栀子苷对局灶性脑缺血大鼠脑组织基因表达谱的影响

目的研究栀子苷对局灶性脑缺血大鼠脑组织基因表达谱的影响 ,探索栀子苷治疗脑缺血的药理作用机制。方法分别从局灶性脑缺血组、栀子苷治疗组SD大鼠的脑组织中抽提总RNA ,Cy3、Cy5荧光标记 ,反转录分别合成cDNA探针后 ,与含有 4 0 96条大鼠基因的BioStar基因表达谱芯片杂交 ,AxonGenepix 4 0 0 0B扫描仪扫描 ,GenePixPro 3 0软件分析表达信号。 结果栀子苷治疗后差异表达的基因有70条 ,其中有 6 8条基因上调 ,2条基因下调。结论栀子苷对局灶性脑缺血大鼠脑组织基因表达具有调控作用 ,从分子水平阐释了中药清开灵注射液成分栀子苷的药理作用机制。

重庆产栀子的栀子苷含量分布规律研究

以重庆产栀子为试材,采用随机群组抽样,HPLC测定栀子苷含量,x2检测研究群体栀子苷含量分布规律,为客观评价群体栀子质量和优良栀子选育提供依据.结果表明,重庆产栀子的栀子苷含量在1.47%～6.44%之间,平均含量为4.07%;x2=10.6841<x20.05(6)=12.59,p>0.05,栀子苷含量实际分布次数与由正态分布的理论次数差异不显著.重庆产栀子的栀子苷含量围绕约4%服从正态分布,质量符合中国药典标准.

LeSTONEL利石素质量标准研究

目的建立LeSTONEL利石素(黄芩、川木香、枳实、栀子等)的质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别Le-STONEL利石素中黄芩、川木香、枳实、栀子四种药材;应用反相高效液相色谱法测定LeSTONEL利石素中黄芩苷、黄芩素以及栀子苷的量。色谱条件为Diamonsil-C18柱,乙腈-0.5%磷酸(28∶72)、乙腈-水(12∶88)为流动相,体积流量1.0 mL/min,检测波长280 nm、238 nm,柱温30℃。结果薄层斑点清晰;定量测定重复性好,黄芩素线性范围19.8～138.6μg/mL(r=0.999 7),方法精密度RSD为0.57%(n=6),12 h内稳定性RSD为1.29%,黄芩素平均质量分数为3.52 mg/g,RSD为1.94%,平均回收率为99.6%;黄芩苷线性范围14.28～26.52μg/mL(r=0.9990),方法精密度RSD为1.40%(n=6),12 h内稳定性RSD为0.87%,黄芩苷平均质量分数为0.87 mg/g,RSD为2.07%,平均回收率为99.6%;栀子苷线性范围33.6～134.4μg/mL(r=0.999 2),方法精密度RSD为0.84%(n=6),24 h内稳定性RSD为1.73%,栀子苷平均质量分数为1.62 mg/g,RSD为1.74%,平均回收率为100.9%。结论建立的方法准确、可靠、专属性强,可用于LeSTONEL利石素的质量控制。

八正颗粒质量标准的改善研究

目的改进八正颗粒的含量测定法,更好地控制药品质量。方法运用高效液相色谱法对八正颗粒中栀子苷、大黄素和大黄酚含量进行测定,拟订含量测定标准,改进和完善质量控制标准。结果新修订的栀子苷、大黄素和大黄酚含量检测方法简单可行,且灵敏度高。结论统一了八正颗粒质量标准,为规范市场中八正颗粒的质量提供了依据。

芒果苷、山柰酚和栀子苷对高尿酸血症小鼠的作用

目的探讨芒果苷、山柰酚和栀子苷对酵母联合腺嘌呤诱导的高尿酸血症小鼠的治疗作用。方法采用酵母联合腺嘌呤诱导小鼠高尿酸血症模型,测定给药后对小鼠胸腺、脾脏和肾脏指数、血清中尿酸(UA)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)的含量及黄嘌呤氧化酶(XOD)活性的影响,HE染色观察肾脏组织病理学变化。结果与模型组比较,芒果苷、山柰酚和栀子苷各剂量组均能降低高尿酸血症小鼠血清中UA的含量,并能改善肾脏组织的病理损伤程度;芒果苷高剂量组和山柰酚低、中、高剂量组及栀子苷中、高剂量组均可降低血清XOD活性。结论芒果苷、山柰酚和栀子苷各剂量组均能通过抑制血清XOD活性降低高尿酸血症小鼠UA的含量,且较别嘌醇毒性和不良反应小,更具安全性,其中山柰酚的降UA作用最明显。

