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Effect of 5-Aza-2'-deoxycytidine on the P16 tumor suppressor gene in hepatocellular carcinoma cell line HepG2 被引量:21
1
作者 Li Hua Liu1 Wen Hua Xiao2 Wei Wen Liu3 1Department of Oncology, Southwest Hospital, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China (now working in Department of Gastroenterology, General Hospital of PLA, Lanzhou 730050, Gansu Province, China)2Department of Oncology3Department of Gastroenterology, Southwest Hospital, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2001年第1期131-135,共5页
INTRODUCTIONHepatocellular carcinoma (HCC) is one of the mostcommon human malignancies worldwide[1,2], and isclosely associated with infection of HBV and HCVand contamination of aflatoxin B1[3-6]. Althoughthe molecula... INTRODUCTIONHepatocellular carcinoma (HCC) is one of the mostcommon human malignancies worldwide[1,2], and isclosely associated with infection of HBV and HCVand contamination of aflatoxin B1[3-6]. Althoughthe molecular mechanisms of hepatocarcinogenesisremain poorly understood, an increasing number ofgenetic abnormalities have been recognized[7-10],for example, the p16 gene[11,12] the p53gene[13-18], the E-cadherin gene[19], and the c-mycgene[20]. 展开更多
关键词 Carcinoma Hepatocellular Liver neoplasms Antimetabolites Antineoplastic AZACITIDINE derivatives Carcinogenicity Tests Cell Cycle Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor p16 DNA Methylation Flow Cytometry gene Expression Regulation Neoplastic Humans RNA Messenger Research Support Non-U.S. Gov't tumor Cells Cultured
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Differential expression of a novel colorectal cancer differentiation-related gene in colorectal cancer 被引量:7
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作者 Xing-Guo Li Jin-Dan Song Yun-Qing Wang Key Laboratory of Cell Biology,Ministry of Public Health of China,China Medical University,Shenyang 110001,Liaoning Province,China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2001年第4期551-554,共4页
AIM: To investigate SBA2 expression in CRC cell lines and surgical specimens of CRC and autologous healthy mucosa. METHODS: Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used for relative quantification... AIM: To investigate SBA2 expression in CRC cell lines and surgical specimens of CRC and autologous healthy mucosa. METHODS: Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used for relative quantification of SBA2 mRNA levels in 4 human CRC cell lines with different grades of differentiation and 30 clinical samples. Normalization of the results was achieved by