Expression and significance of intratumoral interleukin-12 and interleukin-18 in human gastric carcinoma

AIM: To explore the effect of intratumoral expressions of interleukin-12 (IL-12) and interleukin-18 (IL-18) on clinical features, angiogenesis and prognosis of gastric carcinoma. METHODS: The expressions of IL-12 and IL-18 from 50 samples of gastric cancer tissue were analyzed by immunohistochemistry, and microvessel density (MVD) was determined with microscopic imaging analysis system. RESULTS: The positive expression rates of IL-12 and IL-18 were 44% (22/50) and 26% (13/50), respectively. IL-12 was significantly associated with pathologic differentiation, depth of invasion, lymph node metastasis, distant metastasis, and TNM stage, and IL-18 was closely related to distant metastasis. Intratumoral IL-12 and IL-18 expressions were not statistically related to MVD scoring. IL-12-positive patients survived significantly longer than those with IL-12-negative tumors, but there was no significant difference between IL-18-positive patients and IL-18-negative ones. The multivariate analysis with Cox proportional hazard model revealed IL-12, MVD and T stage were independent prognostic factors. CONCLUSION: The positive expressions of IL-12 and IL-18 can play an important role in progression and metastasis of gastric cancer, and IL-12 might be an independent factor of poor prognosis in gastric carcinoma.

胃癌组织中EGFR和COX-2表达的意义及其相关性

目的：探讨表皮生长因子受体（EGFR）和环氧化酶-2（COX-2）的表达与胃癌侵袭、转移因素的关系以及EGFR与COX-2在胃癌组织中表达的相关性．方法：用免疫组化的方法检测61例胃癌组织和相应的20例癌旁组织石蜡切片中EGFR、COX-2表达情况；用Western blot方法检测10例胃癌组织和相应的癌旁组织中EGFR、COX-2蛋白的表达．结果：免疫组化检测胃癌组织中EGFR及COX-2的阳性表达率分别为36．07％、59．02％均明显高于癌旁组织的0％、25％（x^2=9．903，P〈0．01：x^2=6．972，P〈0．01）；COX-2表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和病理分化程度有关（x^2=6．333，P〈O．05；x^2=5．588，P〈0．05；x^2=8．826，P〈0．01；x^2=5．653，P〈0．05）．EGFR表达与淋巴结转移和TNM分期有关（f=10．648，P〈0．01;x^2=4．150，P〈0．05）．EGFR与COX-2表达呈明显相关（r=0．316，P〈0．05）．Western blot方法检测胃癌组织中EGFR及COX-2的蛋白表达高于癌旁组织（35．89±12．50vs15．14±2．15，P〈0．01：51．29±23．42vs27．65±7．42．P〈0．05）．结论：EGFR、COX-2在胃癌组织中高表达，EGFR、COX-2的表达与胃癌的侵袭、转移密切有关，COX-2表达与EGFR显著相关．

胃癌组织中P16和Rb蛋白的表达

目的 :探讨P1 6和Rb蛋白在胃癌发生发展中的作用。方法 :采用免疫组化方法检测 4 0例胃癌标本和1 8例癌旁正常胃黏膜中的P1 6和Rb蛋白的表达。结果 :P1 6和Rb蛋白在胃癌组织中的表达阳性率 (35 .5 % ,4 0 % )明显低于癌旁正常胃黏膜组织 (88.6 % ,85 .7% ) (P <0 .0 5 ) ;P1 6和Rb蛋白在胃癌中的表达阳性率呈明显负相关(P <0 .0 5 ,rs=- 0 .5 1 2 ) ;P1 6表达与胃癌的淋巴结转移 ,浸润深度 ,TNM分期有关 (P <0 .0 5 ) ;Rb表达与胃癌的淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 ) ,与浸润深度 ,TNM分期无关 (P >0 .0 5 )。结论 :P1 6和Rb蛋白在胃癌中相互抑制表达 ,在胃癌发生发展过程中起一定的作用 。

胃癌组织COX-2和VEGF的表达与临床病理特征相关性研究

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达与胃癌临床病理特征之间的关系以及COX-2与VEGF在胃癌组织中表达的相关性。方法采用免疫组化EnVision两步法检测胃癌组织61例及相应的癌旁组织COX-2、VEGF的表达。结果胃癌组织中COX-2及VEGF的阳性表达率均明显高于癌旁组织(P<0.05);胃癌中COX-2、VEGF的表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和病理分化程度显著相关(P<0.05)。VEGF与COX-2表达呈明显相关(P<0.05)。结论COX-2、VEGF在胃癌组织中高表达,COX-2、VEGF的表达与胃癌的发生、发展密切相关,COX-2、VEGF的检测有助于判断胃癌的预后。COX-2表达与VEGF显著相关,两者联合检测有望成为判断胃癌恶性程度的重要生物学指标。