UPLC-MS/MS法测定茵栀黄口服液中栀子苷与绿原酸的含量

目的:建立同时测定茵栀黄口服液中栀子苷与绿原酸含量的方法。方法:采用液质联用技术,乙腈∶5 mmol·L^(-1)甲酸铵水溶液为流动相、等度洗脱,以Phenomenex Gemini C_(18)色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源,正负离子同时检测,多反应监测方式。结果:栀子苷与绿原酸的线性范围分别为2.5~640 ng·mL^(-1)(R=0.996 8)、2~512 ng·mL^(-1)(R=0.997 7),加样回收率在97.12%~104.56%,RSD均低于3.30%。栀子苷与绿原酸在茵栀黄口服液中的平均含量分别为5.33 mg·mL^(-1)、0.46 mg·mL^(-1)。结论:该法专属性强、快速灵敏,可用于茵栀黄口服液中栀子苷与绿原酸的含量测定。

痛舒胶囊临床最大耐受剂量实验中4种成分药物浓度测定方法建立

目的:建立痛舒胶囊中指标性成分栀子苷、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、人参皂苷Rb1在人血浆中的LC-MS/MS浓度检测方法,并对该方法进行验证,以经过验证的方法,对来自痛舒胶囊临床MTD(最大耐受量)实验的血浆样本进行药物浓度检测,获得志愿者口服给予痛舒胶囊后体内的药物浓度水平。方法:色谱柱:Waters SunFire C 18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:A为0.01%甲酸水,B为甲醇;梯度洗脱:0~1 min,90%A;1~8 min,90%~10%A;8~10 min,10%A;10~10.5 min,10%~90%A;10.5~15 min,90%A。流速:1 mL/min。柱温:20℃;进样量:10μL。离子源:ESI源,正离子模式,MRM扫描。结果:栀子苷、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、人参皂苷Rb1及内标盐酸普萘洛尔提取离子色谱图与血浆中内源性杂质互不干扰。以盐酸普萘洛尔为内标,栀子苷、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、人参皂苷Rb1的检测范围分别为252~8100 ng/mL、26.8~858 ng/mL、32.8~1050 ng/mL、11.2~361 ng/mL。各成分日内精密度与日间精密度RSD≤15%,准确度分别在85%~115%之间,提取回收率在61.05%~96.54%之间。基质对4个成分各浓度间的影响基本一致。结论:该方法快速、灵敏、重复性好,可用于痛舒胶囊中4种有效成分在人体内的MTD试验样本药物浓度检测。

煎煮时间及方法对黄连解毒汤药用成分影响平行对照研究

[目的]观察中药饮片煎煮及服用方法对疗效影响。[方法]使用对照研究方法,采用黄连解毒汤作为试验方剂,对照组头煎和二煎的时间均为0.5h,观察组头煎和二煎的时间均为1h,检测两组汤剂治疗,分析药汁以及药渣。[结果]观察组药汁量少于对照组,但盐酸小檗碱、黄芩苷、栀子苷含量高于对照组(P<0.05);两组药渣在气味、颜色方面也存在差异。[结论]使用中药汤剂治疗疾病,需参照中药成分的差异选择煎煮方法和服用方法,尽可能提高临床疗效。