simultaneous amplification of beta-actin as an internal control. RESULTS: In the exponential range of amplification, fairly good linearity demonstrated identical amplification efficiency for SBA2 and beta-actin (82%). Markedly lower levels of SBA2 mRNA were detectable in tumors, as compared with the coupled normal counterparts P【0.01). SBA2 expression was significantly (0.01】P 【 0.05) correlated with the grade of differentiation in CRC, with relatively higher levels in well-differentiated samples and lower in poorly-differentiated cases. Of the 9 cases with lymph nodes affected, 78% (7/9) had reduced SBA2 mRNA expression in contrast to 24% (5/21) in non-metastasis samples 0.01】P【0.05). CONCLUSION: SBA2 gene might be a promising novel biomarker of cell differentiation in colorectal cancer and its biological features need further studies. 展开更多
关键词 gene Expression Regulation Neoplastic Cell Differentiation Colorectal neoplasms DNA Complementary Humans Molecular Sequence Data neoplasm Proteins polymerase chain reaction tumor Cells Cultured tumor Markers Biological
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Study on RIZ1 gene promoter methylation status in human esophageal squamous cell carcinoma 被引量:6
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作者 Shang-Wen Dong Peng Zhang +6 位作者 Yi-Mei Liu Yuan-Tao Cui Shuo Wang Shao-Jie Liang Zhun He Pei Sun Yuan-Guo Wang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2012年第6期576-582,共7页
AIM: To investigate the promoter region methylation status of retinoblastoma protein-interacting zinc finger gene 1 (RIZ1) in the human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell lines and tissues and verify ... AIM: To investigate the promoter region methylation status of retinoblastoma protein-interacting zinc finger gene 1 (RIZ1) in the human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell lines and tissues and verify the relationship between methylation of RIZ1 and oncogen- esis, tumor progression and metastasis etc of ESCC. METHODS: Methylation-specific polymerase chain reac- tion (MSP) was used to investigate the promoter region methylation status of RIZ1 in 6 ESCC cell lines. One cell line where RIZ1 promoter region methylation was de- tected was selected for the next study, where the cell line was treated with 5-aza-CdR. Real-time polymerase chain reaction was used to investigate its influence on the transcription of RIZ1. Experiments using frozenpathological specimens from 47 ESCC patients were performed using the same MSP methodology. RESULTS: Promoter methylation of RIZ1 gene was detected in TEl3, CaEs17 and EC109 