TGF-βⅡ型受体、Smad4与Smad7蛋白在胃癌中的表达

目的通过检测转化生长因子TGF-βⅡ型受体(TβR-Ⅱ)、Smad4与Smad7蛋白在胃癌组织中的表达,研究它们与胃癌发生、发展的关系。方法应用S-P免疫组化检测方法,对10例正常胃黏膜、10例早期胃癌与45例进展期胃癌组织的TβR-Ⅱ、Smad4与Smad7蛋白的表达进行检测。结果TβR-Ⅱ与Smad4蛋白在正常胃黏膜和早期胃癌中的表达明显高于进展期胃癌,且胃癌分化程度越低,阳性表达率越低(P<0.05)。Smad7蛋白在进展期胃癌中的表达明显高于正常胃黏膜和早期胃癌(P<0.05)。TβR-Ⅱ、Smad4及Smad7蛋白的表达均与淋巴结转移相关。结论TβR-Ⅱ、Smad4与Smad7蛋白三者表达的异常可能与胃癌的发生、发展和转移相关,可能成为研究胃癌分化与转移的生物学标记物。

C_(60)-氮芥对胃癌生长和转移抑制作用的实验研究

目的研究C60-氮芥对胃癌生长和转移的抑制作用。方法建立人胃癌裸鼠原位种植模型。40只荷瘤裸鼠随机分为4组,分别腹腔内注入生理盐水、C60、氮芥及C60-氮芥。观察原位种植肿瘤生长及转移情况,检测血清CEA值。结果生理盐水组、C60组、氮芥组和C60-氮芥组的抑瘤率分别为0%、4.6%、36.2%和41.4%;淋巴结转移率分别为90%、90%、70%和20%;肝转移率分别为80%、80%、60%和30%;血清CEA值分别为(32.6±4.5)ng/ml、(30.5±4.8)ng/ml、(17.9±4.1)ng/ml和(16.3±3.3)ng/ml。C60-氮芥组或氮芥组与生理盐水组比,对胃癌的生长的抑制作用差异有统计学意义,而C60-氮芥组与氮芥组比,对胃癌生长抑制作用差异不显著(P>0.05)。C60-氮芥组或氮芥组与生理盐水组比,对胃癌淋巴结转移生长后抑制作用差异均有统计学意义(P<0.05),且C60-氮芥组与氮芥组比,对胃癌的淋巴结转移生长的抑制作用差异有统计学意义(P<0.05)。结论C60-氮芥可抑制人胃癌裸鼠原位种植瘤的生长和转移,对淋巴结转移的抑制作用尤其明显。

胃癌组织中CD1a^+树突状细胞密度和血管内皮生长因子表达及其相关性

目的:探讨胃癌组织中CD1a^+树突状细胞密度和VEGF表达及其与胃癌临床病理特征间的关系,并探究其在胃癌组织中表达的相关性。方法:采用免疫组织化学双染法检测60例胃癌组织及相应癌旁组织中CD1a^+DCs、VEGF的表达。结果:胃癌组织中CD1a^+DCs浸润密度略低于癌旁组织(P>0.05),但差异无统计学意义;胃癌中CD1a^+DCs密度与浸润深度、肿瘤分化、TNM分期程度有关(P<0.05)。胃癌组织VEGF的阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.01),胃癌中VEGF的表达与肿块大小(P<0.05)、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期程度有关(P<0.01)。CD1a^+DCs与VEGF表达呈负相关(r=-3.08,P<0.01)。结论:CD1a^+DCs随着胃癌恶性程度增加和肿瘤的进展而减少;VEGF在胃癌组织中高表达,VEGF的表达随着胃癌的进展而增高,对其表达与检测有助于判断胃癌的预后。

