南方红豆杉水提物对HER2阳性人NCI-N87胃癌移植瘤生长及凋亡作用

目的:探讨南方红豆杉水提物对HER2阳性人胃癌NCI-N87细胞裸鼠移植瘤的抑制作用,及诱导凋亡的作用。方法:通过建立人胃癌NCI-N87细胞裸鼠移植瘤模型,采用随机数字法将80只裸鼠随机分为8组:生理盐水对照组,南方红豆杉低、中、高剂量组,西药赫赛汀组,南方红豆杉低、中、高剂量联合赫赛汀组;给药处理后颈椎脱臼法处死裸鼠,剥离瘤组织,称瘤重、测量瘤径,计算移植瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,计算瘤重得抑瘤率;TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡,计算凋亡指数。结果:同对照组比较治疗组均可抑制肿瘤生长(P<0.05),且联合组表现出比单药组更为显著的抑制作用;中剂量联合组对肿瘤的抑制作用优于红豆杉高剂量及赫赛汀单药组(P<0.05)。对照组凋亡细胞数少,凋亡率低,低、中、高剂量单药组均可见到凋亡细胞,凋亡率同对照组比较(P<0.05);各剂量联合用药组凋亡细胞数目较多,与单药组比较均有明显差异(P<0.05),中剂量联合组差异性最为显著(P<0.01)。结论:南方红豆杉水提物对HER2阳性高表达NCI-N87胃癌裸鼠移植瘤的生长有抑制作用,联合赫赛汀可以增强其增殖抑制效果,中剂量联合组显著提高赫赛汀的抑瘤作用;南方红豆杉水提物可以促进胃癌细胞的凋亡,联合赫赛汀能增强其诱导凋亡作用。

敲除Linc00152对丝裂霉素耐药胃癌细胞NCI-N87/MMC的化疗耐药性影响及机制

背景长基因间非编码RNA 152(long intergenic noncoding RNA 152,Linc00152)在胃癌组织中高表达,且其能促进胃癌细胞增殖、迁移与侵袭,而Linc00152对胃癌化疗耐药的影响和机制并不清楚.目的探究Linc00152对人胃癌细胞系NCI-N87化疗耐药性的影响及相关的作用机制.方法实时定量荧光聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测人胃癌细胞系NCI-N87及其丝裂霉素(mitomycin,MMC)耐药细胞系NCI-N87/MMC中Linc00152的表达情况.采用小分子RNA干扰技术敲除NCI-N87/MMC中Linc00152的表达后,MTT法检测细胞对MMC和顺铂的敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western Blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteine aspartic acid proteinase 3,caspase3)和劈裂的caspase3(cleaved-caspase3)的蛋白表达水平.此外,Real-time PCR和Western blot检测多药耐药蛋白1/P-糖蛋白(multidrug resistant protein 1/P-glycoprotein,MDR1/P-gp)、层粘连蛋白受体1前体抗原(P37-kDa laminin receptor-1 precursor antigen,Mgr1-Ag)以及多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein,MRP)的表达.结果NCI-N87/MMC细胞中Linc00152的表达水平明显高于其亲本细胞NCI-N87.在NCI-N87/MMC细胞中,敲除Linc00152可诱导细胞凋亡,并增加其对MMC和顺铂的敏感性.敲除Linc00152可抑制NCI-N87/MMC细胞中Bcl-2蛋白表达,促进Bax蛋白表达和caspase 3的活化.此外,敲除Linc00152还可下调NCI-N87/MMC细胞中多药耐药基因MDR1、Mgr1-Ag、MRP及其编码的蛋白的表达.结论下调NCI-N87/MMC细胞中Linc00152的表达可提高细胞对MMC和顺铂的敏感性,其机制可能与调控细胞凋亡相关因子促进凋亡,同时下调细胞中多药耐药基因MDR1、Mgr1-Ag及MRP的表达有关.

三氧化二砷对胃癌NCI-N87细胞增殖的影响

目的研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对胃癌细胞系NCI-N87的细胞增殖与凋亡的影响。方法用50umol/L的As2O3处理NCI-N87细胞,培养24h后,用MTT法检测As2O3对NCI-N87细胞的增殖影响,和TUNEL法检测细胞经过As2O3处理后细胞凋亡情况。结果 50umol/L的As2O3作用24h后NCI-N87细胞的细胞增殖率是21.3%。经过As2O3处理的NCI-N87细胞相比没有进行加药处理的细胞出现了大量的细胞凋亡。As2O3作用24h后NCI-N87细胞的不同视野细胞凋亡率分别是37.8%、34.00%、35.40%、36.8%(P<0.01),正常没有加药培养的NCI-N87细胞的细胞凋亡率是6.20%、5.00%、7.60%、7.00%(P<0.01)。结论通过As2O3诱导其细胞凋亡,使胃癌NCI-N87细胞的细胞增殖有明显的抑制作用。