cell lines and the cell line TEl3 was chosen for further study. The expression of RIZl mRNA in TE-13 was up-regulated after treatment with 5-aza-CdR. The rate of methyla- tion in carcinomas tissues was significantly higher than those in matched neighboring normal and distal ending normal tissue, and the deviation of data was statisti- cally significant (2,2 = 24.136, P 〈 0.01). Analysis of the gender, age familial history, tumour deviation, tumour saturation, lymph gland displacement and clinical stag- ing of 47 samples from ESCC patients showed that the fluctuation of data was not statistically significant. CONCLUSION: Promoter methylation may play an im- portant role in the epigenetic silencing of RIZ1 gene expression in human ESCC. RIZ1 is considered to be a potential tumor suppressor gene and may be a biologi- cal parameter for testing early stage human ESCC. 展开更多
关键词 Retinoblastoma protein-interacting zinc fingergene 1 tumor suppressor genes Esophageal squamouscell carcinoma Promoter methylation Methylation-spe-cific polymerase chain reaction
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Relationship between tumor suppressor gene p53 and tumors of adipose tissue
4
作者 王娅兰 丘钜世 熊敏 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2001年第1期39-43,共5页
OBJECTIVE: To investigate the relationship between p53 gene and tumors of adipose tissue at the level of protein and gene. METHODS: Immunohistochemical LSAB, PCR-SSCP and DNA sequencing were used in 82 cases. RESULTS:... OBJECTIVE: To investigate the relationship between p53 gene and tumors of adipose tissue at the level of protein and gene. METHODS: Immunohistochemical LSAB, PCR-SSCP and DNA sequencing were used in 82 cases. RESULTS: p53 protein is expressed only in liposarcomas, in which the positive staining rate was 48.08% (25/52). In different subtypes of liposarcomas, the positive staining rate in well differentiated liposarcomas was 30.00% (9/30), which is much lower than that of the poorly differentiated liposarcomas (P ATC) were detected by DNA sequencing. Another heterozygotic cosense mutation may exist at exon 6 codon 221 of p53 gene (GAG-->GAA). CONCLUSIONS: The data suggest that the p53 protein has a relationship with development, differentiation and malignancy of liposarcoma. Detecting the level of p53 protein expression may be valuable in evaluating the level of differentiation and malignancy of liposarcoma. There appear point mutation on exon 8, 6 of p53 gene. 展开更多
关键词 genes p53 Humans IMMUNOHISTOCHEMISTRY LIPOSARCOMA Mutation polymerase chain reaction Polymorphism Single-Stranded Conformational tumor suppressor Protein p53