RORα miRNA真核表达载体构建及对人胃癌细胞增殖的影响

目的构建RORα(Retinoid acid receptor related orphan receptorα,维甲酸相关孤核受体α)miRNA真核表达载体,分析其对人胃癌MGC803细胞RORα蛋白表达及细胞增殖的影响。方法构建针对设计RORαmiRNA表达的3对miRNA干扰序列,克隆入pcDNATM6.2-GW/EmGFP miRNA真核表达载体,在测序鉴定无误后将含RORαmiRNA转染人胃癌MGC803细胞,用Western blo检测MGC803细胞转染前后RORα蛋白的表达水平变化。MTT法检测对转染MGC803细胞增殖的影响。结果 Western blot结果证实,MGC803细胞转染RORαmiRNA后24h RORα蛋白表达水平明显低于转染阴性组(P<0.05)。MTT结果显示,转染RORαmiRNA后细胞增殖率(光吸收值)高于转染阴性组(P<0.05)。结论 miRNA靶向抑制RORα表达后,可促进人胃癌MGC803细胞增殖,提示RORα是一个潜在的胃癌基因及药物治疗的靶点。

ets-1基因的反义寡核苷酸治疗胃癌的研究

目的 :研究ets 1反义寡核苷酸对胃癌的治疗作用及其机制。方法 :应用ets 1反义、正义寡核苷酸转染SGC 790 1细胞 ,并设PBS对照组。转染后应用逆转录聚合酶链式反应检测ets 1mRNA的变化 ,克隆形成试验检测细胞增殖活性的变化 ,Transwell小室检测癌细胞体外侵袭力的变化 ,并应用裸鼠胃癌皮下转移模型观察对体内侵袭力的影响。结果 :转染ets 1反义寡核苷酸后 ,ets 1mRNA表达降低 ,形成克隆数目较正义组、对照组明显减少 (2 4 .2± 4 .8vs 4 7.6± 8.1vs 4 4 .3± 7.6 ,P<0 .0 1) ,穿过小室滤膜细胞数目明显减少 (97.1± 11.1vs 198.7± 18.3,2 0 5 .8± 2 2 .2 ,P <0 .0 1) ,裸鼠胃癌生长明显受到抑制。结论 :ets 1反义寡核苷酸对胃癌有治疗作用 ,其机制可能与降低胃癌细胞体内外侵袭力有关。

青海省西宁胃癌高发区Hp菌株特征分析

目的 分析青海省西宁胃癌高发区 ,幽门螺杆菌 (Hp)特异性蛋白CagA、VacA、UreA及UreB的阳性率 ,及其与该地区患者胃镜大体诊断和病理诊断间的关系。方法 行胃镜检查时 ,内镜下取组织送病理检查 ,并进行CLO、WS及WesternBlot检测 ,判断其Hp的感染情况。通过WesternBlot的方法判断患者感染的Hp中CagA、VacA、UreA及UreB的情况。 结果 在内镜大体诊断的比较中 ,UreA的阳性率在慢性浅表性胃炎组中明显低于胃、球部溃疡和复合溃疡组 ,亦低于慢性萎缩性胃炎、胃溃疡及胃癌组。而UreB的阳性率在胃、球部溃疡及胃溃疡中显著低于慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎 ,有显著性差异。UreB在肠上皮化生、萎缩性胃炎、胃癌组中的阳性率显著低于慢性浅表性胃炎及消化性溃疡组 ,且在慢性浅表性胃炎中显著升高。CagA、VacA在不同内镜诊断或病理诊断的标本中的阳性率无差异。结论 西宁胃癌高发区Hp菌株的UreA可能与患者发生较严重的胃病变(慢性萎缩性胃炎、消化性溃疡及胃癌 )有关 ,而UreB可能对胃的严重病变 (消化性溃疡及胃癌 )

腹腔灌洗液中端粒酶活性和CA125水平的测定在诊断胃癌腹膜转移中的应用

目的比较胃癌患者腹腔灌洗液中端粒酶活性与CA125水平在诊断胃癌腹膜转移中的灵敏度。方法应用端粒酶重复序列扩增程序（TRAP）-酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测46例胃癌腹腔灌洗液中的端粒酶活性，同时对其行腹腔灌洗液CA125水平检测。结果46例胃癌患者腹腔灌洗液中端粒酶活性检测阳性率为47．8％，PT1—2、PT3和PT4胃癌分别为0、55．6％和92．3％；浆膜未受累、受累面积〈10cm^2、10—20cm^2和〉20cm^2患者，分别为5．3％、25．0％、76．9％和100．0％；无肉眼可见腹膜转移（P0）患者为42．9％；肉眼可见腹膜转移（P1—3）患者为100．0％。而46例胃癌患者腹腔灌洗液中CA125阳性率为34．8％，PT1—2、PT3、PT4胃癌分别为20．0％、33．3％、53．8％；浆膜未受累、受累面积〈10cm^2、10—20cm^2和〉20cm^2患者，分别为10．5％、25．0％、38．5％和80．0％；P0患者为28．6％，P1-3患者为100．0％。腹腔灌洗液中端粒酶活性检测的阳性率较CA125有显著提高（P〈0．05）。结论腹腔灌洗液中端粒酶活性与胃癌腹膜转移呈正相关，其活性测定可用于胃癌腹膜转移的早期诊断。

