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天麻抗真菌蛋白GAFP-Ⅰ的一级结构和cDNA克隆
被引量:
11
1
作者
胡忠
黄清藻
+1 位作者
刘小烛
杨俊波
《云南植物研究》
CSCD
1999年第2期131-138,共8页
天麻抗真菌蛋白GAFP-Ⅰ是从天麻(GastrodiaelataBl)顶生球茎分离的14kD蛋白,它能强烈抑制腐生真菌菌丝的生长,在天麻限制和防止密环菌(Armilariamelea)侵染球茎的防卫机制中起重要作用...
天麻抗真菌蛋白GAFP-Ⅰ是从天麻(GastrodiaelataBl)顶生球茎分离的14kD蛋白,它能强烈抑制腐生真菌菌丝的生长,在天麻限制和防止密环菌(Armilariamelea)侵染球茎的防卫机制中起重要作用。本文报告GAFP-Ⅰ的一级结构和cDNA克隆的核苷酸序列。首先测得N-末端7个氨基酸序列为SDRLNSG-用以合成一个简并引物,由天麻营养球茎提取RNA,通过3′-RACE技术扩增到一个600bp的cDNA片段,直接克隆到pGE-T载体中测定核苷酸序列。根据cDNA核苷酸序列和用羧肽酶A测得GAFP-Ⅰ的C-末端为-ASG,确认该cDNA含有429bp编码区,它编码一条129个氨基酸的GAFP-I和14个氨基酸的C-末端扩展肽。同时,分离和纯化GAFP-Ⅰ经过羟胺裂解和α-糜乳胰蛋白酶消化产生的肽段,经自动Edman降解程序测出它们的氨基酸序列。结果表明,由此测出的GAFP-Ⅰ氨基酸序列和由cDNA核苷酸序列推导出的序列984%一致。GAFP-Ⅰ由129个氨基酸组成,富含Asn(19)、Gly(14),29和52位间有一对双硫键,计算分子量为13958Da。GAFP-Ⅰ与雪花莲(Galan?
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关键词
天麻
抗真菌蛋白
蛋白质一级结构
cdna
克隆
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职称材料
题名
天麻抗真菌蛋白GAFP-Ⅰ的一级结构和cDNA克隆
被引量:
11
1
作者
胡忠
黄清藻
刘小烛
杨俊波
机构
中国科学院昆明植物研究所
出处
《云南植物研究》
CSCD
1999年第2期131-138,共8页
基金
国家自然科学基金
文摘
天麻抗真菌蛋白GAFP-Ⅰ是从天麻(GastrodiaelataBl)顶生球茎分离的14kD蛋白,它能强烈抑制腐生真菌菌丝的生长,在天麻限制和防止密环菌(Armilariamelea)侵染球茎的防卫机制中起重要作用。本文报告GAFP-Ⅰ的一级结构和cDNA克隆的核苷酸序列。首先测得N-末端7个氨基酸序列为SDRLNSG-用以合成一个简并引物,由天麻营养球茎提取RNA,通过3′-RACE技术扩增到一个600bp的cDNA片段,直接克隆到pGE-T载体中测定核苷酸序列。根据cDNA核苷酸序列和用羧肽酶A测得GAFP-Ⅰ的C-末端为-ASG,确认该cDNA含有429bp编码区,它编码一条129个氨基酸的GAFP-I和14个氨基酸的C-末端扩展肽。同时,分离和纯化GAFP-Ⅰ经过羟胺裂解和α-糜乳胰蛋白酶消化产生的肽段,经自动Edman降解程序测出它们的氨基酸序列。结果表明,由此测出的GAFP-Ⅰ氨基酸序列和由cDNA核苷酸序列推导出的序列984%一致。GAFP-Ⅰ由129个氨基酸组成,富含Asn(19)、Gly(14),29和52位间有一对双硫键,计算分子量为13958Da。GAFP-Ⅰ与雪花莲(Galan?
关键词
天麻
抗真菌蛋白
蛋白质一级结构
cdna
克隆
Keywords
gastrodia elata
,
antifungal protein gafp-i
,
cdna cloning
,
hydroxylamine cleavage
分类号
S567.239 [农业科学—中草药栽培]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
天麻抗真菌蛋白GAFP-Ⅰ的一级结构和cDNA克隆
胡忠
黄清藻
刘小烛
杨俊波
《云南植物研究》
CSCD
1999
11
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