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基于PCR的消减杂交法克隆脑胶质瘤肿瘤相关基因和抑癌基因 被引量:11
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作者 邓艳春 王吉村 +2 位作者 刘新平 季少平 药立波 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第6期680-684,共5页
背景与目的:脑胶质瘤是神经系统常见肿瘤,其发病机制尚不清楚。本研究运用基于PCR的消减杂交法克隆脑胶质瘤肿瘤相关基因和抑癌候选基因,并探讨胶质瘤的分子生物学发病机制。方法:从人脑胶质瘤组织标本中提取mRNA,反转录成cDNA,然后采... 背景与目的:脑胶质瘤是神经系统常见肿瘤,其发病机制尚不清楚。本研究运用基于PCR的消减杂交法克隆脑胶质瘤肿瘤相关基因和抑癌候选基因,并探讨胶质瘤的分子生物学发病机制。方法:从人脑胶质瘤组织标本中提取mRNA,反转录成cDNA,然后采用基于PCR的消减杂交法克隆脑胶质瘤肿瘤相关基因和抑癌基因。结果:在肿瘤相关候选基因组克隆到人星形细胞内富含的磷酸蛋白PEA15(phosphoproteinenrichedinastrocytesof15)和酸性纤维蛋白生长因子(acidfibroblastgrowthfactor,aFGF)同源物等基因,在抑癌候选基因组克隆到干扰素诱导蛋白17和ndr2等。ndr2在正常脑组织中广泛表达,在胶质瘤组织内无表达。结论:ndr2基因是抑癌候选基因,可能在胶质瘤的发生中起一定作用。 展开更多
关键词 胶质瘤 PCR 消减杂交 肿瘤相关基因 抑癌基因
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肝门部胆管癌外科治疗的临床与实验研究 被引量:23
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作者 黄志强 周宁新 +2 位作者 王大东 鲁建国 陈明易 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第9期691-694,共4页
肝管汇合部癌曾一直被认为是一少见病,患者生前很少能确诊.由于其位置深在,曾以为不可能手术切除.Altemeier et al1957年报告3例主要肝管的硬化型癌,其中1例在3 a 时间内曾手术7次而未得到确诊,直至最后肝门发生腺癌转移才明确诊断。
关键词 胆管癌 外科手术 治疗 基因治疗 实验
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原发性肝癌9号染色体等位基因杂合性丢失研究 被引量:6
7
作者 邵建永 梁小曼 +3 位作者 吴秋良 李晓明 候景辉 LiewChoongTsek 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第1期16-19,共4页
目的:对广东地区37例肝癌染色体9p的9个位点进行微卫星多态性分析,明确这些位点染色体等位基因杂合性丢失(LOH)的情况,定位该区域可能存在的与肝癌有关的肿瘤抑制基因。方法:对所取位点用PCR法进行微卫星多态性分析并确定发生LOH... 目的:对广东地区37例肝癌染色体9p的9个位点进行微卫星多态性分析,明确这些位点染色体等位基因杂合性丢失(LOH)的情况,定位该区域可能存在的与肝癌有关的肿瘤抑制基因。方法:对所取位点用PCR法进行微卫星多态性分析并确定发生LOH的位点;结果:30例(80.80%)在至少一个位点发生LOH,其中LOH频率最高的位点是D9554(60.60%),LOH频率高于50%的位点有位于9p21带的1FNA,D9S1747和D9S1752,6例在所有能够提供信息的位点均发生LOH,7例在所有9个位点均未发生LOH。提示本地区肝癌染色体9P缺失的区域主要位于D9554(9p24),和DgS1752,D9S1747,1FNA(9p21)。结论:本研究首次发现肝癌在染色体9p24区发生高频率LOH,染色体9p21区也发生高频率LOH,提示在染色体9p24和9p21区域可能存在多个与肝癌相关的肿瘤抑制基困。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 杂合性丢失 等位基因
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胃癌组织中干细胞标志物Sox2的表达及临床意义 被引量:7
8
作者 陈忠 谢峰 +3 位作者 钟丰云 杜鸿 严永敏 钱晖 《天津医药》 CAS 2016年第5期548-551,共4页
目的:探讨胃癌组织中干细胞标志物Sox2的表达及临床意义。方法 RT-PCR检测60例胃癌患者癌组织(胃癌组)和癌旁组织(癌旁组)中Sox2 mRNA表达,免疫组织化学法检测2组Sox2蛋白表达水平。比较Sox2 mRNA阳性表达情况在不同年龄、性别、... 目的:探讨胃癌组织中干细胞标志物Sox2的表达及临床意义。方法 RT-PCR检测60例胃癌患者癌组织(胃癌组)和癌旁组织(癌旁组)中Sox2 mRNA表达,免疫组织化学法检测2组Sox2蛋白表达水平。比较Sox2 mRNA阳性表达情况在不同年龄、性别、肿瘤大小、组织类型、TNM分期、分化程度、浸润深度及淋巴结转移中的差异。结果胃癌组Sox2 mRNA阳性表达率53.3%(32/60)高于癌旁组的20.0%(12/60);Sox2 mRNA的相对表达强度高于癌旁组(0.724±0.209 vs.0.256±0.065,P<0.01)。胃癌组Sox2蛋白的阳性表达率50.0%(30/60)高于癌旁组的16.7%(10/60,P<0.01)。胃癌组Sox2 mRNA阳性表达率临床TNM分期(Ⅲ+Ⅳ)组高于(Ⅰ+Ⅱ)组,低、未分化组高于中、高分化组,浸润深度T3~T4组高于T1~T2组,淋巴结转移组高于无转移组(均P<0.05或P<0.01)。结论胃癌组织中Sox2高表达与其发生、侵袭、进展及转移有关,可作为胃癌诊疗新的分子标志物。 展开更多