胃癌组织环氧合酶-2表达与血管内皮生长因子的关系

目的 观察胃癌环氧合酶-2和血管内皮生长因子的表达及相互关系。方法 应用免疫组化法检测胃癌组织COX-2和VEGF的表达状况。结果 32例胃癌中发现COX-2表达阳性22例(68.7％),其中伴淋巴结转移者COX-2表达阳性率80.9％(17/21),高于不伴淋巴结转移者的45.4％(5/11)(P<0.05)。而不同胃癌分期与组织类型之间COX-2表达无显著性差异(P>0.05)。32例胃癌中VEGF表达阳性20例(62.5％),其中COX-2阳性胃癌VEGF表达阳性率77.3％(17/22),而COX-2阴性胃癌VEGF阳性率30％(3/10),两组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论 胃癌组织存在COX-2过度表达,且与VEGF表达相关。

FDM方案在晚期胃癌化疗中的应用

本文报道应用FDM方案治疗晚期胃癌56例。获得了较好疗效,其中完全缓解8例,部分缓解21例,总有效率为51.8％,有效患者的中位生存期明显延长,为12.5个月。我们认为该方案毒副作用轻微、缓解率较高,而且经济等优点,故可作为胃癌化疗的首选方案。

胃癌组织中血管内皮生长因子的表达与临床预后的关系

采用免疫组织化学EnVision两步法检测胃癌组织61例及相应的癌旁组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达,探讨胃癌中VEGF的表达与胃癌临床病理特征之间的关系以及对胃癌患者生存率的影响。结果表明:胃癌组织中VEGF的阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.05);胃癌中VEGF的表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和病理分化程度及生存率呈显著相关(P<0.05)。证明VEGF在胃癌组织中高表达,VEGF的表达与胃癌的发生、发展及生存密切相关,VEGF的检测有助于判断胃癌的预后。

紫杉醇或奥沙利铂为主化疗方案治疗晚期胃癌的临床观察

目的:比较含紫杉醇或奥沙利铂的联合化疗方案一线治疗晚期胃癌的近期疗效、远期疗效及不良反应,并对两类方案的安全性进行评价。方法:84例晚期胃癌患者分为A、B两组,A组44例,采用紫杉醇联合氟脲嘧啶及顺铂的化疗方案;B组40例,采用奥沙利铂联合氟尿嘧啶的化疗方案。两组患者接受化疗均至少2周期,每2周期评判一次治疗效果。结果:A组客观有效率、疾病控制率、中位疾病进展时间、中位生存期、1年生存率分别为50%、84.1%、7.0个月、11.2个月和34.2%;B组分别为50%、75%、6.5个月、10.8个月和33.6%。A、B两组间比较,在客观有效率与生存期方面无显著性差异(P>0.05)。A组主要不良反应为血液学毒性和脱发,B组主要不良反应为外周神经毒性。结论:以紫杉醇或奥沙利铂为主的联合化疗方案治疗晚期胃癌,均有较好近期和远期疗效,两种方案疗效无显著差异,不良反应的特点有差别,但均可耐受,可根据患者个体的状况选择应用。

成纤维细胞激活蛋白的表达与胃癌恶性生物学行为的关系

目的探讨成纤维细胞激活蛋白(Fibroblast activation protein,FAP)在胃癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测58例胃癌组织中FAP的表达,分析其与胃癌恶性生物学行为之间的关系。结果在58例胃癌组织中FAP表达阳性率为79.3%,其在正常胃组织中无表达。FAP表达与胃癌组织的分化程度、分期和分型有关(P<0.01或P<0.05),而与淋巴结转移无关。提示FAP的表达与胃癌恶性表型有关,即随着胃癌恶性程度的增强FAP表达有不同程度的增多。结论FAP的高表达与胃癌恶性表型有关,可作为反映胃癌恶性生物学行为的指标之一。

