单位(CFU-GM)显著低于健康对照组(P=0.006),也显著低于缓解期组(P=0.001)。M S缓解期组CFU-GM虽比健康对照组高,但差异无统计学意义(P>0.05)。M S复发期组、缓解期组的巨核系集落形成单位(CFU-M K)、红系集落形成单位(CFU-E)与健康对照组相比,差异均无统计学意义(均P>0.05)。②M S病程≤3年组和病程>3年组的CFU-M K、CFU-GM、CFU-E与健康对照组相比,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:M S复发期患者骨髓造血干(祖)细胞本身或其分化成粒—单系的过程存在异常;M S复发期造血干(祖)细胞也可能对造血生长因子的反应较缓解期差。

正常男性青年颈动脉参数的超声检测

正常男性青年颈动脉参数的超声检测陈伟华，叶军，凌月蓉（附属医院超声室赣州３４１０００）关键词颈动脉；超声心动描记术；参考值；男性；青年人彩色多普勒超声仪是检查颈动脉的一种无创伤性技术，它可以通过对颈动脉的形态学观察，血流状况和血流速度的分析，了解颈动...

甲状腺淋巴造影15例报告

甲状腺淋巴造影１５例报告曾华元（兴国县人民医院外科兴国３４２４００）关键词淋巴造影术，甲状腺疾病／诊断我院自１９９２年１１月以来应用甲状腺淋巴造影术，对１５例拟行手术的甲状腺疾病患者行造影检查，收利润意效果，报告如下。１资料与方法１．１临床资料本组男...

脐血血浆体外对造血祖细胞增殖的影响

目的：探讨脐血血浆对造血细胞增殖的刺激作用。方法：用细胞培养的方法以集落形成单位（ＣＦＵ）为指标，观察了脐血血浆体外对脐血和骨髓造血祖细胞增殖的影响。结果：①脐血血浆使脐血ＣＦＵ总和增加了２．２３±０．５２倍，在一定范围内，ＣＦＵ总和增加幅度与培养体系中脐血血浆含量呈剂量依赖关系，并发现脐血细胞和脐血血浆ＡＢＯ血型不同时刺激作用更为明显。②脐血血浆对骨髓造血祖细胞集落形成的刺激作用与ＡＢＯ血型有关，血型相同者，无刺激作用，血型不同者ＣＦＵ总和增加了１．５５±０．４３倍。③细胞因子可使脐血ＣＦＵ总和增加，联合应用细胞因子与脐血血浆，ＣＦＵ总和增加更为明显。④成人外周血血浆对脐血和骨髓造血细胞增殖的影响与胎牛血清相比无差异。结论：脐血血浆中含有刺激造血细胞增殖的因子，这种（些）因子对造血细胞的刺激作用具有一定的选择性；并提示脐血干细胞移植时同时输注脐血血浆可能更为有利。

蝎毒多肽对辐射损伤小鼠骨髓造血干细胞及祖细胞的作用

目的探讨不同蝎毒多肽（scorpion venom peptide，SVP）组分对辐射后机体造血干细胞及祖细胞恢复的作用。方法6．0GyX射线一次性全身照射，制作辐射损伤小鼠模型。内源性脾结节法观察照射后第10天脾集落形成单位（CFU—s）的变化。用甲基纤维素半固体培养基培养骨髓混合集落生成单位（CFU-Mix），观察体内外给药方法及照射后不同时间对CFU-Mix生成的影响。结果（1）体内实验：SVPIV组分处理后的CFU-S数明显高于照射对照组（P〈0．05）；SVPV组分CFU-S数量与照射对照组差异无统计学意义。照射后各SVP组CFU—Mix的数量均高于照射对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）体外实验：与照射对照组相比，体外分别单独加入SVPIV、V组分以及细胞因子（IL-6和SCF）均能够促进CFU-Mix的增殖；而SVPⅣ、Ⅴ组分分别与细胞因子联合应用对CFU—Mix生成的促进作用更为明显，其中Ⅳ组分效果更强，与照射对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论SVP具有保护辐射损伤小鼠造血干细胞及祖细胞，加速其增殖能力恢复的作用。

细颗粒物中镍对循环内皮祖细胞功能影响的初步研究

目的通过对循环内皮祖细胞迁移和集落形成单位的测定,探讨细颗粒物PM2.5中镍致心血管疾病的潜在机制。方法选择甘肃某一镍开采和冶炼所致环境空气中镍污染严重地区作为高镍区;位于其上风侧且自然条件与其相近的另一城市作为低镍区;另选择一环境空气中细颗粒物PM2.5浓度较低的自然保护区作为对照区。研究对象为在上述三个地区生活5年以上的60～65岁健康、非吸烟女性居民各10名,采用问卷调查、体格检查和实验室检查(血糖、血脂、肝功及尿蛋白)进行纳入和排除,体格检查和实验室检测指标不合格或已诊断其他疾病包括心血管疾病者均被排除;入选研究对象都按年龄进行配对。分别测定循环内皮祖细胞的迁移情况和集落形成单位数。结果与高镍组比较,低镍组、对照组人群循环内皮祖细胞迁移率和集落形成单位数均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。低镍组与对照组人群循环内皮祖细胞集落形成单位数间比较,差异无统计学意义。随着不同地区环境空气中镍浓度的升高,人群循环内皮祖细胞迁移率和集落形成单位数均呈下降趋势。结论细颗粒物PM2.5中的镍可能通过对循环内皮祖细胞功能的抑制而导致心血管疾病的发生。