关键词 胃肿瘤 肿瘤干细胞 基因 肿瘤抑制 免疫组织化学 逆转录聚合酶链反应 干细胞标志物Sox2
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肺癌中GRIM-19 mRNA的表达及其临床意义 被引量:5
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作者 赵继京 叶静 +2 位作者 黄燕 肖卫华 刘荣玉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第6期595-598,共4页
目的了解干扰素/维甲酸诱导凋亡相关基因(GRIM-19)在肺癌中的表达及其临床意义。方法RT-PCR检测40例肺癌患者的癌组织和癌旁组织中GRIM-19 mRNA表达水平,用Western blot法验证20例肺癌组织中GRIM-19蛋白表达情况,并分析GRIM-19 mRNA表... 目的了解干扰素/维甲酸诱导凋亡相关基因(GRIM-19)在肺癌中的表达及其临床意义。方法RT-PCR检测40例肺癌患者的癌组织和癌旁组织中GRIM-19 mRNA表达水平,用Western blot法验证20例肺癌组织中GRIM-19蛋白表达情况,并分析GRIM-19 mRNA表达与临床病理参数之间的关系。结果肺癌组织中GRIM-19 mRNA表达水平低于癌旁组织,两组间差异有显著性(P<0.05),并且mRNA表达水平的降低伴随有蛋白表达水平的相应下降。GRIM-19 mRNA水平与临床病理分期之间有关联(P<0.05),Ⅰ~Ⅱ期Grim19 mRNA表达量显著高于Ⅲ~Ⅳ期中的表达,而与患者性别、年龄、组织分型、吸烟指数之间均无关联(P>0.05)。结论GRIM-19 mRNA的表达下降是肺癌发生过程中的重要事件,可能与肺癌的发生及进展有关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 基因 肿瘤抑制 干扰素类 维甲酸 逆转 录聚合酶链反应
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聚合酶链反应分析多肿瘤抑癌基因1第二外显子纯合性缺失 被引量:6
10
作者 刘虎 桂淑玉 +1 位作者 汪渊 周青 《安徽医科大学学报》 CAS 2000年第3期173-175,共3页
目的 摸索可靠、高效和特异的聚合酶链反应 (PCR)条件 ,分析多肿瘤抑癌基因 1(MTS1)第二外显子纯合性缺失。方法 对一系列PCR参数进行摸索同时设立对照 ,并对PCR产物进行Southernblot分析。结果 PCR产物是特异的MTS1第二外显子。结... 目的 摸索可靠、高效和特异的聚合酶链反应 (PCR)条件 ,分析多肿瘤抑癌基因 1(MTS1)第二外显子纯合性缺失。方法 对一系列PCR参数进行摸索同时设立对照 ,并对PCR产物进行Southernblot分析。结果 PCR产物是特异的MTS1第二外显子。结论 扩增MTS1第二外显子的PCR反应条件可以得到可靠、特异的结果。 展开更多
关键词 外显子 肿瘤 MTS基因 纯合性缺失
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胃癌组织中PTEN基因突变的研究 被引量:6
11
作者 邹明瑾 张兰 +2 位作者 罗兵 杨晓静 王立水 《山东大学学报(医学版)》 CAS 2004年第5期577-579,共3页
目的:研究抑癌基因PTEN突变高发区外显子5穴exon5雪和外显子8穴exon8雪在胃癌组织中的突变频率,探讨其突变与胃癌病理组织学分级和临床病理分期的关系。方法:应用聚合酶链反应鄄单链构像多态性分析(PCR鄄SSCP)方法检测胃癌组织和相应癌... 目的:研究抑癌基因PTEN突变高发区外显子5穴exon5雪和外显子8穴exon8雪在胃癌组织中的突变频率,探讨其突变与胃癌病理组织学分级和临床病理分期的关系。方法:应用聚合酶链反应鄄单链构像多态性分析(PCR鄄SSCP)方法检测胃癌组织和相应癌旁正常组织中PTEN基因的突变,并对突变样本的PCR产物进行测序分析。结果:42例胃癌组织中检测到PTEN基因突变3例,其中exon5突变1例,exon8突变2例,突变率为7.14%(3/42);42例相应癌旁正常组织未检测到突变,二者差异无统计学意义(P>0.05)。对42例胃癌进行组织学分级,低分化腺癌突变率为12.00%(3/25),中、高分化腺癌突变率为0(0/17),二者差异无统计学意义(P>0.05)。对42例胃癌临床病理分期,Ⅰ、Ⅱ期突变率为5.88%(1/17)熏Ⅲ、Ⅳ期突变率为8.00%(2/25),二者差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胃癌组织中存在PTEN基因突变;主要发生在低分化腺癌中;而PTEN基因突变与胃癌病理组织学分级和临床病理分期之间无明显相关性。 展开更多
关键词 胃肿瘤 基因 抑制 外显子 突变 聚合酶链反应 多态现象 单链构像
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胃粘膜肠化及异型增生和胃癌组织中多基因异常 被引量:38
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作者 王东旭 房殿春 刘为纹 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第8期855-859,共5页