近红外光谱技术用于清开灵颗粒七混浸膏中3种成分含量的快速测定

目的:建立一种用近红外光谱技术快速测定清开灵颗粒七混浸膏指标成分含量的方法。方法:运用偏最小二乘法结合多种光谱预处理方法及波长选择方法建立近红外光谱与清开灵颗粒七混浸膏指标成分(胆酸、栀子苷、总氮)含量之间校正模型,并用未知样品进行预测分析来评价模型的预测性能。结果:清开灵颗粒七混浸膏指标成分胆酸、栀子苷、总氮含量的校正模型相关系数分别为0.9999、0.9978、0.9999。验证集的预测值与真实值含量接近。结论:该方法操作简便、快速无损、准确可靠,可用于清开灵颗粒连续生产的质量监控。

高效液相色谱法测蒙药扎格彻主瓦中栀子苷的含量

目的:建立蒙药扎格彻主瓦中栀子苷的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:C18柱,流动相乙腈--水(15:85),检测波长:238nm。结果:栀子苷在在0.1176μg～0.588μg范围内呈良好的线性关系,加样平均回收率为9.3,RSD为2.72。结论:本法可作为该药品的质量标准。

基于网络药理学探讨舒肝宁注射液治疗乙型病毒性肝炎的作用机制

目的基于网络药理学和分子对接技术探究舒肝宁注射液治疗乙型病毒性肝炎的网络调控机制。方法选取舒肝宁注射液中19个代表性化学成分为研究对象,通过TCMSP、Swiss Target Prediction数据库,获得化合物潜在作用靶点。利用DisGeNET、GeneCards数据库检索乙型病毒性肝炎的疾病相关靶点,利用Venny平台获取化合物作用靶点与疾病靶点的交集靶点为舒肝宁注射液治疗乙型病毒性肝炎潜在作用靶点。进一步对靶蛋白进行蛋白相互作用(PPI)网络分析、Cluster模块分析、基因本体(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析。在PPI核心靶点网络分析基础上进一步通过分子对接方法验证网络药理结果。结果获得19个成分的173个舒肝宁注射液治疗乙型病毒性肝炎的潜在作用靶点,并可作用于SRC、HSP90AA1、ERS1、PIK3CA、HRAS等核心靶点,调节乙型病毒性肝炎、丙型病毒性肝炎、VEGF、TNF、PI3K/Akt等信号通路。分子对接结果表明,舒肝宁注射液与乙型病毒性肝炎信号通路关联的活性成分与相关靶点可自发结合。结论舒肝宁注射液治疗乙型病毒性肝炎的机制可能是通过多组分多靶点干预乙型肝炎信号通路起作用。

基于真实世界与靶点网络聚类的茵栀黄颗粒治疗黄疸的联合用药方案及分子机制分析

目的 挖掘茵栀黄颗粒治疗黄疸的核心联用药物方案的临床应用规律,为探索临床不同诊疗思路、用药经验和提高中医药临床证据的循证等级提供参考。方法 基于全国39家医院信息管理系统(hospital information system,HIS)黄疸患者的用药数据,运用Tabu搜索算法,对真实世界茵栀黄颗粒治疗黄疸的联合用药情况进行回顾性分析。同时,采用靶点网络分析核心联合用药方案的分子网络机制,并通过分子对接技术对其作用机制进行验证。结果 根据Tabu搜索算法聚类分析的结果,结合肝病相关指南和文献,识别出3种茵栀黄颗粒治疗黄疸的核心联用药物方案:(1)针对药物性肝损伤导致的黄疸,可以联用谷胱甘肽;(2)针对胆汁淤积导致的黄疸,可以联用亮菌甲素;(3)针对病毒性肝炎导致的黄疸,可以联用双环醇。3种方案的分子网络机制均具有多成分、多靶点、多通路的特点,茵栀黄联用谷胱甘肽治疗黄疸的分子网络机制主要与机体的炎症免疫、Toll样受体信号通路传导、谷胱甘肽代谢通路和细胞死亡负调控的生物过程有关;茵栀黄联用亮菌甲素治疗黄疸的分子网络机制主要与动脉粥样硬化、胆汁分泌等关键通路有关;茵栀黄联用双环醇治疗黄疸的分子网络机制主要与上皮细胞信号转导通路和癌症相关的信号通路有关。结论 数据挖掘得出的茵栀黄颗粒核心联合用药方案,基本符合相关指南及诊疗规范,并对其作用机制进行了探索,为优化临床联合用药、合理用药提供了一定的指导和参考。建议临床实际应用过程中,根据黄疸的疾病进展情况,合理评估临床联合用药方案的疗效及安全性,注意用药配伍禁忌。