吉非替尼通过靶向circ-0000745/miR-421轴调控胃癌细胞N87增殖、凋亡的分子机制

目的:探讨吉非替尼是否通过环状RNA(circRNA)circ-0000745/微小RNA-421(miR-421)轴调控胃癌细胞N87增殖、凋亡。方法:运用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、平板克隆实验、蛋白印迹(Western blot)分析、流式细胞术与定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)测定空白对照(NC)组、0.125,0.25,0.5μmoL·L^(-1)吉非替尼组、si-NC组、si-circ-0000745组、NC+si-NC组、吉非替尼+si-NC组、吉非替尼+si-circ-0000745组、si-NC+anti-miR-NC组、si-circ-0000745+anti-miR-NC组、si-circ-0000745+anti-miR-421组胃癌细胞N87的活力、克隆形成、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、P21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达、凋亡率与circ-0000745、miR-421表达。双荧光素酶实验分析circ-0000745与miR-421间的关系。结果:与NC组相比,0.125,0.25,0.5μmol·L^(-1)吉非替尼组细胞活力、克隆形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量、miR-421表达量逐渐降低,而P21蛋白表达量、凋亡率、Bax蛋白表达量、circ-0000745表达量逐渐增加,且不同剂量组差异有统计学意义(P<0.05)。circ-0000745靶向负调控miR-421。与si-NC组相比,si-circ-0000745组胃癌细胞N87活力、克隆形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量升高,P21蛋白表达量、凋亡率和Bax蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与吉非替尼+si-NC组相比,吉非替尼+si-circ-0000745组N87细胞中活力、克隆形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量增加,P21、Bax蛋白表达量、凋亡率减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。与si-circ-0000745+anti-miR-NC组相比,si-circ-0000745+anti-miR-421组N87细胞活力、克隆形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量降低,P21、Bax蛋白表达量、凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:吉非替尼通过上调circ-0000745靶向miR-421,抑制胃癌细胞N87增殖,并诱导其凋亡。

健脾化痰方对HER-2阳性人NCI-N87胃癌移植瘤生长及凋亡作用

目的探讨健脾化痰方对HER-2阳性人胃癌NCI-N87细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及诱导凋亡作用。方法通过建立人胃癌NCI-N87细胞裸鼠移植瘤模型,采用随机数字法将裸鼠随机分为空白对照组,健脾化痰方低、中、高剂量组,赫赛汀组,健脾化痰方低、中、高剂量联合赫赛汀组;给药处理后处死裸鼠,计算移植瘤体积,绘制肿瘤生长曲线及计算抑瘤率;采用TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡情况,计算凋亡指数。结果与对照组比较,治疗组裸鼠移植瘤体积均小于对照组(P <0.05),且联合组表现出比健脾化痰方组更为显著的抑制作用。TUNEL法检测结果显示对照组凋亡细胞数少,凋亡指数低。低、中、高剂量健脾化痰方组均可见到凋亡细胞,凋亡指数均高于对照组(P <0.05)。各剂量联合用药组凋亡细胞数目较多,凋亡指数均高于健脾化痰方组(P <0.05)。结论健脾化痰方对HER-2阳性高表达NCI-N87胃癌裸鼠移植瘤的生长有抑制作用,联合赫赛汀可以增强其增殖抑制效果;健脾化痰方可以促进胃癌细胞的凋亡,联合赫赛汀能增强其诱导凋亡作用。

胃复春胶囊通过调节Bcl-2/Bax号通路诱导胃癌细胞凋亡

目的研究胃复春胶囊对人胃癌细胞的作用,为胃复春胶囊在抗消化道肿瘤方面的应用提供依据。方法NCI-N87人胃癌细胞与不同浓度的胃复春胶囊提取物共孵育,采用Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞活力;流式细胞术Annexin V/PI双染色检测细胞凋亡及细胞周期;Western blot法检测与细胞凋亡相关的蛋白表达情况。结果胃复春胶囊提取物能够剂量和时间依赖地抑制NCI-N87细胞生长,诱导NCI-N87细胞产生凋亡,且使细胞周期阻滞在G0/G1期;经过胃复春胶囊提取物处理24 h后,实验组NCI-N87细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-w表达量下调;促凋亡蛋白Bax、Bad表达量上调,呈剂量依赖性。结论胃复春胶囊提取物能抑制胃癌细胞的增殖、阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡,其作用机制推测与Bcl-2/Bax信号通路有关。文章为临床上胃复春胶囊治疗胃癌提供了依据。