目的探讨多种基因改变在癌前病变及胃癌组织中的作用,方法应用 PCR-RFLP,PCR-SSCP,RT-PCR 及免疫组化技术同时对60例肠化生,30例异型增生及52例胃癌组织中抑癌基因 APC,MCC,DCC,YNZ22,p53及癌基因 Ki-ras,Bcl-2多种变异形式进行检测。... 目的探讨多种基因改变在癌前病变及胃癌组织中的作用,方法应用 PCR-RFLP,PCR-SSCP,RT-PCR 及免疫组化技术同时对60例肠化生,30例异型增生及52例胃癌组织中抑癌基因 APC,MCC,DCC,YNZ22,p53及癌基因 Ki-ras,Bcl-2多种变异形式进行检测。结果随着肠化生粘膜向异型增生、胃癌的发展,多种基因改变的频率逐步升高,胃癌组织中 APC,DCC,YNZ22,p53,Bcl-2的改变频率分别为57.7%(30/52),43.1%(22/51),51.6%(16/31),67.3%(35/52),68.6%(35/51)显著高于肠化生上述基因的改变(APC 33.3%,DCC4.3%,YNZ22 19.4%,p5326.7%,Bcl-2 33.3%)(P<0.05,0.01),异型增生组织中DCC 基因改变为12.5%(3/24),也显著低于胃癌组织中的改变.Ⅲ型肠化中 APC 及 bcl-2基因蛋白表达率分别为61.1%,55.6%,p53突变及蛋白表达率为57.1%,27.8%,显著高于Ⅰ,Ⅱ型肠化中 APC,Bcl-2蛋白表达率(6.3%,23.8%)(P<0.01,O.05)及 p53突变及蛋白表达率(18.2%,2.4%)(P<0.05).肠型胃癌 APC,p53,Ki-ras 突变率分别为52.9%;82.4%;29.4%,显著高于胃型胃癌各基因的突变(APC 18.2%;p53 45.8%;Ki-ras 3.0%)(P<0.05).肠型胃癌 APC,Ki-ras,bcl-2基因的蛋白表达率分别为76.5%;41.2%;93.8%,胃型胃癌分别为30.3%;3.0%;54.5%,两型相比差别显著(P<0.01,0.05).APC,p53及 Bcl-2基因可能是肠化生癌变及肠型胃癌的热点基因,肠化生及异型增生阶段即可检测到基因改变的累积现象,但以胃癌组织中最显著。结论多种基因改变的累积与胃癌的发生及演进密切相关,不同类型肠化生分子改变机制不同,APC,p53及 Bcl-2基因有可能成为肠型胃癌早期诊断的分子标志。 展开更多
关键词 肠化生 异型增生 胃肿瘤 免疫组织化学
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KISS-1基因在肾癌中的表达及对细胞侵袭力的影响 被引量:7
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作者 张辉 赵丹懿 宋永胜 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期171-172,共2页
目的:检测肾癌原发灶和转移灶中KISS-1基因的表达并在体外实验中验证其缺失对细胞侵袭能力的影响。方法:选择30例肾癌患者,应用荧光定量PCR检测肾癌原发灶和转移灶中KISS-1基因mRNA的表达,应用RNA干扰技术获得KISS-1基因表达缺失的肾癌... 目的:检测肾癌原发灶和转移灶中KISS-1基因的表达并在体外实验中验证其缺失对细胞侵袭能力的影响。方法:选择30例肾癌患者,应用荧光定量PCR检测肾癌原发灶和转移灶中KISS-1基因mRNA的表达,应用RNA干扰技术获得KISS-1基因表达缺失的肾癌细胞株,检测干扰前后细胞的侵袭能力变化。结果:转移灶中的KISS-1mRNA表达较原发灶中明显下调,KISS-1表达与肿瘤远处转移呈显著相关。干涉前后都有细胞穿透滤膜,干涉后细胞数明显高于干涉前,细胞数分别为31±6和78±8,两组有显著差异(P<0.05)。KISS-1基因表达缺失的肾癌细胞侵袭能力明显增强。结论:KISS-1基因在肾癌中具有转移抑制作用,可能在肾癌转移治疗中发挥作用。 展开更多
关键词 肾癌 转移 肿瘤转移抑制基因 KISS-1基因 荧光定量PCR
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PTEN在胶质瘤干/祖细胞中变异状态的研究 被引量:4
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作者 赵耀东 张全斌 +1 位作者 楼美清 黄强 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2010年第6期646-651,共6页
目的为胶质瘤干/祖细胞来自神经干/祖细胞基因突变的推测寻找实验证据,以阐明二者之间的关联性。方法体外培养的胶质瘤干/祖细胞和神经干/祖细胞,经免疫细胞化学法鉴定后分别进行RNA提取、逆转录生成cDNA,以及针对PTEN的逆转录-聚合酶... 目的为胶质瘤干/祖细胞来自神经干/祖细胞基因突变的推测寻找实验证据,以阐明二者之间的关联性。方法体外培养的胶质瘤干/祖细胞和神经干/祖细胞,经免疫细胞化学法鉴定后分别进行RNA提取、逆转录生成cDNA,以及针对PTEN的逆转录-聚合酶链反应;扩增产物进行正反双向测序并与野生型PTEN基因序列比较肽链序列的异同。结果神经干/祖细胞PTEN mRNA序列无变异,胶质瘤干/祖细胞存在大量同义突变和少量异义突变,主要包括第1号外显子第22~42位碱基突变、第7号外显子第712位碱基突变和第9号外显子第1192位碱基突变。致使PTEN肽链上第8~14位氨基酸由原来的"IVSRNKR"突变为"LRLICIF",第238位的"苯丙氨酸(F)"突变为"亮氨酸(L)",第398位的"苏氨酸(T)"突变为"丝氨酸(S)"。其中第8~14位和第238位氨基酸突变,使PTEN与细胞膜的结合能力下降,细胞外信号难以转导进入细胞内;第398位氨基酸突变则使PTEN稳定性破坏,易被降解。结论 PTEN基因在胶质瘤恶性转化的早期即已失活,可能是胶质瘤形成的始动因素之一。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 肿瘤干细胞 基因 肿瘤抑制 突变 聚合酶链反应
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胃癌中MTS1/p16基因甲基化状态及P16蛋白的表达 被引量:6