lncRNA GHET1通过Wnt/β-catenin信号通路对子痫前期滋养层细胞生物学行为的影响

目的:探讨子痫前期(PE)患者胎盘组织中长链非编码RNA胃癌高表达转录本1(lncRNA GHET1)的表达及其对滋养层细胞增殖、细胞周期进展和侵袭能力的影响,并阐明其作用机制。方法:30名孕产妇分为正常孕产妇组(正常组) 15例和PE孕产妇组(PE组) 15例,HE染色观察2组研究对象胎盘组织病理形态表现。体外培养滋养层HTR-8细胞,转染过表达lncRNA GHET1及对照序列质粒,并将滋养层细胞分为对照组(常规培养)、 GHET1组(转染过表达lncRNA GHET1质粒)和阴性对照组(转染阴性对照序列质粒)。实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测2组研究对象胎盘组织和各组HTR-8细胞中lncRNA GHET1 mRNA表达水平,CCK-8法检测各组HTR-8细胞增殖率,流式细胞术检测各组不同细胞周期HTR-8细胞百分率,Transwell小室实验检测各组HTR-8细胞侵袭能力,Western blotting法检测各组HTR-8细胞中细胞性骨髓细胞瘤病病毒癌基因(c-Myc)、细胞周期素D1 (cyclinD1)、上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平及Wnt/β-catenin信号通路中磷酸化糖原合成酶激酶3β (p-GSK3β)/糖原合成酶激酶3β (GSK3β)比值和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达水平。结结果果:与正常组比较,PE组患者胎盘组织绒毛发育不良,数量减少,绒毛内及间质血管分布紊乱,血管壁出现纤维素样坏死,钙化区域及绒毛上合体结节增加。与正常组比较,PE组患者胎盘组织中lncRNA GHET1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。与对照组比较,GHET1组HTR-8细胞中lncRNA GHET1 mRNA表达水平明显升高(P<0.05),阴性对照组HTR-8细胞中lncRNA GHET1 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,GHET1组HTR-8细胞增殖率、S期细胞百分率和侵袭细胞数明显升高(P<0.05),阴性对照组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,GHET1组HTR-8细胞中c-Myc、cyclinD1、Vimentin和β-catenin蛋白表达水平及p-GSK3β/GSK3β比值均明显升高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05),阴性对照组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:过表达lncRNA GHET1可能通过Wnt/β-catenin信号通路促进滋养层细胞增殖、细胞周期进展和细胞侵袭,发挥改善PE进展的作用。

维生素K_2联合苯那普利对裸鼠胃癌的治疗作用及其机制的研究

目的通过建立胃癌裸鼠种植瘤模型观察维生素(Vit)K2联合苯那普利对人胃癌SGC-7901裸鼠种植瘤的影响,以探讨两者对胃癌细胞的作用及机制。方法通过人胃癌SGC-7901细胞接种建立胃癌裸鼠种植瘤模型后,随机分成对照组、Vit K2组、苯那普利组和联合组,每组10只,灌胃2周后处死;TUNEL法检测各组胃癌细胞凋亡情况,免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)、caspase 3的蛋白表达情况。结果与对照组相比,药物组能明显抑制瘤体生长,而联合组较单独药物组抑制作用更明显(P<0.05)。联合组在抑制胃癌细胞生长和诱导胃癌细胞凋亡方面的作用均优于单独药物组(P<0.05)。与对照组比,联合组的VEGF表达阳性率明显下降(P<0.05)。结论 Vit K2与苯那普利联合能抑制裸鼠胃癌细胞生长,两者联合有协同作用,其机制可能为通过诱导细胞凋亡及抑制VEGF的表达。

Ki－67抗原在不同胃粘膜病变中的表达及其意义

本文应用免疫组化的方法，观察到Ｋｉ－６７在不同胃粘膜病变中的阳性表达率是随着病变恶性度的增高而增高的。从而提示：Ｋｉ－６７在胃粘膜各种病变中的表达状况可做为评估病变性潜能的一个指标。

ras p21 在早期胃癌及癌旁组织中的表达

用ＡＢＣ免疫组化法，对３６例早期胃癌及癌旁组织进行了ｒａｓｐ２１表达的检测。结果发现ｒａｓｐ２１阳性率分别为早期胃癌８８．９％（３２／３６）；癌旁异型增生６８．７％（２２／３２），其中中、重度异型增生为８３．３％、１００％，且随异型增生程度的加重其表达强度增加；癌旁肠化生４０％（３２／３０），其中不完全性结肠型化生阳性率为８４．６％；正常胃粘膜全部阴性。提示ｒａｓｐ２１的表达可能是胃癌形成过程中的关键步骤，ｒａｓｐ２１可以作为胃癌早期诊断的一种新的标志物。