多指标均匀设计法优选痤疮消凝胶提取工艺

目的:优选痤疮消凝胶的提取工艺,为该制剂的临床应用提供参考。方法:以大黄游离总蒽醌、栀子苷、咖啡酸含量的综合评分为指标,采用均匀设计法考察乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间和提取次数对提取工艺的影响。采用HPLC测定大黄游离总蒽醌、栀子苷、咖啡酸含量,流动相分别为甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15),甲醇-水(23∶77),乙腈-0.1%磷酸溶液(10∶90),检测波长依次为254,238,323 nm。结果:最佳提取工艺参数为加12倍量80%乙醇提取3次,每次1 h。大黄游离总蒽醌、栀子苷、咖啡酸质量浓度分别为1 260.33,1 597.56,32.19 mg·L-1。结论:优选的痤疮消凝胶提取工艺合理可行、重复性好,为该制剂生产工艺参数的确定提供实验依据。

益智亲水凝胶骨架片的制备

目的:制备益智亲水凝胶骨架片。方法:以羟丙甲基纤维素为骨架材料制备亲水凝胶骨架片,以栀子苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1为评价指标,考察各因素对益智亲水凝胶骨架片体外释放的影响,优化处方和工艺。结果:辅料用量为20%且HPMCK15M:HPMCK4M为1:13时,以粉末直接压片法制备的益智亲水凝胶骨架片在12h内持续释药,达到缓释效果,且释药曲线平稳,3批验证f2因子均大于50。结论:以羟丙甲基纤维素为骨架材料,粉末直接压片可制得缓释效果理想的益智亲水凝胶骨架片。

醒脑静注射液保护新型冠状病毒致神经系统损害的功效网络分析与机制预测

目的探寻醒脑静注射液(XNJI)保护新型冠状病毒(SARS-CoV-2)致神经系统损害的活性成分、靶点及通路,以期阐述其作用机制。方法利用TCMSP、BATMAN、Swiss Target Prediction等数据库检索醒脑静注射液的中药的化学成分和作用靶点,使用Cytoscape软件分别构建醒脑静注射液"中药-活性成分-相关靶点"功效作用网络,通过GO富集和KEGG通路注释分析预测潜在的作用机制,并将醒脑静注射液中核心成分与SARS-CoV-2 3CL Mpro、血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)、2019-nCoV RBD/ACE2-B0AT1 complex进行分子对接验证。结果筛选出醒脑静注射液105个活性成分,928个药物靶点,741个冠状病毒靶点,611个神经保护靶点,得到药物-疾病共同靶点83个,核心成分12个,关键靶点7个。GO富集分析共得到204个条目,KEGG注释分析共得到120条信号通路,涉及乙型肝炎通路、致癌通路、TNF、HIF-1及VEGF信号通路等。分子对接结果显示醒脑静注射液核心成分与3CL Mpro、ACE2、和complex的结合活性较好,其中绿莲皂苷元、山柰酚与3个蛋白的结合能均最低。结论醒脑静注射液中核心成分绿莲皂苷元、山柰酚、5-羟基-6,7,3′,4′,5′-五甲氧基黄酮、异山柰素、桑黄素、栀子黄素A、槲皮素、艾黄素、染料木素、龙脑香内酯、姜黄素、榄香素等可能通过作用PARP1、PTGS2、MMP9、CDK2、ADORA2A、ALOX5、GSK3B等关键靶点,干预多种信号通路,调控炎症反应、细胞凋亡、氧化应激、血管生成等过程改善SARS-CoV-2对神经系统的损害,还可能与3CLMpro、ACE2和complex结合以抑制病毒复制及对宿主细胞的感染,提示醒脑静注射液可能对SARS-CoV-2引发的神经系统损害具有积极的治疗作用。