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作者 杨苏敏 杨丽苏 +4 位作者 李丽 邓丽英 王崇宇 原学斌 申向东 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第12期1427-1429,共3页
p16基因(CDKN2,MTS1)是新近发现的又一重要的抑癌基因,该基因编码的 P16蛋白对细胞生长起调控作用.研究表明许多恶性肿瘤中存在 p16基因的纯合性缺失或异常性甲基化,在胃癌中的缺失也有报道,但缺失率低且未发现突变.因此,我们对胃癌中 ... p16基因(CDKN2,MTS1)是新近发现的又一重要的抑癌基因,该基因编码的 P16蛋白对细胞生长起调控作用.研究表明许多恶性肿瘤中存在 p16基因的纯合性缺失或异常性甲基化,在胃癌中的缺失也有报道,但缺失率低且未发现突变.因此,我们对胃癌中 p16基因外显子1的甲基化状况及 P16蛋白表达进行研究,并与正常胃粘膜组织进行比较,旨在进一步探明胃癌中 p16基因是否以甲基化方式失活及P16蛋白表达在胃癌发生中的作用. 展开更多
关键词 胃肿瘤 基因表达 PCR 免疫组织化学
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人垂体肿瘤转化基因1在卵巢癌组织中的表达及其意义 被引量:4
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作者 成夜霞 冯捷 +2 位作者 张辛燕 付天云 姚煜 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1026-1030,共5页
背景与目的:人垂体肿瘤转化基因1(humanpituitarytumortransforminggene1,hPTTG1)是新近发现的一个癌基因。我们用基因表达谱芯片对晚期卵巢低分化浆液性癌进行卵巢癌相关基因的筛查,发现该基因在这种卵巢癌中明显高表达。本研究对不同... 背景与目的:人垂体肿瘤转化基因1(humanpituitarytumortransforminggene1,hPTTG1)是新近发现的一个癌基因。我们用基因表达谱芯片对晚期卵巢低分化浆液性癌进行卵巢癌相关基因的筛查,发现该基因在这种卵巢癌中明显高表达。本研究对不同临床分期、不同病理类型及不同组织学分级的上皮性卵巢癌组织hPTTG1的表达进行检测,探讨该基因在卵巢癌发生发展中的作用。方法:用非竞争性RT-PCR方法半定量检测27例卵巢癌及4例正常卵巢组织中hPTTG1mRNA的表达,用免疫组化方法检测该27例卵巢癌及18例正常卵巢组织中hPTTG1蛋白的表达。结果:在正常卵巢组织中hPTTG1mRNA有低水平的表达,而卵巢癌组织hPTTG1mRNA表达高于正常,两者之间有显著性差异(P<0.01),卵巢癌组织较正常卵巢组织表达倍增1.1~4.8,中位倍增2.4。进一步分析卵巢癌组织中hPTTG1mRNA表达水平与临床分期及病理分级的关系,未发现hPTTG1mRNA表达水平的高低与临床分期具有相关性,但发现hPTTG1mRNA倍增与肿瘤分化程度密切相关(r=0.686,P<0.05)。hPTTG1蛋白在所有卵巢癌组织中表达,而在正常卵巢组织中未检测到hPTTG1蛋白的表达。结论:hPTTG1表达在早期卵巢癌即发生改变,其表达可能与不良分化有关;hPTTG1在卵巢癌组织中高表达,可能是卵巢癌的一个分子标志。 展开更多
关键词 卵巢癌 人垂体肿瘤转化基冈1 RT-PCR 免疫组织化学
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人TNFα真核表达载体的构建及其在人肝癌耐药细胞株HepG2/ADM中的稳定表达 被引量:3
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作者 丁磊 吴挺 +4 位作者 陈孝平 张志伟 曹斌 靖凯 赵旭 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第4期261-264,共4页
目的:构建可在真核细胞内表达人肿瘤坏死因子alpha(hTNF-α)基因的真核表达载体,建立稳定表达hTNF-α基因的细胞模型。方法:应用RT-PCR的方法从分离的正常人外周血单核细胞(LPS刺激)中,扩增出hTNF-αcDNA,连接至载体pMD18-Tvector中,经... 目的:构建可在真核细胞内表达人肿瘤坏死因子alpha(hTNF-α)基因的真核表达载体,建立稳定表达hTNF-α基因的细胞模型。方法:应用RT-PCR的方法从分离的正常人外周血单核细胞(LPS刺激)中,扩增出hTNF-αcDNA,连接至载体pMD18-Tvector中,经酶切鉴定与序列测定证实;以亚克隆法构建于真核表达载体pBK-CMV的相应酶切位点,转化至大肠埃希菌DH5α,最后将表达的pBK-hTNFα重组蛋白行SDS-PAGE电泳,并作考马斯亮蓝染色分析,Westernblot鉴定;经脂质体Lipo-fectamine2000转染HepG2/ADM细胞后,经G418筛选,通过ELISA、RT-PCR方法检测其在体外转染肝癌耐药细胞HepG2/ADM后hTNFα基因和蛋白的表达。结果:自正常人外周血单核细胞中克隆的hTNF-αcDNA成功连接到pMD18-Tvector,用BamHⅠ和HindⅢ双酶切、经序列测定证实,与Genbank的序列完全一致;pBK-hTNFα的克隆表达重组蛋白经Westernblot证实此蛋白为hTNFα。克隆基因正确插入载体pBK-CMV中。pBK-hTNFα经脂质体介导转染肝癌耐药细胞后,ELISA、RT-PCR方法检测到其在转染细胞中稳定表达。结论:通过DNA重组技术成功地构建了可在体外稳定表达hTNF-αcDNA全长的真核表达载体pBK-hTNFα。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肿瘤坏死因子α/遗传学 DNA 重组 基因表达 遗传载体 聚合酶链反应
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TGF-β及其伙伴分子Smad4在胃癌组织中的表达 被引量:5