黄连解毒汤中9种主要成分在大鼠脑组织中分布特征研究

目的建立灵敏、准确、可靠的小檗碱、小檗红碱、药根碱、巴马汀、黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A、京尼平苷和栀子黄素B在大鼠海马、皮层、纹状体和脑脊液组织中高效液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS-MS)分析方法,用于黄连解毒汤中9种主要成分在大鼠脑组织中分布研究。方法优化黄连解毒汤中9种主要成分及内标克拉霉素和氯霉素的质谱检测条件,确定分析条件并对方法学进行考察。正常大鼠ig给予黄连解毒汤,末次给药1 h后采集脑脊液、海马、皮层和纹状体样品,经处理后将该方法用于9种成分的测定。结果小檗碱、药根碱、巴马汀、黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A、栀子黄素B在1~250 ng/mL呈现良好的线性关系(r^2>0.99),小檗红碱在1~500 ng/mL具有良好的线性关系(r^2=0.9912),京尼平苷在5~500 ng/mL具有良好的线性关系(r^2=0.9995);各成分的日内、日间精密度RSD均小于12.94%,准确度均在-12.71%~6.91%;提取回收率均在88.02%~106.70%,基质效应均在88.92%~105.10%;短期、冻融循环和长期稳定性RSD均小于12.51%。各成分在海马、皮层和纹状体中的含量为小檗碱>黄芩苷>京尼平苷>小檗红碱>巴马汀>汉黄芩素>药根碱>千层纸素A>栀子黄素B;各成分在脑脊液中的含量为京尼平苷>小檗碱>小檗红碱>巴马汀>黄芩苷>栀子黄素B>药根碱>汉黄芩素>千层纸素A。结论该方法可用于大鼠脑组织中小檗碱、药根碱等9种成分含量的同时检测,并可用于这9种成分在大鼠脑组织分布研究,为探究黄连解毒汤治疗脑部疾病的物质基础提供依据。

丹栀逍遥散6种有效成分的HPLC测定

目的:建立丹栀逍遥散制剂中有效成分栀子苷、中京尼平苷、芍药内酯苷、甘草甜素、芍药苷以及牡丹酚6种成分的测定分析方法。方法:采用HPLC,Cosmosil 5C18色谱柱,(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.5%磷酸水(15∶85)梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,波长230 nm。结果:根据上述方法可在90 min内成功地分离丹栀逍遥散中栀子苷、京尼平苷、芍药内酯苷、甘草甜素、芍药苷以及牡丹酚6个指标成分,在丹栀逍遥散中各成分质量分数为栀子苷1.203 mg·g-1,京尼平苷1.960 mg·g-1,芍药内酯苷6.720 mg·g-1,甘草甜素0.157 mg·g-1,芍药苷0.012 mg·g-1,牡丹酚0.127 mg·g-1。结论:该方法可用于丹栀逍遥散中栀子苷、京尼平苷、芍药内酯苷、甘草甜素、芍药苷以及牡丹酚的测定,操作简单、结果准确、回收率高、重复性好,可用于丹栀逍遥散及其相关制剂的质量控制。

近红外光谱技术快速测定清开灵颗粒中3种成分含量

目的建立快速测定清开灵颗粒中3种成分含量的近红外光谱法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法分别测定清开灵颗粒中栀子苷、黄芩苷、胆酸的含量,近红外光谱仪采集清开灵颗粒的近红外光谱数据,采用THUNIR V3.0软件以偏最小二乘法结合多种预处理方法及波长选择方法建立清开灵颗粒中3种成分含量与近红外光谱之间的校正模型,并通过决定系数、交叉检验的校正标准偏差和校正标准偏差来评价模型的预测性能,并对未知样品进行预测分析。结果清开灵颗粒中栀子苷、黄芩苷和胆酸的近红外光谱模型预测集的相关系数分别为0.9992、0.9987、0.8941;交叉检验的校正标准偏差分别为0.0489、0.0489、0.0498;校正标准偏差分别为0.0016、0.0016、0.0239。10批颗粒中栀子苷、黄芩苷及胆酸验证集含量的参考值与预测值接近。结论近红外光谱技术所建立的模型性能较好,能够快速准确的测定清开灵颗粒中3种成分的含量,并实现在线监控,保证生产质量。