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作者 李乐平 靖昌庆 +2 位作者 刘洪俊 石玉龙 许晓群 《中国现代普通外科进展》 CAS 2007年第3期194-198,共5页
目的:探讨TGF-β及其伙伴分子Smad4在胃癌组织中的表达。方法:利用逆转录(RT)-PCR技术测定胃癌组织TGF-β mRNA和Smad4 mRNA水平,并分析两者与胃癌患者各项临床病理指标间的关系。结果:Smad4 mRNA在胃癌组织中的阳性表达率明显下降。TGF... 目的:探讨TGF-β及其伙伴分子Smad4在胃癌组织中的表达。方法:利用逆转录(RT)-PCR技术测定胃癌组织TGF-β mRNA和Smad4 mRNA水平,并分析两者与胃癌患者各项临床病理指标间的关系。结果:Smad4 mRNA在胃癌组织中的阳性表达率明显下降。TGF-β和Smad4均与胃癌组织的分化程度、肿瘤大小、浸润深度、淋巴转移和TNM分期有关。Smad4 mRNA在胃癌组织分化程度高、肿瘤<5cm、浸润深度浅、无淋巴转移、TNM分期较早的患者中阳性表达率高。TGF-β mRNA在胃癌组织中的阳性表达率明显升高。TGF-β mRNA在胃癌组织分化程度高、肿瘤<5cm、浸润深度浅、无淋巴转移、TNM分期较早的患者中阳性表达率低。胃癌组织中TGF-β和Smad4表达间呈负相关。结论:TGF-β和Smad4共同调节胃癌的发生、发展及其生物学行为。 展开更多
关键词 胃肿瘤 逆转录-聚合酶链反应 转化生长因子 β SMAD4基因
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增殖抑制基因HSG与乳腺癌浸润和转移的相关性 被引量:5
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作者 付玉环 姜广建 夏庆安 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第12期1128-1131,共4页
目的:研究增殖抑制基因(HSG)在乳腺癌组织中的表达,探讨其与乳腺癌发生、发展、浸润和转移的关系.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western Blot)方法检测46例乳腺癌组织、27例乳腺增生组织、30例乳腺纤维腺瘤组织和18... 目的:研究增殖抑制基因(HSG)在乳腺癌组织中的表达,探讨其与乳腺癌发生、发展、浸润和转移的关系.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western Blot)方法检测46例乳腺癌组织、27例乳腺增生组织、30例乳腺纤维腺瘤组织和18例癌旁正常乳腺组织中HSG mRNA及其蛋白的表达情况.结果:46例乳腺癌组织中HSG mRNA及其蛋白的相对表达水平和表达率分别为(0.87±0.14)和43.48%,(0.67±0.11)和45.65%,其表达率显著低于癌旁正常乳腺组织的(1.28±0.09)和83.33%,(1.17±0.36)和88.89%;乳腺纤维腺瘤的(1.36±0.19)和86.67%,(1.23±0.28)和90.00%;乳腺增生组织的(1.19±0.12)和70.37%,(0.93±0.24)和74.07%(P<0.05).相关性分析表明,HSG的表达与肿瘤的组织学分级、淋巴结转移和ER有关(P<0.05),而与患者的年龄、肿瘤大小和TNM分期等无相关性(P>0.05).结论:乳腺癌患者HSG的低表达,更易发生淋巴结转移,提示HSG不仅与乳腺癌的发生发展有关,而且与乳腺癌的浸润和转移密切相关,可作为预测乳腺癌转移的重要生物学指标. 展开更多
关键词 基因 抑制 乳腺肿瘤 逆转录聚合酶链反应 印迹法 蛋白质
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Syk基因在食管鳞癌组织中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 刘泓基 臧真真 +4 位作者 侯巧燕 陆竞艳 杨峻 林中 赵永忠 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第1期33-38,共6页
目的:分析食管鳞癌组织及其对应癌旁组织中Syk蛋白和mRNA的表达,探讨其与食管鳞癌临床恶性生物学行为的关系.方法:采用免疫组织化学法检测48例食管鳞癌组织及其对应癌旁组织中Syk蛋白的表达;RT-PCR法检测43例食管鳞癌组织及其对应癌旁... 目的:分析食管鳞癌组织及其对应癌旁组织中Syk蛋白和mRNA的表达,探讨其与食管鳞癌临床恶性生物学行为的关系.方法:采用免疫组织化学法检测48例食管鳞癌组织及其对应癌旁组织中Syk蛋白的表达;RT-PCR法检测43例食管鳞癌组织及其对应癌旁组织中SykmRNA的表达,并观察其与食管鳞癌患者肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移的关系.结果:食管鳞癌组织Syk蛋白表达阳性率显著低于癌旁组织(16.67%vs89.58%,P<0.05);Syk蛋白表达与肿瘤TNM分期相关(χ2=6.713,P<0.05);Syk在淋巴结转移组中的阳性表达率显著低于无淋巴结转移组(3.03%vs29.41%,P<0.05);Syk表达与肿瘤大小无关(χ2=0.017,P>0.05).食管鳞癌组织中SykmRNA的表达量明显低于其在对应癌旁组织中的表达量(t=-11.27,P<0.05).结论:Syk蛋白和mRNA在食管鳞癌中表达缺失与其发生及转移倾向相关,Syk可能是食管鳞癌的肿瘤抑制基因,可能作为分子标记而用于食管鳞癌的早期诊治. 展开更多
关键词 食管鳞癌 脾酪氨酸激酶 免疫组织化学 逆转录-聚合酶链反应 抑癌基因
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